HLA—B^＊27基因亚型与强直性脊柱炎的相关性研究

目的比较强直性脊柱炎患者与中华骨髓库福建人群中HLA-B*27基因携带者HLA-B*27基因亚型的分布差异;探讨HLA-B*27基因亚型与强直性脊柱炎的相关性。方法中华骨髓库中HLA-B*27基因携带者(阳性对照组)采用PCR-SSO方法检出,强直性脊柱炎患者(AS组)HLA-B*27基因采用低分辨PCR-SSP方法检出;2组HLA-B*27基因亚型均采用高分辨PCR-SSP方法检测。结果阳性对照组130名HLA-B*27基因携带者中,共检出B*2703、B*2704、B*2705、B*2706、B*2707、B*2711、B*27207种基因亚型;在强直性脊柱炎患者中共检出B*2704、B*2705、B*2707、B*2711、B*27155种基因亚型。两组HLA-B*27基因亚型的频率的差异无显著性意义(P>0.05)。结论HLA-B*27基因健康携带者与强直性脊柱炎患者HLA-B*27基因亚型的总体分布未见显著性差异。

HLA—B^＊27高分辨等位基因在1606例疑似强直性脊柱炎患者中的表达

目的:探讨HLA-B*27高分辨等位基因分析对强直性脊柱炎(AS)诊断和鉴别诊断的临床应用价值。方法:采用PCR-SSP和PCR-SBT技术对2004年1月-2008年3月本院收治的广东地区1606例骨和关节疾病(OAP)患者(其中确诊AS患者1022例)进行了HLA-B*27低分辨和HLA-B*27高分辨的基因频率调查和分析。结果:OAP患者中B*27高分辨基因频率(70.50%,141/200)高于B*27低分辨基因频率(41.82%,588/1406)(P<0.001);1022例AS患者中高分辨的B*27基因频率(84.21%,121/133)也高于B*27低分辨基因频率(44.77%,398/889)(P<0.001)。HLA-B*27阳性患者表达出的HLA-B*27等位基因为B*2704占88.44%(459/519),B*2705占9.83%(51/519),B*2702占1.73%(9/519)。结论:高分辨技术能够准确检测HLA-B*27阳性患者,AS患者在不同地区或人群所表现出的HLA-B*27易感基因不同;应用高分辨技术进行HLA-B*27等位基因分型,将有益于提高AS早期诊断和鉴别诊断,发挥对AS预后预测和治疗选择的临床应用价值。

南方汉族强直性脊柱炎患者及健康人群HLA-B27基因的分子多态性及分布

目的研究南方汉族强直性脊柱炎(AS)患者及健康人群HLA-B27亚型等位基因的多态性和分布特点。方法采用HLA测序分型方法,对收集到的46份B*27阳性的南方汉族AS患者血样以及随机选择的80份经rS-SOHLA流式磁珠低分辨检测为B*27阳性的造血干细胞南方汉族捐献者血样,做HLA-B基因的第2—4外显子测序分型,测序反应产物用ABI PrismTM3730测序仪检测,Assign3.5分析软件分析结果。对检出的模棱两可结果及"罕见型"等位基因,辅以PCR-SSP法HLA-B27高分辨基因分型。结果46名南方汉族AS患者中,共检出4个HLA-B*27相关的等位基因:B*2704的检出比例最高,为82.98%(39/47);其次是B*2705,为12.77%(6/47);B*2707和B*2724各为2.13%(1/47)。80名南方汉族造血干细胞捐献者中,共检出7种B*27相关等位基因:以B*2704的检出比例最高,为57.32%(47/82);其次为是B*2705,为26.83%(22/82);B*2706和B*2707各为6.10%(5/82);B*2703、B*2715和B*2724各为1.22%(1/82)。结论南方汉族AS患者HLA-B*27基因中以B*2704最为常见,健康人群以B*2704和B*2705等位基因为主要亚型。

河南汉族HLA-B_(27)阳性者HLA-A、B、DRB1基因分布频率调查

目的:了解河南汉族正常人群HLA-B27阳性者HLA-A、B、DRB1等位基因分布频率。方法:从河南地区汉族正常献血者中随机选择11441例标本进行HLA-B27初检,对初检阳性者采用PCR-SSP技术进行基因分型检测,对HLA-A、B、DRB1基因频率分布进行分析。结果:11441例河南汉族正常人群中HLA-B27阳性500例(4.37%)。HLA-B27阳性者HLA-A基因座位共检出等位基因14个,以A2(0.1950)、A3(0.1530)、A11(0.1670)和A24(0.1330)最为常见;HLA-B基因座位共检出等位基因34个,以B13(0.0700)、B15/62(0.0360)、B35(0.0340)、B40/60(0.0300)、B40/61(0.0310)、B46(0.0310)和B51(0.0420)最为常见;HLA-DRB1基因座位共检出等位基因13个,以DR4(0.2100)、DR7(0.0930)、DR9(0.0970)、DR11(0.0880)、DR12(0.0930)和DR15(0.1410)最为常见。结论:河南汉族正常人群中HLA-B27阳性者HLA-A、B、DRB1位点基因频率分布接近北方汉族人群,但A3和DR4基因频率较高。

HLA—B＊27基因亚型与强直性脊柱炎临床特征的相关性

目的比较不同HLA-B*27亚型的强直性脊柱炎患者的临床症状、实验室和影像学检查结果,分析其与基因亚型的相关性。方法应用PCR-SSP方法检测HLA-B*27抗原阳性的强直性脊柱炎患者(ankylosing spondylitis,AS)70例,应用Olerup高分辨PCR-SSP试剂检测HLA-B*27的基因亚型,并分析亚型与临床特征的相关性。结果70例样本共检出B*270447例(67.1%)、B*270520例(28.6%)两种基因亚型,另有3例因为等位基因同质性而无法判定型别。HLA-B*2704与B*2705亚型患者的临床表现、实验室参数之间的差异无统计学意义。结论本地区AS患者HLA-B*27亚型以B*2704和B*2705为主,且B*2704最多见;HLA-B*27各亚型与临床特征的相关性无统计学意义。

南通地区HLA—B27基因亚型分布及其与AS相关性分析

目的通过检测南通地区强直性脊柱炎（AS）患者HLA—B27基因的亚型，来了解各亚型的分布及其与AS的相关性。方法用流式细胞术检测HLA—B27抗原，其基因亚型检测采用序列特异性引物聚合酶链式反应（PCR-SSR）技术。结果AS患者中HLA．B27阳性者占92．3％（48／52），正常人群中HLA—B27阳性为8．3％（30／360）。AS患者中发现四种亚型，分别是B2705占47．9％（23／48），B2704占43．8％（21／48），B2702占6．3％（3／48）和B2707占2．1％（1／48），正常人群中发现三种亚型，分别是B2705占50．0％（15／30），B2704占43．3％（13／30）和B2702占6．7％（2／30）。结论南通地区人群AS患者与HLA-27基因高度相关，其亚型有B2702，B2704，B2705和B2707，以B2705和B2704亚型为主，但各亚型分布在正常人群和AS患者中并没有明显差异。

HLA-B_(27)基因检测对强直性脊柱炎诊断的评价

目的评价聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法检测HLA-B27基因对强直性脊柱炎(AS)的临床诊断价值。方法对87例临床疑似AS患者按MNY标准诊断分为病例组(AS组)和对照组(非AS组),并以PCR-SSP法检测患者血样HLA-B27基因,盲法比较二者结果。结果病例组和对照组HLA-B27阳性率分别为92.86%和11.11%,差异有统计学意义(P<0.05)。HLA-B27基因检测对AS诊断的敏感度(Sen)为92.8%、特异度(Spe)为88.9%、准确度(Acc)为90.8%、阳性预测值(+PV)为88.6%、阴性预测值(-PV)为93.0%、阳性似然比(+LR)为8.4、阴性似然比(-LR)为0.08,比值比(OR)为104.0。结论该法检测HLA-B27基因对AS诊断有较高敏感度和特异度,是一种准确、有效的实验诊断方法。

强直性脊柱炎与HLA-B27基因亚型动态定量表达的相关性研究

目的:探讨不同HLA-B27基因亚型与强直性脊柱炎的相关性及其动态表达量与强直性脊柱炎疾病活动指数(BASDAI)的关系。方法:收集骨科门诊强直性脊柱炎患者应用流式细胞术定性检测HLA-B27阳性100例,HLA-B27阳性健康对照组30例,通过PCR-SSP(序列引物扩增法)技术检测HLA-B27基因亚型;荧光实时定量RT-PCR技术检测HLA-B27阳性AS患者及HLA-B27阳性健康对照组HLA-B27亚型的mRNA,统计分析两组HLA-B27mRNA表达量及HLA-B27阳性患者HLA-B27mRNA表达水平与强直性脊柱炎患者疾病活动指数的相关性。结果:100例AS患者检出HLA-B2704亚型55例,HLA-B2705亚型45例,30对照组检出HLA-B2704亚型13例,HLA-B2705亚型12例,HLA-B2706亚型3例,HLA-B2709亚型2例;HLA-B27阳性患者HLA-B27mRNA表达水平最低值为1.16,最高值为37.01,均值7.77,HLA-B27阳性健康对照组表达水平最低1.05,最高值2.10,均值为1.51,两组差异有统计学意义(P=0.002);HLAB27阳性患者HLA-B27mRNA表达水平与强直性脊柱炎患者疾病活动指数密切相关(R=0.707)。结论:本地区AS患者HLA-B27基因亚型以B2704和B2705为主,B2706及B2709可能为保护亚型;HLA-B27阳性患者HLA-B27mRNA表达水平高于HLA-B27阳性健康者;HLAB27阳性患者HLA-B27mRNA表达水平与强直性脊柱炎患者疾病活动指数呈正相关。

HLA-B*2704重链胞外功能区基因片段的克隆表达及其生物学功能的初步鉴定

目的:克隆及可溶性表达HLA-B*2704重链胞外功能区,并对其生物学功能进行初步鉴定。方法:以HLA-B位点全长cDNA为模板,用PCR-SSP方法扩增HLA-B*2704重链胞外区cDNA,经测序鉴定后与pET32a可溶性原核表达载体构建其重组原核表达系统,并在大肠杆菌BL21中表达,采用Western印迹及微量淋巴细胞毒阻断实验初步鉴定该蛋白的特异性及其生物学特性。结果:扩增出HLA-B*2704重链胞外功能区cDNA片段,构建的HLA-B*2704 cDNA-pET32a可溶性原核表达载体可在大肠杆菌BL21表达系统中得到较好表达,表达量约占菌体总蛋白的40%;通过Western印迹鉴定了表达蛋白的特异性;通过微量淋巴细胞毒阻断实验发现该重组蛋白具有生物活性并可特异性阻断HLA-B27阳性细胞的微量淋巴细胞毒反应。结论:在大肠杆菌中表达了具有生物学活性的HLA-B*2704重链胞外功能区,为强直性脊柱炎的机理研究及特异性阻断药物的筛选提供了实验基础和新的靶标。

幼年型与成年型强直性脊柱炎HLA*B等位基因高分辨分型研究

目的 通过对幼年型强直性脊柱炎(JAS)和成年型强直性脊柱炎(AAS)患者HLA*B等位基因进行高分辨测序分型,了解HLA-B基因多态性与JAS是否有相关性。方法 收集2019年8月—2021年12月就诊于本院的符合JAS和AAS患者各50例,采用PCR-SBT法对HLA*B位点特异性扩增,再使用ABI 3100毛细管测序仪对外显子1正向测序,外显子2、3、4、5同时进行正反向测序,采用uTYPETMHLA测序分析软件处理测序结果。结果 JAS组中男41例,女9例,AAS组中男43例,女7例,两组男女性别比例差异无统计学意义(P=0.585);JAS组发病年龄(12.5±2.9)岁,显著低于AAS组的(29.7±6.8)岁(P<0.001)。JAS组检出HLA-B*27纯合子5例占10.0%,AAS组检出HLA-B*27纯合子4例占8.0%,JAS组中45例杂合子中B*27:04、B*27:05、B*27:15、B*27:86分别为34例、6例、3例、2例,AAS组46例杂合子中B*27:04、B*27:02分别为45例、1例;HLA-B*27阳性的JAS和AAS各检出15例HLA-B*40,高分辨分型中以B*40:01:02为主要亚型。结论 HLA-B*27纯合子与等位基因HLA-B*40对JAS的早发病并无直接相关性。HLA-B*27:04是JAS和AAS主要基因亚型,HLA-B*27:05:02:01、HLA-B*27:15,在JAS中多于AAS组,携带该等位基因的患者倾向于早发。

中国汉族人群HLA-B^＊40组的多态性研究

为了研究中国汉族人群HLA-B*40等位基因的分布特点,探讨其可能对临床供者选择的影响,从中华骨 髓库深圳分库中随机抽取381名志愿供者,用PCR-SSO方法进行HLA-B基因分型;另从已分型的1 270例供者中 选出低分辨率结果为B*40纯合子的样本。所有B*40阳性标本采用PCR-SBT及PCR-SSP方法进行高分辨率分 型。结果表明:随机抽取的381例样本通过Hardy-Weinberg平衡检验,HLA-B*40的基因频率为0.1692。在实验 中仅检测到B*4001,B*4002,B*4003,B*4006,其血清学特异性分属B60,B61。各等位基因相对频率B*4001为 0.1192.B*4002为0.0154,B*4003为0.0038,B*4006为0.0308。B*40纯合子在高分辨水平上检测,其等位基因 表现出一定的规律性,低分辨结果为B*40XX(B*4001组),-,高分辨都是B*4001;低分辨为B*40XX(B*4002 组),一,高分辨则为B*4002或B*4006或二者杂合子。结论:中国汉族人群B*40基因家族中B*4001占绝对优 势。为了选择最适供者,建议临床配型中使用高分辨率基因分型。

别嘌呤醇引起皮肤不良反应与HLAB5801基因相关性研究

目的探讨别嘌呤醇引起的皮肤不良反应与HLA-B*5801基因基因的相关性。方法通过收集本院服用别嘌呤醇患者及因服用别嘌呤醇引起不同程度皮肤不良反应的的病例,检测其HLA-B*5801基因的携带情况,分析别嘌呤醇引起的皮肤不良反应与HLA-B*5801基因的相关性。结果服用别嘌呤醇患者的HLA-B*5801基因携带率为11.9%,发生严重皮肤不良反应患者的该基因携带率高达50%(χ2=20.51,P<0.05),出现Stevens-Johnson综合征(SJS)和中毒性表皮坏死松解(TEN)的患者100%携带有HLA-B*5801基因。结论别嘌呤醇引起的严重皮肤不良反应与HLA-B*5801基因有密切相关,建议首次服用别嘌呤醇患者检测HLA-B*5801基因。

HLA-B27亚型与强直性脊柱炎相关性分析

目的了解苏州地区汉族人群的正常人和强直性脊柱炎(AS)患者的HLA-B27亚型基因分布的特点,分析HLA-B27亚型与AS的相关性。方法对正常人HLA-B27基因阳性组(简称正常组)50人、AS患者HLA-B27基因阳性组(简称AS组)160例采用特异性引物聚合酶链反应技术(PCR-SSP)进行了HLA-B27亚型基因检测。结果在正常组和AS组中,共检测出7种亚型,AS组和正常组都以HLA-B*2704亚型和HLA-B*2705亚型为主,两亚型合占分别为96.2%和92%。HLA-B*2704亚型阳性率AS组明显高于正常组,HLA-B*2705亚型阳性率正常组明显高于AS组(均P<0.01)。HLA-B*2707亚型和HLA-B*2711亚型在两组都检测到,但无显著性差异(P>0.05)。HLA-B*2702亚型只在AS组测到1例,而HLA-B*2706亚型和HLA-B*2703亚型只在正常组分别测到1例。结论HLA-B*2704和HLA-B*2705是苏州地区汉族人群AS的易感基因,而HLA-B*2704与AS呈强相关。

HLA—B27亚型与强直性脊柱炎相关性分析

强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）与HLA—B27密切相关，而HLA—B27并不是单一性抗原，它是由多种亚型构成的一组抗原的总称，各亚型核苷酸序列存在着个别位点上的差异，在不同地区、不同种族的人群HLA—B27亚型基因分布频率不相同。本文为了解苏州地区汉族人群的正常健康人和AS患者的HLA—B27亚型基因分布的特点，

益赛普对携带HLA-B27基因的未分化脊柱关节病患者的疗效

目的评价肿瘤坏死因子抑制剂益赛普治疗携带HLA-B27基因的未分化脊柱关节病(u SPA)患者的临床疗效和安全性。方法将56例HLA-B27阳性u Sp A患者分成两组,试验组36例应用生物制剂益赛普25mg/次,每周2次皮下注射,联合传统治疗方案慢作用改善病情药物+非甾类抗炎药(甲氨蝶呤10mg/周+美洛昔康7.5mg/d)治疗;对照组20例使用传统治疗方案,同等剂量甲氨蝶呤+美洛昔康治疗,疗程12周,记录各组治疗前后患者的症状、体征、疾病功能指数(BASFAI)、红细胞沉降率(ESR)及C-反应蛋白(CRP)等实验室指标及不良反应。结果试验组使用益赛普治疗1周,12周后患者的脊柱痛与夜间痛程度均明显改善,BASFAI、血沉、CRP均显著下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。试验组治疗12周后达到疗效20%、50%、70%改善的患者分别为34例(94.4%)、32例(88.9%)、29例(80.6%),均优于对照组(P<0.05)。不良反应主要为注射部位反应。结论益赛普治疗HLA-B27阳性u Sp A患者临床效果显著,安全性和耐受性好。