HLA-I类抗原及CD8分子在宫颈癌组织中的表达及意义

目的通过检测HLA-I类抗原及CD8分子在不同宫颈病变组织中的表达,探讨HLA-I类抗原及CD8分子的表达与宫颈癌之间的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及慢性宫颈炎组织中HLA-I类抗原及CD8分子的表达,并分析其与各临床病理指标的相关性。结果HLA-I类抗原在有核细胞中均有表达,其在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及慢性宫颈炎组织中的阳性表达率分别为22.6%、100.0%及100.0%,宫颈癌中的表达率明显降低(P<0.01),HLA-I类抗原在I期宫颈癌组织中的阳性表达率为46.7%明显高于II期0.0%(P<0.01);CD8分子在淋巴细胞中表达,其在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及慢性宫颈炎组织的阳性表达率与HLA-I类抗原相似,分别为22.6%、95.5%及100.0%,宫颈癌中的表达率明显降低(P<0.01),CD8分子在I期和II期宫颈癌组织中的阳性表达率分别为46.7%和0.0%(P<0.01)。HLA-I类抗原和CD8分子随着临床病理分期的升高而逐渐的表达减少甚至无表达。而二者与宫颈癌患者的组织分化程度和有无淋巴结转移无关(P>0.05)。HLA-I类抗原和CD8分子的表达存在正相关(Spearman秩相关系数rs=0.808,P<0.0005)。结论HLA-I类抗原和CD8分子在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中表达减少甚至无表达,二者在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的发生、发展中可能起着重要的保护作用。

慢性乙型肝炎患者HBV感染外周血淋巴细胞对HLA-I类抗原表达的影响

目的 探讨慢性乙型肝炎患者HBV感染外周血淋巴细胞 (PBL)对HLA I类抗原的影响及在乙型肝炎慢性化机制中的作用。方法 36例慢性乙型肝炎 ,2 0例正常对照 ,用荧光定量PCR(FQ PCR)法测定PBLHBVDNA水平 ;用流式细胞术 (FCM)检测PBLHLA I类抗原的表达情况 ,并对PBLHBVDNA阳性患者HBVDNA含量与相应HLA I类抗原表达的相关性进行分析。结果 慢性乙型肝炎患者PBLHLA I类抗原的表达率 (% )和平均荧光强度 (MFI)均低于正常对照组 (P <0 .0 1) ;PBLHBVDNA阳性组与阴性组比较 ,HLA I类抗原的表达率和MFI显著降低 (P <0 .0 1) ;17例PBLHBVDNA阳性者的PBLHBVDNA含量对数值与相应HLA I类抗原表达率和MFI均呈负相关 ,相关系数分别为 - 0 .8893和 - 0 .86 89。结论 HBV感染PBL可能是慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞HLA I类抗原表达降低的重要影响因素之一。

肾透明细胞癌和卵巢癌与HLAI类抗原关联性研究

目的 分析HLAI类抗原与肾透明细胞癌和卵巢癌的关联性 ,为确定与这些肿瘤的易感性和抵抗性有关的基因 ,并为寻找肿瘤特异性的抗原肽 ,开展肿瘤免疫诊断和治疗奠定基础。方法 实验采用微量淋巴细胞毒试验 ,分析 82例肾透明细胞癌和 2 1例卵巢癌患者外周血HLA A抗原和 B抗原的抗原频率。结果 与肾透明细胞癌和卵巢癌关联的HLAI类完全不同 ,其中与肾透明细胞癌关联的位点大大多于卵巢癌的位点 ,有A9、A11、A2 8、B15、B2 2、B2 7和B40 ;而与卵巢癌关联的HLAI类抗原位点只有A10、A36和B12 ,且卵巢癌关联位点的P值大于与肾透明细胞癌关联的HLAI类抗原的P值。经过校正P值计算后只有卵巢癌中的HLA A10抗原保持显著关联。结论 HLAI类抗原关联性研究显示 ,HLA A10可能为卵巢癌提供抵抗性。

ELISA测定血清可溶性HLA-I类抗原

目的 建立定量测定可溶性HLA I类抗原的ELISA方法。方法 测定上海地区汉族正常人群血清可溶性HLA I类抗原的含量 ,并进一步研究可能影响这一含量的因素。结果 测得 116例上海地区汉族正常个体血清可溶性HLA I类抗原的含量为 5 2 9 3 2±2 82 88ng/ml。结论 性别和常见HLA A位点抗原型别对血清可溶性HLA I类抗原的含量未造成显著影响。

有无家族史白癜风与HLA-Ⅰ类抗原的关联性研究

目的 探讨HLA Ⅰ类抗原与中国北方汉族人群中有及无家族遗传史白癜风的相关性。方法 家族史阳性及阴性白癜风患者各 2 0例 ,采用HLA血清学分型技术检测HLA A、B位点的抗原特异性。结果 与 10 0例正常对照比较 ,有明确家族史的白癜风患者HLA A10、B13、B15抗原频率显著增高 ,而无家族史的患者HLA A3 0 + 3 1、B15显著增高 (Pc均 <0 .0 1) ,非节段型HLA A10、A3 0 + 3 1、B13、B15显著增高 (Pc均 <0 .0 1) ,成年及未成年发病型HLA B13、B15显著增高 ,儿童发病型则仅HLA B13显著增高 (Pc均 <0 .0 1)。结论 该结果为进一步揭示白癜风的易感基因及免疫遗传发病机制提供了线索。

SLE患者AMLR与T细胞Ia抗原的改变及意义

本文以氚标胸腺嘧啶（￣３Ｈ－ＴｄＲ）掺入的淋巴细胞转化试验测定非Ｔ细胞刺激自身Ｔ细胞的增殖反应（ＡＭＬＲ）；用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）Ｗｕ３５和Ｗｕ２２通过ＰＡＰ免疫酶标组化技术测定ＣＤ３￣＋，ＣＤ４￣＋．ＣＤ８￣＋Ｔ细胞表面ＤＲ及ＤＱ抗原的表达。结果表明，活动期ＳＬＥ患者ＡＭＬＲ有明显减弱，Ｗｕ３５￣＋（ＨＬＡ－ＤＲ￣＋）Ｔ细胞百分率及Ｗｕ２２￣＋（ＨＬＡ－ＤＱ￣＋）Ｔ细胞百分率明显下降，并且是以ＣＤ４￣＋ＤＲ￣＋及ＣＤ＿４￣＋ＤＱ￣＋细胞增加为主，ＣＤ８￣＋ＤＲ￣＋及ＣＤ８￣＋ＤＱ￣＋细胞则表现为减少。提示ＳＬＥ患者ＡＭＬＲ改变与Ｔ细胞及亚型表面ＨＬＡ－ＤＲ及ＨＬＡ－ＤＱ抗原表达异常有关。

可溶性HLA-Ⅰ类抗原的含量在干扰素治疗慢性乙型肝炎中的变化及意义

测定可溶性HLA -I类抗原的含量在干扰素-α治疗慢性乙型肝炎中的变化,并分析其意义。血清可溶性HLA -I类抗原的含量用夹心ELISA方法测定。治疗第8周,完全反应组患者可溶性HLA -I类抗原的含量显著高于治疗前的水平;治疗第16周和第2 4周,可溶性HLA -I类抗原的含量均显著低于治疗前。部分反应组和无反应组在治疗过程中可溶性HLA -I类抗原的含量与治疗前相比无显著变化。可溶性HLA -I类抗原含量的变化反映了慢性乙型肝炎治疗中患者免疫功能受到调节。

肾移植受者血清可溶性HLA-I类抗原的动态监测

目的 了解血清可溶性ＨＬＡＩ类抗原（ｓＨＬＡＩ） 与肾移植受者发生急性排斥反应及感染的关系。 方法 应用酶联免疫法动态监测３６ 例肾移植受者ｓＨＬＡＩ水平。 结果 尿毒症组ｓＨＬＡＩ水平为（２－９４±０－３４）μｇ／Ｌ，显著高于正常对照组（０－７６±０－３３）μｇ／Ｌ（Ｐ＜ ０－０５） 。移植后功能稳定组ｓＨＬＡ降至（０－６３±０－３１ ）μｇ／Ｌ，显著低于尿毒症组（ Ｐ＜０－０５）。ｓＨＬＡＩ在发生排斥反应前３ 天及感染后５～７ 天显著升高。 结论 ｓＨＬＡＩ可作为监测肾移植受者急性排斥反应和感染的参数。

人类白细胞抗原G基因14bp缺失多态性与重度子痫前期发病的关系

目的 探讨人类白细胞抗原G（HLA-G）基因第8外显子14 bp缺失多态性与重度子痫前期发病的关系.方法 选择2008年10月至2009年2月在郑州大学第三附属医院妇产科住院的42例孕晚期重度子痫前期孕妇及其新生儿为重度子痫前期组.另选择同期正常孕晚期孕妇及其新生儿45例为健康晚孕组,两组孕妇均为汉族居民.采用PCR技术对两组孕妇及其新生儿进行HLA-G基因第8外显子14 bp缺失多态性的等位基因分析,分别比较两组孕妇及其新生儿之间等位基因及基因型的频率分布,通过母、儿基因型配伍,比较两组间基因型配伍频率分布的差异.结果 （1）重度子痫前期组中母、儿均为14 bp缺失纯合子（-14 bp/-14 bp）的基因型配伍的频率为14%（6/42）,显著低于健康晚孕组的33%（15/45）,两组比较,差异有统计学意义（P=0.038）;（2）重度子痫前期组孕妇HIA-G第8外显子14 bp缺失多态性的等位基因频率、基因型频率与健康晚孕组比较,差异均尤统计学意义（P〉0.05）;（3）重度子痫前期组新生儿HLA-G第8外显子14 bp缺失多态性等位基因＋14 bp频率为44%（37/84）、-14 bp为56%（47/84）,健康晚孕组新生儿＋14 bp为30%（27/90）、-14 bp为70%（63/90）,两组比较,差异虽无统计学意义,但存在差异性趋势（P=0.055）;重度子痫前期组新生儿（-14 bp/-14 bp）基因型频率为29%（12/42）,与健康晚孕组的49%（22/45）相比,存在差异性趋势（P=0.052）.结论 中国汉族孕妇中,HIJA-G第8外显子14 bp缺失多态性与重度子痫前期的发病有关;母、儿均为缺失纯合子（-14 bp/-14 bp）基因型配伍者,发生重度子痫前期的风险会降低.

卵裂期胚胎可溶性人类白细胞抗原G的表达及其与胚胎发育的关系

目的观察卵裂期胚胎可溶性人类白细胞抗原G(solublehumanleukocyteantigenG,sHLAG)的表达,并探讨sHLAG的表达与胚胎发育的关系。方法采用免疫组化标记法,检测177个卵裂期胚胎sHLAG的表达情况。结果177个卵裂期胚胎中,101个卵裂期胚胎有sHLAG蛋白表达,sHLAG的总表达率为571%(101/177)。其中双原核受精卵发育形成的卵裂期胚胎sHLAG的表达率为662%(90/136),三原核受精卵发育形成的卵裂期胚胎sHLAG的表达率为268%(11/41),两者比较,差异有统计学意义(P<001)。双原核受精卵发育形成的1级卵裂期胚胎sHLAG的表达阳性率为643%(18/28),2级卵裂期胚胎为917%(66/72),3级卵裂期胚胎为167%(6/36)。3者比较,差异有统计学意义(P<001)。三原核受精卵发育形成的Ⅰ级卵裂期胚胎sHLAG的阳性率为889%(32/36),与双原核受精卵发育形成的Ⅰ级卵裂期胚胎比较,差异有统计学意义(P<001)。双原核受精卵发育形成的≤4个细胞的胚胎sHLAG的表达率为567%(34/60),5个细胞及6个细胞的胚胎为679%(36/53),7个细胞及8个细胞的胚胎为870%(20/23),3者比较,差异无统计学意义(P>005)。结论卵裂期胚胎有sHLAG蛋白表达;且sHLAG表达与胚胎发育有关。

人类白细胞抗原G蛋白在胎盘组织中的表达及其基因多态性与妊娠肝内胆汁淤积症发病的关系

目的探讨人类白细胞抗原 G(HLA-G)蛋白在胎盘组织中的表达及其基因多态性与妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法选取2004年4月至10月间,在四川大学华西第二医院产科及四川省妇幼保健院产科行剖宫产分娩的晚孕妇女60例,其中 ICP 孕妇30例(ICP 组),根据妊娠期是否接受过地塞米松治疗又将 ICP 组分为治疗组(15例)和非治疗组(10例,因未治病例少);正常晚孕妇女30例为对照(根据检测指标不同分为对照1组,15例;对照2组,30例)。采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(sP)法,检测 HLA-G 蛋白在对照1组、治疗组及非治疗组孕妇胎盘组织中的表达情况(以平均吸光度值表示);同时采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法,检测 HLA-G 基因外显子8上14 bp 缺失多态性在 ICP 组及对照2组孕妇外周血及新生儿脐血中的分布。结果 (1)非治疗组胎盘组织中,HLA-G 蛋白的平均吸光度值为56±8,明显低于对照1组的70±10及治疗组的66±9,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组与对照1组胎盘组织中 HLA-G 蛋白的平均吸光度值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)HLA-G 基因外显子8上14 bp 缺失多态性检测结果显示,对照2组及 ICP 组母儿的等位基因频率及基因型频率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 ICP 患者胎盘组织中 HLA-G 蛋白表达下调可能是 ICP 发病机制之一;地塞米松对胎盘组织中 HLA-G 蛋白的表达具有上调作用;HLA-G 基因外显子8上14 bp 缺失多态性可能与 ICP 的发病无关。

子痫前期孕产妇胎盘组织中过氧化氢对人类白细胞相关抗原G表达的影响

目的探讨子痫前期孕产妇胎盘组织中氧化应激产物过氧化氢（H202）对胎盘滋养细胞中的人类白细胞相关抗原G（HLA-G）表达的影响。方法选择2008年10月一2009年10月南京医科大学第一附属医院住院的产妇40例，其中子痫前期组20例，健康妊娠组20例。采用比色法检测两组产妇胎盘组织中H2O2水平；采用蛋白印迹法检测两组产妇胎盘组织中HLA-G蛋白的表达水平；并对胎盘组织中H2O2水平与HLA-G蛋白表达水平进行相关性分析。人绒毛膜癌细胞株JEG-3细胞培养24h后贴壁完全，分为两组，干预组加入浓度为175μmol／L的H2O2，对照组不加H2O2，两组细胞培养24及48h后，采用蛋白印迹法和细胞免疫荧光法检测JEG-3细胞中HLA—G蛋白表达水平和强度的变化。结果（1）子痫前期组产妇胎盘组织中H2O2水平为（105±13）nmol·mg^-1·prot^-1，健康妊娠组产妇胎盘组织中H2O2水平为（62±18）nmol·mg^-1·prot^-1，子痫前期组较健康妊娠组明显升高，且差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）子痫前期组产妇胎盘组织中HLA—G蛋白表达水平为0．20±0．08，健康妊娠组为1．67±0．65，子痫前期组比健康妊娠组下降了88％，两组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。（3）两组产妇胎盘组织中H2O2水平与HIJA-G蛋白表达水平呈显著负相关（r=一0．895，P=0．000）。（4）H2O2干预JEG一3细胞24h后，JEG一3细胞中HLA—G蛋白表达水平为1．95±0．25，干预48h后为0．65±0．08；与未干预细胞中的3．21±0．33比较，分别下降了39％和80％，干预24、48h分别与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；干预48h与干预24h比较，HLA—G蛋白表达水平下降了67％，两者比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。H：O：干预JEG一3细胞48h后荧光显微镜下显示，干预组细胞中HLA—G表达强度明显弱于对照组。结论子痫前期产妇胎盘滋养细胞中的高水平H2O2能下调胎盘滋养细胞中HLA—G蛋白的表达，从而参与子痫前期的发病。

人白细胞抗原-G mRNA各亚型在重度子痫前期胎盘组织中的表达

目的探讨人白细胞抗原-G（human leukocyte antigen—G，HLA-G）各亚型在早发型、晚发型重度子痫前期患者以及正常妊娠产妇胎盘组织中表达的差异。方法使用巢式RT—PCR方法检测11例早发型重度子痫前期患者、14例晚发型重度子痫前期患者以及8例正常分娩产妇胎盘组织中HLA—G各亚型mRNA表达的差异情况。结果与正常对照组相比，HLA—G1亚型在早发型和晚发型重度子痫前期患者的胎盘组织中表达明显减少（中位数：早发型组1．37，P〈0．05；晚发型组24．90，P〈0．05；正常对照组46．67，P〈0．05）。HLA—G2亚型在晚发型重度子痫前期患者的胎盘组织中表达水平较高（中位数：早发型组0；晚发型组21．59，P〈0．05；正常对照组5．39）。HLA—G5亚型在早发型以及晚发型重度子痫前期患者的胎盘组织中表达水平增高（中位数：早发型组19．23；晚发型组3．65；正常对照组1．33）。结论HLA—G膜结合型亚型mRNA在胎盘组织中表达减少以及HLA—G可溶性亚型mRNA在胎盘组织中表达的增高，可能在子痫前期的发病机制中起到一定的作用。

人类白细胞抗原G的表达与子痫前期发病的关系

目的通过检测子痫前期孕妇相关组织中人类白细胞抗原G（HLA—G）的表达，探讨其与子痫前期发病的关系。方法选择2009年3月至12月在陕西省妇幼保健院产科住院分娩的子痫前期孕妇30例，根据病情分为轻度子痫前期组8例，重度子痫前期组22例。选择同期健康孕妇30例为对照组。3组孕妇均以剖宫产方式分娩。采用ELISA法检测孕妇外周血、脐血及羊水中的可溶性HLA—G（sHLA—G）水平；采用蛋白印迹法检测胎盘、胎膜及脐带组织中HLA—G蛋白的表达。结果（1）各组孕妇外周血、脐血、羊水中sHLA—G水平：轻、重度子痫前期组孕妇外周血sHLA—G水平分别为（50±14）、（30±6）μg/L，新生儿脐血中sHLA—G水平分别为（34±10）、（26±8）μg/L，均明显低于对照组的（100±16）、（70±9）μg／L，分别与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；重度子痫前期组与轻度子痫前期组比较，差异也有统计学意义（P〈0．01）。重度子痫前期组新生儿脐血中sHLA—G水平虽低于轻度子痫前期组，但差异无统计学意义（P〉0．05）。轻、重度子痫前期组孕妇羊水中sHLA—G水平分别为（26±7）、（25±5）μg/L，均低于对照组的（27±6）μg／L，但分别与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；轻度子痫前期组与重度子痫前期组比较，差异也无统计学意义（P〉0．05）。（2）各组孕妇胎盘、胎膜及脐带组织中的HLA-G蛋白表达：对照组胎盘组织中HLA—G蛋白表达水平为1．59±0．36，胎膜组织中表达水平为0．42±0．09，胎盘组织中的HLA—G蛋白表达水平明显高于胎膜组织，两者比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；对照组脐带组织中HLA—G蛋白表达水平为0．24±0．17，分别与胎盘及胎膜组织中的HLA—G蛋白表达水平比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。轻度子痫前期组胎盘组织中HLA—G蛋白表达水平为0．78±0．21，重度子痫前期组为0．29±0．17，分别与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。轻、重度子痫前期组孕妇胎膜及脐带组织中均未检测出HLA—G蛋白的表达。结论与健康孕妇相比，HLA—G在子痫前期孕妇外周血、脐血及胎盘组织中呈明显低表达，HLA—G表达水平的异常可能与子痫前期的发病有关。