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PCR-SBT技术在山东骨髓分库HLA高分辨分型工作中的初步应用 被引量:3
1
作者 庄云龙 朱传福 +5 位作者 朱永宝 毛永鑫 宋永红 张毅 聂向民 刘艳 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期329-331,共3页
目的将基于测序分型(SBT)技术应用于中华骨髓库山东分库建设的探讨。方法使用ABI 3730 xlDNA测序仪,采用SBT直接测序法,对山东地区的3 500份志愿者血液标本进行DNA测序,其中HLAⅠ类基因对第2、3和4外显子双向测序,Ⅱ类基因对第2外显子... 目的将基于测序分型(SBT)技术应用于中华骨髓库山东分库建设的探讨。方法使用ABI 3730 xlDNA测序仪,采用SBT直接测序法,对山东地区的3 500份志愿者血液标本进行DNA测序,其中HLAⅠ类基因对第2、3和4外显子双向测序,Ⅱ类基因对第2外显子双向测序,以得到其HLA高分辨分型结果;对部分呈现中分辨分型结果的标本,通过SSSP技术确认。结果 HLA-A、B、DRB1位点分别有48.23%、42.86%和76.91%得到高分辨结果。此3个位点均获得高分结果的比例为15.91%。在随机增选的760例中分辨标本中,659例(86.71%)经SSSP技术后,获得高分辨结果。结论 SBT技术是骨髓分库开展HLA高分辨分型工作的有力工具。 展开更多
关键词 SBT技术 hla高分辨分型 中华骨髓库
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河南省骨髓库汉族捐献者HLA-A、B、DR高分辨基因多态性调查分析 被引量:16
2
作者 王兆福 张伯伟 +2 位作者 马茹 杜娟 孔大为 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第31期5801-5804,共4页
背景:2009年开始,中华骨髓库加大HLA高分检测的力度,可缩短配型检索周期,提高配型成功率。目的:统计分析河南省骨髓捐献者HLA-A、B、DRB1高分辨基因多态性。方法:河南省汉族造血干细胞志愿捐献者血样3874人份,志愿捐献静脉血,EDTA抗凝... 背景:2009年开始,中华骨髓库加大HLA高分检测的力度,可缩短配型检索周期,提高配型成功率。目的:统计分析河南省骨髓捐献者HLA-A、B、DRB1高分辨基因多态性。方法:河南省汉族造血干细胞志愿捐献者血样3874人份,志愿捐献静脉血,EDTA抗凝。采用SSOHD荧光微珠流式高分辨HLA-A、B、DRB1基因分型检测方法,对3874份骨髓捐献志愿者血样进行高分辨分型检测,用PCR-SSP高分辨检测、SBT检测解决存在的模棱两可问题。等位基因计数法计算等位基因的基因频率。结果与结论:共检出A34个,B84个,DRB150个,A位点基因频率处于前5位的有A*0201(0.1609)、A*1101(0.1627)、A*2402(0.1602)、A*3001(0.0808)、A*3303(0.0789);B位点处于前5位的是B*1302(0.0777)、B*4001(0.0722)、B*5101(0.0628)、B*4601(0.0612)和B*0702(0.0507);DRB1位点处于前5位的是DRB1*1501(0.1469)、DRB1*0901(0.1318)、DRB1*0701(0.1211)、DRB1*1202(0.0612)、DRB1*0405(0.0582)。 展开更多
关键词 中华骨髓库 hla高分辨 基因频率 多态性 河南省
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供、患者HLA-A、B、DRB1高分辨分型的无关供者外周血造血干细胞移植32例回顾分析
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作者 高素青 邹红岩 +3 位作者 喻琼 曾健强 程曦 吴国光 《现代检验医学杂志》 CAS 2005年第3期1-3,共3页
目的探讨供、患者的人类白细胞抗原HLA-A、B、DRB1基因高分辨相合及亚型相合,无关供者外周血造血干细胞移植后效果的情况,为临床造血干细胞移植治疗选择适配供者提供理论依据。方法采用PCR-SSP或SBT技术对供、患者HLA-A、B、DRB1的基因... 目的探讨供、患者的人类白细胞抗原HLA-A、B、DRB1基因高分辨相合及亚型相合,无关供者外周血造血干细胞移植后效果的情况,为临床造血干细胞移植治疗选择适配供者提供理论依据。方法采用PCR-SSP或SBT技术对供、患者HLA-A、B、DRB1的基因进行高分辨分型,定期随访患者在造血干细胞移植后状况,统计分析移植后效果。结果32例患者与供者的HLA低分辨分型结果完全相合,HLA-A、B、DRB1基因高分辨分型全相合的患者与HLA-A、B、DRB1基因高分辨分型不相合的患者,造血干细胞植活和两年半内的移植存活率比较,无统计学差异。结论HLA低分辨分型结果完全相合是临床医生选择造血干细胞移植的重要条件之一,供、患者HLA-A、B、DRB1高分辨分型是外周血造血干细胞移植治疗前组织配型不可少的实验之一,但HLA-A、B、DRB1基因高分辨分型错配对无关供者外周血造血干细胞移植的造血干细胞植活和两年半内的移植存活率影响较小,HLA基因高分辨分型可以帮助临床医生选择合适的供者。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原(hla) 造血干细胞移植 hla基因分辨分型
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利用唾液标本进行HLA分型的可行性分析 被引量:3
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作者 张建伟 戎志全 +2 位作者 乔文本 张毅 朱传福 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第11期70-72,共3页
目的探讨利用唾液样本提取DNA进行HLA高分辨分型的可行性。方法采集6例造血干细胞移植患者和10例供者唾液样本各2 m L,EDTA抗凝静脉全血3 m L。采用Qiagen全血基因组提取试剂盒和Oragene唾液DNA提取试剂盒分别于全血和唾液样本中提取DNA... 目的探讨利用唾液样本提取DNA进行HLA高分辨分型的可行性。方法采集6例造血干细胞移植患者和10例供者唾液样本各2 m L,EDTA抗凝静脉全血3 m L。采用Qiagen全血基因组提取试剂盒和Oragene唾液DNA提取试剂盒分别于全血和唾液样本中提取DNA,琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量。采用PCR-SSOP和PCRSBT方法对血液提取DNA和唾液提取DNA进行HLA高分辨分型,并对分型结果进行比较。结果唾液提取DNA浓度69.75±44.96,A260/A280比值为1.77±0.07;血液提取DNA浓度63.06±33.99,A260/A280比值为1.75±0.04。唾液来源DNA PCR-SSOP结果明确,DNA PCR-SBT高分辨分型中无杂峰和碱基错配。16例样本唾液来源DNA的HLA高分辨分型结果和血液来源DNA的结果完全一致,符合率为100%。结论唾液提取的DNA可用于HLA高分辨分型。 展开更多
关键词 唾液 脱氧核糖核苷酸 hla高分辨分型
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2504例汉族人群HLA-A、B、C、DRB1和DQB1高分辨等位基因多态性研究 被引量:5
5
作者 苏湘晖 《实用预防医学》 CAS 2016年第12期1455-1461,共7页
目的分析2 504例汉族人群HLA-A、B、C、DRB1和DQB1高分辨等位基因多态性及分布特征。方法采用基于Illumina Miseq二代测序技术,对岳阳地区2 504例汉族造血干细胞捐献志愿者的HLA-A、B、C、DRB1和DQB1基因进行高分辨分型,采用Py Pop软件... 目的分析2 504例汉族人群HLA-A、B、C、DRB1和DQB1高分辨等位基因多态性及分布特征。方法采用基于Illumina Miseq二代测序技术,对岳阳地区2 504例汉族造血干细胞捐献志愿者的HLA-A、B、C、DRB1和DQB1基因进行高分辨分型,采用Py Pop软件计算等位基因频率、单体型频率核对连锁不平衡参数。结果 HLA-Ⅰ类基因中,A、B和C基因座分别检出55、117和67个等位基因,其中频率>0.05常见等位基因为A*11:01:01:01、A*24:02:01:01、A*02:07:01、A*02:01:01:01、A*33:03:01,B*40:01:02、B*58:01:01、B*15:02:01、B*13:01:01、B*46:01:01、C*03:03:01、C*03:02:02:01、C*08:01:01、C*03:04:01:02、C*07:02:01:01、C*01:02:01;HLA-Ⅱ类基因中,共检出50个DRB1和26个DQB1等位基因,频率>0.05常见等位基因见于DRB1*11:01:01、DRB1*08:03:02、DRB1*12:02:01、DRB1*15:01、DRB1*09:01:02,DQB1*03:01:01、DQB1*03:02:01、DQB1*03:03:02、DQB1*05:02:01、DQB1*06:01:01。HLA-A、B、C、DRB1和DQB1位点基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。任意2个HLA基因间均具有强的连锁不平衡,其中频率≥0.01有统计学意义的单体型有196条。结论获得了岳阳地区汉族人群HLA-A、B、C、DRB1和DQB1高分辨等位基因频率数据,为人类学、移植配型、疾病相关性等研究提供了参考数据。 展开更多
关键词 hla抗原 hla高分辨等位基因 基因频率 多态性
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脐血移植治疗WAS的疗效观察 被引量:4
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作者 卞馨妮 李乐 +5 位作者 卢俊 肖佩芳 姚艳华 孔令军 吴德沛 胡绍燕 《临床血液学杂志》 CAS 2016年第3期381-384,共4页
目的:分析湿疹血小板减少伴免疫缺陷综合征(WAS)患儿脐血移植后的疗效和影响因素,为供体选择和受体移植的时机提供经验。方法:5例WAS患儿接受非血缘脐血干细胞移植,分析移植前营养状态、移植时年龄、HLA相合度、移植后移植物抗宿主病(GV... 目的:分析湿疹血小板减少伴免疫缺陷综合征(WAS)患儿脐血移植后的疗效和影响因素,为供体选择和受体移植的时机提供经验。方法:5例WAS患儿接受非血缘脐血干细胞移植,分析移植前营养状态、移植时年龄、HLA相合度、移植后移植物抗宿主病(GVHD)及感染因素对移植效果的影响,随访时间截止到2016年1月。结果:5例WAS患儿成功植入。粒细胞植入时间分别为15d、12d、11d、14d、15d,血小板植入时间分别为39d、16d、16d、34d、36d,HLA高分辨检测显示供受体相合度分别为8/10、10/10、5/10、10/10、10/10;其中3例患儿移植前有巨细胞病毒血症,移植后血小板植入缓慢,1例中度营养不良的患儿移植后有皮肤及肠道重度GVHD和反复重症感染。结论:移植前患儿巨细胞病毒血症和移植前营养状态是影响血小板植入和预后的主要因素,HLA高分辨位点相合程度对粒细胞和血小板植入及GVHD没有显著影响。 展开更多
关键词 湿疹血小板减少伴免疫缺陷综合征 无关脐带血移植 粒细胞植入 血小板植入 hla高分辨位点 营养状态
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