湖北食管癌HLA-DQB1的基因多态性

目的从基因水平探讨湖北地区汉族人食管癌 HEN-DQB1等位基因的遗传易感性.方法运用序列特异性引物聚合酶链反应技术,检测无亲缘关系湖北汉族健康人136例、食管癌组42例患者的 HLA-DQB1等位基因.SAS system 统计软件数据处理.结果湖北汉族人食管癌患者与正常人比较,HEN-DQB1*0301基因频率显著增高(0.2976 vs 0.1875),P=0.046,OR=1.835,病因分数=0.1354);两组间 HLA-DQB1其余各等位基因分布频率的比较,HLA-DQB1*0201(0.0833 vs 0.1016),*0301(0.2976 vs 0.1875),*0302(0.0595 vs 0859),*0303(0.2381 vs 0.1875),*0304(0.0000 vs 0.0039),*0401(0.0714 vs 0.0469),*0402(0.0119 vs 0.0156),*0501(0.0357 vs 0.0703),*0502(0.0595 vs 0.0664),*0503(0.0119 vs 0.0195),*0504(0.0000 vs 0.0039),*0601(0.0595 vs 0.0781),*0602(0.0476 vs 0.0742),*0603(0.0000 vs 0.0078),*0604(0.0238 vs 0.0508),差异均无显著性.结论 HLA-DQB1*0301等位基因与湖北汉族人食管癌正关联,为其易感基因.

瘢痕疙瘩与HLA-II类基因相关性研究

目的 :探讨免疫遗传学因素在瘢痕疙瘩发病机制中的作用。方法 :用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)技术对 5 0例瘢痕疙瘩患者进行HLA Ⅱ类基因分型 ,并以 1 0 0例正常人的HLA Ⅱ类基因为对照。结果 :瘢痕疙瘩组HLA DQ5抗原频率 ( 3 0 % )明显高于对照组 ( 1 4% ) ,相对危险率 (RR) =2 .63 ;HLA DR1 7和HLA DQ8抗原频率 ( 2 % )明显低于对照组 ( 1 4% ,1 5 % ) ,RR =0 .1 3 ,0 .1 2。结论 :瘢痕疙瘩与HLA DQ5基因呈正相关 ,与HLA DR1 7和HLA DQ8基因呈负相关。HLA DQ5、HLA DR1 7和HLA

HLA-DR4基因与类风湿关节炎的关联性研究

目的 探讨人类白细胞抗原HLA -DR4基因与类风湿关节炎 (RA)的关联性。方法 采用特异性引物聚合酶链反应 (PCR -SSP)方法对山东地区汉族人群 132例类风湿关节炎患者及 130例正常健康者的HLA -DR4基因进行分析 ,并测定其基因频率。结果 HLA -DR4基因在 132例类风湿关节炎患者中的基因频率 (4 6 .2 % )显著高于其在 130例正常对照组中的基因频率 (19.2 % ,χ2 =2 1.6 2 4,P <0 .0 1)。结论 HLA -DR4基因与山东地区人群的类风湿关节炎易感性有关联。

PCR-SSP法HLA-A、B基因分型与血清学分型的比较

目的比较聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)进行HLA-Ⅰ类A、B抗原位点分型的准确性,并探讨血清学分型错误发生的原因。方法用PCR-SSP以及单克隆抗体血清学分型技术对HLA-A、B分型并比较。结果34例样本PCR-SSP基因分型无假阳性和假阴性出现。PCR-SSP法与血清学比较,血清学检出错误或漏检率分别为HLA-A位点23.5%,B位点26.5%。血清学发生错误或易混淆的抗原有:A2和A68、A32和A33,B5、B60和61。结论PCR-SSP法进行HLA-A、B抗原等位基因分型具有分辨率高、特异性强、重复性好、实验过程简捷快速、分型结果较血清学更加准确可靠的优点。

HLA-DRB1等位基因与内蒙古汉族儿童过敏性紫癜相关性的研究

目的:探讨过敏性紫癜(AP)的遗传背景及免疫学发病机制,为明确AP的病因学及预后提供免疫学方面的资料,同时也为探索其免疫治疗提供有价值的线索。方法:采用分析性研究策略和聚合酶链反应——序列特异性引物分型技术(PCR-SSP)对80例内蒙古地区汉族儿童AP病人和108例正常汉族儿童进行HLA-DRB 1等位基因型别分析。结果:汉族儿童HLA-DRB 1各等位基因均被检出。HLA-DRB 1*010x、HLA-DRB 1*120x的基因频率在AP患儿组较正常对照组明显升高(分别为13.75%vs 4.16%、12.50%vs5.56%,);HLA-DRB 1*080x的基因频率在AP患儿组较正常对照组明显降低(2.50%vs 8.33%)。这些基因频率在两组间的分布经统计学检验差异有显著性。其它HLA-DRB 1等位基因频率在两组间的分布经统计学检验差异无显著性。结论:HLA-DRB 1*010x、HLA-DRB 1*120x与AP的易感性呈正相关,可能是AP的易感基因。HLA-DRB 1*080x与AP的易感性呈负相关,可能是AP的保护基因。

湖南汉族群体HLA-DQA1位点等位基因多态性分析

目的 :分析湖南汉族群体HLA DQA1位点等位基因多态性。方法 :应用PCR/SSP和银染PCR/SSCP技术对 60名无血缘关系湖南汉族健康个体作HLA DQA1基因分型。结果 :检出 1 0种HLA DQA1等位基因 ,基因频率范围为 0 .0 1 67～ 0 .2 2 54 ;HLA DQA1 0 30 2 , 0 50 1 , 0 1 0 2为常见等位基因 ,HLA DQA1 0 1 0 1 , 0 2 0 1 , 0 4 0 1为少见等位基因。检出 2 6种基因型 ,基因型观察值和理论值分布符合Hardy Weinberg平衡 (P >0 .0 5)。 5例样本的PCR/SSP分型只能确定一个等位基因 ,另一等位基因经PCR/SSCP确认。结论 :提供了湖南汉族群体HLA

套式序列特异引物聚合酶链反应技术的建立及其在HLA配型中的应用

建立套式序列特异引物聚合酶链反应（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法，用于ＨＬＡ－ＤＲ基因分型。利用一对外引物扩增ＨＬＡ－ＤＲＢ１第２外显子部分片段（２８３ｂｐ），作为第２次扩增的模板，ＰＣＲ循环参数：９８℃、５分钟；９４℃、６０秒，７２℃、３０秒，６３℃、３０秒，１５个循环；利用各组特异性引物进行第２次扩增，产生与血清学相对应的ＨＬＡ－ＤＲ型别，ＰＣＲ循环参数：９４℃、３０秒，７２℃、３０秒，６０℃、３０秒，２０个循环。结果表明本方法特异性好。在７个家庭２０例受试者中进行了应用，与血清学方法比较，两方法确定出的型别，８０％一致，２０％不同，另有血清学为“空”的８个型别，基因分型全部为ＤＲ９阳性。

HLA-DR抗原β链的共同表位与类风湿关节炎相关性研究

目的 探讨人类白细胞抗原 (HLA) DR基因编码的共同表位 (SE)与武汉籍汉族类风湿关节炎 (RA)的相关性。方法 采用聚合酶链反应 序列特异性引物技术 (PCR SSP) ,对武汉籍汉族人群 78例RA患者和 12 6例健康者的HLA DRB1 0 1、 0 4基因型进行检测。结果 RA患者中具有编码QKRAA或QRRAA的共同表位阳性率为 43 6 % ,明显高于正常对照组 (15 1% ,P <0 0 1) ;SE阳性的RA患者的关节压痛数、侵蚀性病变以及关节外表现明显高于SE阴性的RA患者(P <0 0 1)。结论 HLA DR基因编码的SE与武汉籍汉族RA易感性及疾病严重性相关 。

HLA-DRB1基因多态性与新疆哈萨克族人群结核病易感性的研究

目的:研究HLA-DRB1基因多态性与新疆哈萨克族人群结核病(TB)的相关性。方法:采用病例-对照的研究方法,应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术对231例新疆哈萨克族肺结核患者和230例新疆哈萨克族健康对照者的13个HLA-DRB1等位基因进行分型,比较其等位基因频率(GF)并计算其比值比(OR)。结果:与新疆哈萨克族人群对照组相比,新疆哈萨克族人群结核病例组中HLA-DRB1*04显著增高(11.72%比6.75%,p<0.05,OR=1.889),HLA-DRB1*10也增高(2.86%比1.09%),但统计学上无显著性差异(Pc>0.05)。结论:HLA-DRB1*04可能是新疆哈萨克族人群结核病的易感基因。

人类白细胞抗原A、B和DRB1测序分型模棱两可结果的分布及解决

目的调查广西人群HLA-A、B、DRB1基因测序分型中模棱两可结果的分布状况,提出解决方案。方法采用聚合酶链反应-直接测序分型方法对1 000名中华骨髓库广西分库供者的HLA-A、B、DRB1基因进行测序分型,分析3个基因座模棱两可分型结果的分布情况,并分别采用高分辨聚合酶链反应-序列特异性引物法和组特异性测序引物法进行解决。结果 1 000份标本中,96.7%的标本HLA-A、B、DRB1基因至少有1个位点出现模棱两可结果,其中HLA-A、B、DRB1各位点出现模棱两可结果的比例分别为65.7%、58.8%、77.2%。对于检出的模棱两可结果标本,单独采用组特异性测序引物法可以解决87.37%HLA-A、93.54%HLA-B和60.49%的HLA-DRB1基因模棱两可分型结果,使用高分辨聚合酶链反应-序列特异性引物法解决12.63%HLA-A、4.76%HLA-B和15.29%HLA-DRB1基因模棱两可分型结果,剩余1.70%HLA-B和24.22%的HLA-DRB1基因模棱两可分型结果联合使用组特异性测序引物法和高分辨聚合酶链反应-序列特异性引物法解决。结论组特异性测序引物法和高分辨聚合酶链反应-序列特异性引物法分别对位于HLA-A、B和HLA-DRB1基因检测区内、外的模棱两可分型结果具有较高的解决能力,二者互为补充,可有效解决HLA高分辨基因分型结果模棱两可问题。