两种碘化丙啶染色DNA定量方法检测HL-60细胞凋亡结果的比较

碘化丙啶（propidium iodide,PI）是插入性核酸染料,直接插入双链核酸的2个碱基对之间,每5个碱基插入1个荧光分子,与核酸的结合均匀、稳定。细胞经过 RNA 酶处理后,PI 可以与细胞内 DNA 特异性结合,在流式细胞仪上经488 nm 激光激发,发出峰值610~620 nm 的荧光,可以准确的反映细胞群体中DNA 含量的分布情况,适用于 DNA 定量检测。

PUVA诱导HL-60细胞凋亡时对Caspase8、3蛋白的影响

目的观察Caspase8、3蛋白在补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法(PUVA)诱导人白血病HL-60细胞凋亡时的变化情况。方法用不同浓度中药补骨脂中提取的PSO和/或不同照射时间、波长为360nm的UVA作用于HL-60细胞,检测细胞凋亡率、在电镜下细胞超微结构改变及Caspase8、3蛋白的表达,用多因素方差分析法对定量资料进行统计分析。结果PSO、UVA照射及PUVA均可使细胞凋亡率增加,上调Caspase8、3蛋白的表达,PUVA的作用显著强于前两者;PUVA处理后的HL-60细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变。结论PUVA可通过激活Caspase8、3基因诱导HL-60细胞凋亡。

三七皂甙R1诱导HL-60细胞凋亡的初步研究

目的 :观察三七皂甙R1是否能诱导人白血病细胞株HL 60细胞凋亡及相关基因的变化。方法 :3 0 0～ 1 2 0 0 μg/ml 1三七皂甙R1处理HL 60细胞 ,光镜下观察细胞形态 ;MTT法测细胞生长抑制率 ;流式细胞仪检测凋忘峰。结果 :3 0 0～ 1 2 0 0 μg/ml 1三七皂甙R1可抑制HL 60细胞生长 ,抑制率有剂量依赖性。流式细胞仪检测凋亡峰随药物浓度增大而增加。结论 :三七皂甙R1可抑制HL 60细胞生长 ,诱导其凋亡。

VP-16诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的 :探讨 topo 抑制剂的抗瘤机制。方法 :选择人急性早幼粒细胞白血病细胞株 HL- 60为实验模型 ,以 VP- 1 6为诱导剂 ,用形态学观察、DNA电泳及流式细胞术 ( FCM)等方法对其凋亡情况进行了研究。 结果 :经 VP- 1 6处理的 HL- 60细胞呈典型凋亡形态学改变 ,出现梯状 DNA条带 ( DNA ladder) ,FCM DNA直方图上 G0 /G1峰前有明显的亚二倍体凋亡峰。表明经 VP- 1 6处理的 HL- 60细胞的确发生了凋亡 ,这种调亡作用对药物有浓度依赖性 ,但无严格时间依赖性 ,不需药物的持续作用 ,并与 S期细胞降低有关。而缺乏 topo 的 HPBL则无此作用 ,不受 VP- 1 6诱导而凋亡。结论 :诱导细胞凋亡是 VP- 1 6的抗瘤机制之一 ,且这种作用是由 topo 介导的。

高三尖杉酯碱诱导HL-60细胞凋亡过程的研究

目的 :探讨高三尖杉酯碱对HL - 6 0细胞凋亡过程的影响。方法 :DNA电泳及流式细胞术。结果 :DNA电泳出现细胞凋亡时特征性生化改变 -DNA“Ladder”样带。FCM显示在G0 G1峰前有一低DNA含量峰 ,即凋亡细胞峰。不同研究方法均表明HHT能诱导HL - 6 0细胞凋亡 ,其影响强度和作用时间及剂量呈依赖关系。结论 :HHT抗白血病的机理可能是通过诱导细胞凋亡实现的。

熊果酸诱导人白血病HL-60细胞凋亡作用

熊果酸（Ursolic acid,UA）,又名乌索酸,乌苏酸,是存在多种天然植物中的五环三萜类化合物,如白花蛇香草、山楂、女子贞、夏枯草等,熊果酸具有保护肝脏、降血脂、调节机体免疫、抗氧化和抗肿瘤等多种生物学活性,研究表明熊果酸可通过诱导细胞凋亡抑制多种肿瘤细胞的生长,如人乳腺癌、胃癌、肺癌、淋巴瘤等。关于熊果酸对人白血病HL-60细胞的增殖抑制作用、诱导凋亡作用及相关机制尚未见报道，本研究以HL-60细胞为研究对象，观察熊果酸对HL-60细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡作用，并采用流式细胞术、Westernblot技术研究熊果酸诱导HL-60细胞凋亡的分子机制，为熊果酸的开发利用提供实验基础和理论依据。

基因芯片分析显示昆明山海棠有机萃取液经NF- κB及线粒体信号传导途径诱导HL- 60细胞凋亡(英文)

目的 研究中草药昆明山海棠 Tripterygium hypoglaucum( THH)有机萃取液诱导人早幼粒白血病 HL-6 0细胞凋亡过程的信号传导通道及分子机制。方法 应用流式细胞仪研究了 THH有机萃取液诱导 HL - 6 0细胞的凋亡过程 ,并应用包含 3 0 0 0人类基因与 EST的基因芯片进行基因表达差异分析。结果 基因芯片杂交结果显示有 16个基因表达发生大于 2倍的显著变化 ,这些基因同细胞生长 ,细胞周期调控 ,细胞分化 ,以及压力反应有关。部分基因在细胞凋亡过程中起关键作用 ,如 Caspase3和 Caspase8。结论 THH有机萃取液诱导 HL- 6 0细胞凋亡 ,该过程与 NF- κB和线粒体信号传导途径有关。

苦参碱联合高三尖杉酯碱对HL-60细胞凋亡的影响及其机制研究

近年来中药成分分子靶向治疗白血病成为国内外研究的热点中药有效成分高三尖杉酯碱（HHT）、苦参碱（MAT）等经多种途径与化疗药物协同作用于白血病细胞已受到越来越广泛的重视,但MAT联合HHT治疗急性髓系白血病（AML）的报道极少.诱导细胞凋亡亦是中药抑制肿瘤细胞增殖的一条重要途径,我们通过探讨MAT联合HHT对人AML细胞系HL-60细胞凋亡的影响及机制,为中药联合应用抗AML提供理论依据.

Ad5F35-IκBα△N重组腺病毒在柔红霉素诱导HL-60细胞凋亡中的作用

柔红霉素（DNR）是治疗急性白血病的常用药物，可诱导白血病细胞凋亡。DNR也是多药耐药肿瘤细胞耐药谱中最具代表性的细胞毒药物，许多白血病细胞对DNR具有一定的耐药性，大大影响了白血病的治疗效果。NF-κB是细胞核内重要的转录因子，它的激活被认为是许多肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性的关键因素。

Survivin基因表达在小剂量阿糖胞苷诱导白血病细胞凋亡中的作用

目的探讨Survivin基因在小剂量阿糖胞苷(Ara-c)诱导白血病细胞凋亡中的作用。方法用HL-60白血病细胞株进行传代培养,MTT试验检测不同浓度Ara-c对白血病细胞增殖的影响。光镜下观察细胞形态学变化,用流式细胞术(FCM)定量检测细胞凋亡及周期变化,RT-PCR检测Survivin基因表达。结果随干预时间延长,小剂量Ara-c诱导HL-60细胞凋亡的作用逐渐减弱,相反SurvivinmRNA表达逐渐增强。结论Survivin可能参与了小剂量Ara-c诱导白血病细胞凋亡的过程。

DADS通过MAPK和PI3K/Akt信号通路下调Mcl-1诱导白血病细胞凋亡

目的:二烯丙基二硫(DADS)为天然植物大蒜中的提取物,能抑制多种肿瘤细胞生长,本文探讨丝裂原激活的蛋白激酶(MAPKs)、3-磷酸肌醇激酶(PI3K/Akt)信号通路和Bcl-2家族成员在DADS诱导的人白血病HL-60细胞凋亡中的作用。方法:利用流式细胞术检测DADS诱导的白血病细胞凋亡,Western blot研究MAPKs和PI3K/Akt信号通路在DADS诱导的人白血病HL-60细胞凋亡中的变化及对Bcl-2家族凋亡相关蛋白表达的影响。结果:DADS呈浓度和时间依赖性地诱导人白血病HL-60细胞凋亡,在此过程中ERK/MAPK和PI3K/Akt信号通路被抑制,而p38MAPK信号通路被激活,ERK/MAPK和PI3K/Akt信号通路通过降低Mcl-1(myeloid cell leukemia-1)和升高Bax的表达诱导人白血病细胞凋亡,而p38MAPK则不是通过调控Mcl-1和Bax的表达诱导人白血病细胞凋亡,进一步利用RNA干扰技术沉默Mcl-1基因可增加DADS对HL-60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。结论:MAPK和PI3K/Akt信号通路通过下调Mcl-1的表达参与了DADS诱导的HL-60细胞凋亡作用。

DADS对人白血病细胞和淋巴瘤细胞诱导凋亡作用比较研究

大蒜及其烯丙基硫化物的抗肿瘤作用正日益受到关注[1-2].我们的前期研究显示,DADS对人白血病HL60细胞具有双效作用,小剂量DADS（〈1.25mg·L^-1）诱导人白血病细胞分化,而中等剂量DADS（〉1.25mg·L^-1）可诱导人白血病细胞凋亡[3-4].我们的前期研究表明,Rac2与DADS诱导人白血病细胞凋亡相关[5],且DADS通过活性氧介导的JNK信号通路诱导HL-60细胞的凋亡,且NADPH氧化酶的活化是DADS诱导HL-60细胞凋亡过程ROS的主要来源[6-7].本研究在前期工作基础上.

去除血清诱发细胞凋亡和Bcl-2蛋白的裂解

以过表达原癌基因bcl 2的HL 6 0细胞为材料 ,通过去除血清而诱发凋亡 .应用Westernblot方法检测细胞凋亡过程中Bcl 2裂解为分子量大约为 2 0kDa的片段 .进一步检测Bcl 2的结构变化 ,结果显示Bcl 2蛋白裂解发生在N端 ,裂解产物丢失了BH4结构域 .通过加入凋亡相关蛋白酶caspase 3抑制剂 ,可抑制2 0kDa片段的产生 ,表明凋亡过程中caspase 3的激活 .但细胞生长率测定表明 ,caspase 3抑制剂并不能阻止去血清诱发的细胞死亡 .

血管内皮生长因子反义寡核苷酸对白血病细胞系HL-60细胞作用的研究

本研究探讨VEGF ASODN抑制白血病细胞内源性VEGF mRNA的表达作用及其与白血病细胞凋亡的关系。用阳离子聚合物介导硫代修饰VEGF ODN转染体外培养白血病细胞系HL-60细胞后,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR检测VEGF mRNA表达,以细胞形态学,凝胶电泳,流式细胞术观察细胞凋亡。结果显示:反义组与错义组、空白对照组相比,在细胞增殖抑制率和VEGF mRNA的表达水平方面均具有显著性差异(p<0.05);错义组与空白对照组相比无统计学差异(p>0.05)。反义组可见细胞皱缩,颗粒增多,核固缩并出现细胞碎片,而错义组、空白对照组细胞轮廓清楚,胞体透亮,生长旺盛;反义组有凋亡梯形带,错义组和空白对照组仅见1条DNA条带;反义组细胞凋亡率达19.46%,与错义组、空白对照组相比具有显著性差异(p<0.05);错义组与空白对照组相比,无统计学差异(p>0.05)。VEGF ASODN联合VP16的细胞凋亡率与等同条件单用VP16组相比有统计学差异(p<0.05);且凋亡率具有时间和剂量依赖关系。结论:VEGF ASODN能抑制白血病细胞内源性VEGF mRNA的表达,诱导白血病细胞的凋亡,抑制增殖,且增强VP16对白血病细胞诱导凋亡作用,两者联合效应具有相加作用。