免疫性血小板输注无效患者HLA/HPA抗体特性分析及其对血小板输注效果的影响

目的 探讨免疫性血小板输注无效(PTR)患者HLA/HPA抗体特异性分布特征及其对血小板输注效果的影响。方法 本研究以86例免疫性PTR患者为研究对象,收集其性别、年龄、身高、体重、配血次数、疾病类型、输注前后血小板计数等临床资料,通过微珠法进行HLA特异性抗体的检测,并分析抗体特性对血小板输注效果的影响。结果 86例PTR患者中,单独HLA抗体、单独HPA抗体、HLA+HPA抗体阳性的患者分别为72例(83.72%)、8例(9.30%)、6例(6.98%)。HLA抗体在各位点中检出频率最高的抗体对应等位基因分别为A*25:01、B*15:12、C*02:02(和C*17:01),检出率分别为81.48%、87.04%、48.15%;而对应抗原表位出现频率最高的前三位为163LG、97V、71ATD,检出率分别为87.04%、77.78%、74.07%。仅存在HLA抗体的患者,输注交叉配型相合血小板的24 h血小板计数纠正增加指数(CCI)及输注有效情况均明显优于随机血小板(P<0.01)。在血小板交叉配型阴性结果的患者中,HLA抗体强度与交叉配型相合血小板的24 h CCI值及输注有效情况呈负相关关系,强度越高,输注效果越差(P<0.01)。HLA抗体强度为中、低等水平的患者,输注交叉配型相合血小板的24 h CCI值及输注有效情况均优于输注随机血小板(P<0.05)。结论 本研究所得到的PTR患者HLA/HPA抗体特性及其对血小板输注效果影响的结果,可为血小板库建立时供者的选择提供指导,同时对临床PTR患者的治疗方式选择有一定的参考价值。

烧伤患者HLA和HPA抗体检测以及阳性率高的因素调查

目的目的探究烧伤患者HLA和HPA抗体检测以及阳性率高的因素调查情况。方法方法收集2021年1月1日~2023年6月31日期间在我院接受住院治疗的烧伤患者287例。男210例、女77例,平均年龄(31.19±5.42)岁。均接受HLA和HPA抗体检测,并收集患者临床相关资料,采用logistic回归方程分析两种抗体检测阳性率高的相关因素。结果287例经过HLA和HPA抗体检测:阴性275例(95.82%)、阳性或弱阳性12例(4.18%);年龄≥15岁、输血制品次数≥10次、血小板计数<10×109/L、HB<60g/L是HLA和HPA抗体检测阳性率高的因素(P<0.05)。结论结论烧伤患者HLA和HPA抗体检测阳性率偏高,与年龄、输血制品次数、血小板计数、HB因素有关,需在烧伤患者住院期间加大重视。

不明原因复发性流产淋巴细胞免疫治疗前后HLA抗体的变化和妊娠结局

目的研究不明原因复发性流产(RPL)患者和正常生育人群人类白细胞抗原(HLA)抗体的状态;检测淋巴细胞免疫治疗(LIT)后HLA抗体的转阳率;对比不明原因RPL患者淋巴细胞免疫治疗后HLA抗体与妊娠结局,评估HLA抗体是否可作为LIT预测妊娠结局的有效指标。方法选取2014年12月3日至2015年6月10日在北京大学第三医院生殖中心门诊就诊的不明原因RPL患者24例作为RPL组,同期于北京大学第三医院体检中心体检的健康未孕女性30例作为对照组,两组年龄均在20~40岁。应用酶联免疫吸附法和流式细胞仪-微珠法,分别测定不明原因RPL患者LIT前后和健康生育者外周血的HLA特异性IgG抗体,根据HLA抗体状态分为4类,包括HLA-I类阳性、HLA-II类阳性、双阳性(HLA-Ⅰ类、Ⅱ类均阳性)和双阴性(HLA-Ⅰ类、Ⅱ类均阴性),比较两组人群HLA抗体状态,分析LIT后RPL患者HLA抗体的转阳率,及HLA抗体状态与妊娠结局的关系。结果RPL患者HLA抗体状态与健康生育者比较,差异无统计学意义;LIT促进HLA抗体转阳,LIT后不同HLA状态的活产率比较,差异无统计学意义。结论不明原因PRL患者,LIT前HLA特异性IgG抗体与正常生育者差异无统计学意义,LIT可以促进HLA抗体转阳,免疫治疗后PRL患者HLA特异性IgG抗体与妊娠结局无关,HLA特异性IgG抗体不能作为LIT预测妊娠结局的唯一参考指标,尚需要结合其他免疫指标综合分析。

免疫性血小板输注无效患者HLA和/或HPA抗体产生的影响因素分析

目的回顾性分析影响免疫性血小板输注无效(PTR)患者HLA和/或HPA抗体产生的独立危险因素。方法收集910例PTR患者的临床资料及其HLA和/或HPA抗体检测结果,分析性别、年龄、血型、所患疾病以及输血次数、PTR发生前的血象、凝血指标等对抗体产生的影响。结果女性及有妊娠史的患者更容易产生HLA和/或HPA抗体。抗体阳性患者的平均年龄明显高于阴性患者(51.46±18.49岁vs.40.68±20.08岁,P<0.001),其平均输血次数却明显低于阴性患者(13.13±18.64次vs.18.66±22.52次,P=0.024),抗体发生率与输血次数无相关性,抗体阳性患者检测前血小板计数值(13.13±18.64×10^(9)/L vs.18.66±22.52×10^(9)/L,P=0.021)和血红蛋白含量(72.41±18.64 g/L vs.78.61±21.66 g/L,P=0.009)也明显低于阴性患者。60岁以上、女性、患有MDS、输血次数、血小板计数值都是抗体产生的独立危险因素。结论了解HLA和/或HPA抗体产生的危险因素有助于临床医生在治疗过程中采取适当措施避免PTR的发生,改善血小板输注的疗效。

实体器官移植失败患者HLA和HPA抗体筛查及特异性分析

目的了解广州地区实体器官移植失败患者中HLA抗体和HPA抗体的分布和特异性,初步探索HLA抗体及HPA抗体与实体器官免疫性排斥反应的相关性。方法随机收集广州地区实体器官移植失败患者标本136例,利用Lifecodes Life Screen Deluxe(LMX)筛查标本的HLA抗体,阳性者再分别利用LIFECODES LSATMClassⅠ和LIFECODES LSATMClassⅡ(Single Antigen)鉴定抗体特异性;利用Lifecodes PAKR 2LE对HPA抗体进行筛查,阳性标本利用MAIPA进行最终确证。结果广州地区136例实体器官移植失败患者中,抗-HLA阳性率55.15%(75/136),其中HLA-Ⅰ类抗体出现频率为38.97%(53/136),HLA-Ⅱ类抗体出现频率为42.65%(58/136)。HLA-Ⅰ类抗体中出现频率较高的分别是抗-A~*02 35.85%(19/53)、抗-B~*15 47.17%(25/53)和抗-Cw~*07 28.30%(15/53),HLA-Ⅱ类抗体出现频率最高者是抗-DRB1~*04 39.66%(23/58)和抗-DQB1~*03 46.55%(27/58)。此外,检出HPA-5bb抗体一例。结论初步探讨了广州地区实体器官移植失败患者HLA抗体及HPA抗体的分布情况,证实HLA抗体与移植后的免疫排斥反应密切相关。

供者特异性HLA抗体及去敏治疗对单倍体造血干细胞移植植入效果的影响

目的 分析供者特异性HLA抗体(anti-HLA donor-specific antibodies, DSA)及DSA阳性患者的去敏治疗对单倍体造血干细胞移植(haploidentical hematopoietic stem cell transplantation, haplo-HSCT)植入效果的影响。方法 收集2017年3月至2023年7月重庆医科大学附属第二医院血液内科行haplo-HSCT,并完成HLA抗体及DSA检测的患者70例,分析DSA阳性和DSA阳性患者去敏治疗对造血干细胞移植植入效果的影响。结果 70例haplo-HSCT患者完成抗体检测,DSA阳性患者15例(21.4%),其中7例(46.7%)强阳性,3例(20.0%)中度阳性,5例(33.3%)弱阳性。DSA阳性患者移植后粒系植入中位时间较DSA阴性患者明显延迟(P=0.027)。植入失败(graft failure, GF)患者6例,DSA阳性4例(26.7%),明显高于DSA阴性(P=0.025)。多因素分析结果显示,DSA是发生GF的独立影响因素(HR=9.273, 95%CI=1.505~57.124,P=0.016)。10例DSA中度和强阳性患者进行去敏治疗,4例采用联合去敏治疗,患者均成功植入(100.0%),6例采用单一去敏治疗,有4例(66.7%)发生GF,联合去敏治疗的GF发生率显著低于单一去敏治疗(P=0.008)。结论 DSA是导致haplo-HSCT患者植入延迟和GF的重要因素,对DSA中度及强阳性患者的单一去敏治疗效果有限,而多联合的去敏治疗时,动态监测抗体滴度水平下降,可保证干细胞的成功植入,降低GF发生。

对同时含有HLA和HPA抗体的血小板输注无效患者的抗体特异性分析

目的对本中心6例同时存在HLA和HPA抗体的血小板输注无效患者进行抗体特异性分析。方法采用ELISA方法检测6名临床上确诊为PTR患者的HLA抗体及血小板特异性糖蛋白抗体,应用PCR-SSP方法对患者HLA及HPA1-17进行基因分型,并根据其HLA及HPA基因型进行抗体特异性分析。结果6名PTR患者的抗HLA-Ⅰ类抗体中,抗-A抗原以-A2、-A11(均占50%)为主;抗-B抗原以-B40(占66.7%)为主。5例PTR患者为血小板特异性糖蛋白GPⅡb/Ⅲa抗体表达阳性,占83.3%,其中抗HPA-3a占50%,抗HPA-3b占33.3%;1例GPⅠa/Ⅱa抗体表达阳性(为抗HPA-5b),占16.7%。

与母源性HLA抗体相关的新生儿同种免疫性血小板减少症——附病例报告

目的分析报道由母源性HLA抗体引起的新生儿同种免疫性血小板减少症。方法以4名临床上确诊为新生儿免疫性血小板减少症(NAIT)的患儿为研究对象,采用ELISA方法检测患儿及其母亲血浆中的血小板特异性抗体和血小板自身抗体;应用PCR-SSP的方法对患儿及其父母进行HPA/HLA基因分型;借助Luminex检测平台进行HLA抗体特异性检测分析。结果 4名患儿及其母亲均未检出血小板特异性抗体和自身抗体,然而存在与胎儿父源性HLA抗原相对应的HLA特异性抗体。结论对临床上怀疑发生NAIT的胎儿,实验室血小板抗体检测除考虑HPA抗体外,还应考虑HLA抗体的因素。

HLA抗体引起血小板输注无效的探讨

目的探讨HLA抗体引起血小板输注无效的原因,以及HLA抗体特异性。方法选择19例具有生育史或输血史或移植史的符合血小板输注无效的临床诊断患者。使用HLA基因分型试剂盒检测HLA-Ⅰ类抗原(HLA-A、HLA-B),使用Antigen Tray-LAT1240检测试剂盒对HLA抗体进行特异性分析。结果19例患者的HLA-A、B抗原HLA-A*02(0.275),HLA-A*11(0.275);HLA-B*13(0.111),HLA-B*46(0.173),HLA-B*60(0.142),基因频率表达高。其中2例PRA检测结果<20%,16例PRA检测结果在20%～80%之间,1例PRA检测结果>80%。分析HLA抗体的特异性,其中抗-A2(36.8%),抗-A11(26.3%),抗-A19(31.6%),抗-B13(26.3%),抗-B40(31.6%)的抗体表达较高。结论HLA抗体引起血小板输注无效,主要和HLA-Ⅰ类抗原频率密切相关,针对相应的特异性抗体,寻找相合HLA-Ⅰ类抗原的血小板可以提高输注效果。

血小板特异性糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)及HLA-Ⅰ类混合抗体引起血小板输注无效的检测

目的探讨血小板混合抗体引起的血小板输注无效(PTR)的检测方法。方法提取1名骨髓增生异常综合征PTR患者的DNA 200μL,通过PCR-SSP方法做血小板特异性抗原(HPA)和人类白细胞抗原(HLA)基因分型,以ELISA法检测患者血浆中的血小板特异性糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)和HLA抗体,用Luminex试剂盒检测HLA-Ⅰ类抗体特异性,以MAIPA法鉴定HPA抗体特异性。结果患者HPA基因型为1aa、2ab、3bb、4aa、5aa、6aa、9aa和15bb;HLA-Ⅰ类抗原为HLA-A*02、A*33,HLA-B*46、B*58;从患者血浆中检出GPⅡb/Ⅲa及HLA-Ⅰ类抗体。该患者的PTR是由GPⅡb/Ⅲa及HLA-Ⅰ类混合抗体引起。结论对于反复输血的患者,输注ABO、Rh(D)同型、HLA和HPA交叉配型相合的相容性血小板,可有效减少PTR的发生。

肾移植受者术前HLA特异性抗体筛查(附3500例报告)

目的:预致敏的人白细胞抗原特异性抗体(HLA)是抗体介导排斥反应的主要危险因素。本研究对肾移植受者术前进行HLA特异性抗体检测和分析,以评价其致敏状态。方法:1998年至2007年于我院等待肾移植的受者共3500名。2000年3月前694名受者采用补体依赖微量细胞毒性试验(CDC)进行群体反应性抗体(PRA)检测,之后2806名受者改为用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测。对致敏受者HLA抗体多样性和特异性,以及致敏相关因素进行分析。结果:CDC方法仅能检出抗HLAⅠ类IgG抗体,而ELISA可检出抗HLAⅠ类和Ⅱ类抗体。CDC方法所检出的病人血清PRA阳性率比ELISA方法检出的阳性率低。而且,ELISA能分别检出抗HLA-A、B、CW、DR和DQ抗原的抗体20种、37种、8种、14种和7种。抗HLA-A2、24、68、23、32;B27、56、57、7;DR7、4、9、13、17、12;CW1、2、6、4、8等位基因产物的抗体频率较高。这些抗HLA抗体与华南地区人群HLA抗原分布不尽一致。不同性别PRA阳性率存在显著性差异,男性以输血致敏为主,女性以输血、妊娠致敏为主。结论:采用ELISA方法能较为准确地检出抗HLA特异性抗体。避免供受者间常见高频抗体相应的HLA位点的错配和减少输血是减少抗HLA抗体的产生,以提高移植物存活的有效手段。

随机血小板输注无效患者的HLA抗体分析

目的 动态监测患者HLA抗体情况 ,了解HLA抗体在解决血小板无效输注中的临床意义及应用价值。方法 对各医院送检随机血小板无效输注患者在行交叉淋巴细胞毒实验配型血小板的同时 ,用ELISA法检测其HLA抗体及其强度。结果 在 90例随机血小板无效输注患者中 ,HLA抗体阳性率为 6 3% ;未成人组与成人组之间HLA抗体阳性率差异有显著性 ;动态观察 4例长期输注血小板患者 ,其HLA抗体强度随输注交叉淋巴细胞毒实验配型血小板数量的增加而逐渐减弱。结论 当患者出现血小板输注无效时 ,应首先检测其HLA抗体 ,如为幼儿应重点考虑使血小板破坏或消耗增加的非免疫因素 ;对长期输注血小板患者 ,应动态观察HLA抗体的变化。

广州地区无偿献血者HLA抗体筛查和特异性分析初探

目的对广州地区部分无偿献血者HLAⅠ、Ⅱ类抗体的分布及特异性进行调查和分析,为安全输血提供相应的实验数据。方法随机收集无偿献血者标本368份,应用Antigen Tray-LATM和LAT1240检测HLA抗体,PCR-SSP方法检测阳性标本HLAⅠ、Ⅱ类抗原,并根据相应的抗原对抗体特异性进行分析,并对男、女献血者HLA抗体分布的差异进行统计学分析。结果在368名献血者中,13名HLA抗体阳性(3.53%)。HLA抗体出现以女性献血者为主,达到10.78%,均有孕产史,而男性献血者HLA抗体的出现频率仅为0.75%(P<0.05)。13份阳性标本中HLAⅠ类抗体阳性8份,且女性献血者也明显高于男性(P<0.05)。群体反应性抗体(PRA)分析,PRA<20%占61.5%、PRA(20%～30%)占15.4%、PRA(30%～40%)占7.7%、PRA>40%占15.4%。抗体特异性分析,抗-A19(53.85%),抗-B40(30.77%),抗-DR4(30.77%),并且以复合性抗体为主。结论初步探讨了本地区无偿献血者中HLA抗体分布情况,女性献血者的HLA抗体出现频率明显高于男性献血者。本研究为HLA系统引起的输血免疫相关并发症预防措施的建立提供了初步的实验基础。

抗HLA-Ⅱ类抗体与HLA配型对移植肾长期存活的研究

目的研究肾移植术后抗HLA-Ⅱ类抗体阳性患者HLA配型与移植肾长期存活的关系。方法肾移植供受者HLA分型及群体反应性抗体检测均采用美国莱姆德公司提供试剂。血肌酐为判断肾功能的指标,检测数据由检验科提供。结果 2007年检测出的143例抗HLA-Ⅱ类抗体阳性患者中,HLA-A、B、DR抗原3个以下错配的患者54例,目前肾功能较差患者11例,36例患者肾功能正常。7例患者移植肾失功。HLA-A、B、DR抗原3个错配的患者(非半相合)14例,目前8例患者移植肾功能正常,1例患者肾功能较差,5例患者移植肾功能丧失。HLA-A、B、DR抗原4个错配的患者48例,目前27例患者移植肾功能正常,11例患者肾功能较差,10例患者移植肾功能丧失。HLA-A、B、DR抗原5～6个错配的患者27例。目前6例患者移植肾功能正常,8例患者肾功能较差,13例患者移植肾功能丧失。HLA-A、B、DR抗原3个错配以下与错配4个抗原以上的患者,5年后移植肾功能下降或丧失的比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抗HLA-Ⅱ类抗体是移植肾功能丧失的重要因素之一,但良好的供受者HLA配型可提高移植肾长期存活。

西安地区女性献血者HLA抗体筛查分析

目的对西安地区部分女性献血者的H L A抗体进行检测并分析,为提高输血的安全性提供实验数据。方法随机收集女性无偿献血者标本202份,采用ELISA技术对HLA-Ⅰ类、-Ⅱ类抗体进行检测;并对有无妊娠史的献血者HLA抗体产生的差异进行统计分析。结果 202例女性献血者中,37例HLA抗体阳性(18.3%)。有妊娠史女性献血者HLA抗体阳性率(30.9%)明显高于无妊娠史女性献血者(3.3%),且随着妊娠次数的增加,HLA抗体产生的机率升高。但是有无妊娠史与HLA抗体产生类型没有关联。结论女性无偿献血者HLA抗体阳性率较高,提示开展女性献血者HLA抗体筛查具有一定的临床意义。

HLA抗体对肝移植术后急性排斥发生的影响

目的探讨肝移植手术前后HLA抗体变化对移植肝脏急性排斥的影响。方法134例患者接受改良背驮式肝移植,分别于手术前、手术后第1、7、14、30日通过酶联免疫吸附(ELISA)法检测HLA抗体,通过B超引导下肝穿刺病理检查明确有无急性排斥,观察肝移植前后HLA抗体变化对急性排斥发生的影响。结果术前HLA抗体阳性组急性排斥发生率(56.8%)显著高于术前HLA抗体阴性组(25.9%)(P=0.001);术前HLA抗体阴性而术后转为阳性组急性排斥发生率与术前术后HLA抗体均为阴性组有显著差异(P=0.003)。结论患者术前HLA抗体阳性可能是引起肝移植术后急性排斥的原因之一,患者术后HLA抗体持续阳性与急性排斥的发生密切相关。

血小板输注无效与抗HLA抗体相关性

目的研究抗HLA抗体与血小板输注无效的关系。方法用流式细胞术检测患者抗HLA抗体,并通过检测输注血小板前后的血小板数量计算出血小板增加校正值(CCI)来分析抗HLA抗体与血小板输注无效的关系。结果25名患者中抗HLA抗体阳性16例,占64%;血小板输注无效16例中,抗HLA抗体阳性15例,阴性1例。抗HLA抗体阳性患者血小板输注无效率显著高于抗HLA抗体阴性患者。结论多次输血患者体内易产生抗血小板抗体,导致血小板输注无效,其中抗HLA抗体是引起血小板输注无效的重要原因之一。