肿瘤患者血小板输注疗效影响因素及HLA-Ⅰ类抗体特异性分析

目的分析肿瘤患者血小板输注疗效影响因素及HLA-Ⅰ类抗体特异性。方法对四川省肿瘤医院2019年11月至2021年7月期间申请血小板输注的142名肿瘤患者筛查血小板抗体、判定输注疗效并分析其影响因素,对抗体阳性者检测并鉴定HLA-Ⅰ类抗体。结果肿瘤患者血小板抗体阳性率、HLA-Ⅰ类抗体阳性率及输注无效率为35.2%(50/142)、32.4%(46/142)及16.9%(24/142)。血小板抗体阳性者输注无效率为30.0%(15/50),高于血小板抗体阴性者[9.8%(9/92)](χ^(2)=9.428,P<0.05)。多因素Logistics结果显示性别(χ^(2)=12.608,P<0.001,OR=3.800,95%CI:1.819~7.940)为血小板抗体产生独立危险因素,血小板抗体(χ^(2)=8.648,P<0.05,OR=3.952,95%CI:1.581~9.878)为输注疗效独立危险因素。强阳性、阳性及弱阳性HLA-Ⅰ类抗体检出率为69.6%(32/46)、80.4%(37/46)及97.8%(45/46),检出率最高的抗体为抗-B*15∶12、抗-B*57∶03、抗-B*57∶01、抗-B*13∶02、抗-B*49∶01、抗-B*50∶01、抗-A*25∶01、抗-B*15∶01、抗-B*15∶02、抗-B*44∶02。MFI均值≥10000的HLA-Ⅰ类抗体共19种,包含抗-A*02∶01、抗-A*02∶03、抗-A*02∶06等。Wilcoxon检验示HLA-Ⅰ类抗体阳性者(n=46)CCI值低于HLA-Ⅰ类抗体阴性者(n=96)(P<0.05)。结论输注血小板的肿瘤患者中,女性为血小板抗体产生危险因素,血小板抗体阳性者容易发生输注无效,HLA-Ⅰ类抗体是主要的血小板抗体,提示HLA-Ⅰ基因配合型血小板能够改善输注疗效。

非经典HLA-Ⅰ类分子对母胎免疫耐受的调节

携带父系抗原的胚胎作为植入母体子宫腔内的半同种异体移植物,却不被母体排斥,有赖于母胎间复杂的免疫耐受。一旦母胎免疫耐受不足或缺失就可能导致反复妊娠丢失等病理性妊娠的发生。在正常妊娠过程中,胎儿绒毛外滋养细胞可特异性高表达非经典HLA-I类分子HLA-E、HLA-F、HLA-G,对母胎界面免疫耐受的维持及调节发挥着关键作用。

人肝癌细胞的HLA-Ⅰ类抗原表达

为了为肝癌细胞毒性 T细胞疫苗设计、构建及免疫治疗策略的决策提供体外实验研究依据 ,采用免疫细胞化学 L SAB法及流式细胞术观察了体外培养人肝癌细胞的 HL A- 类抗原表达情况。结果显示 ,人肝癌细胞株 Alexander、Hep G2、SMMC- 772 1、QGY- 770 3都有较强的 HL A- 类抗原表达 ,这使细胞毒性 T细胞杀伤肝癌细胞成为可能。

Eplets配型方法在HLA-Ⅰ类抗体所致血小板输注无效患者中的应用评价

目的了解Eplets配型方法在HLA-Ⅰ类抗体所致血小板输注无效（PTR）患者中的适用性。方法以PCR-SBT方法检测24名PTR患者及血小板供者的HLA基因型;利用Luminex技术平台、采用抗-HLA检测试剂（LSA）检测患者的HLA特异性抗体（DSA）;再借助HLA Matchmaker软件获得患者的预存HLA-Ⅰ类抗体对应的表位（Eplets）及DSA荧光指数中值（MFⅠ）;最后统计分析Eplets错配数对PTR的影响。结果对DSA不同MFⅠ阈值（1 000—3 000）的统计分析：DSA MFⅠ〈1 000时的血小板输注效果最佳,且随着DSA MFⅠ的增加,血小板输注效果均出现不同程度的下降。本组32次输注有效与PTR患者的DSA MFⅠ平均值分别为1 289.67±1 121.83 vs 4 078.60±2 578.57（P〈0.01）,Eplets错配数0—5的患者与错配数〉5的患者输注效果分别为29.38±22.47 vs 18.47±15.38（P〉0.05）。结论 Eplets配型方法结合DSAMFⅠ水平可筛选到适合的血小板供者,从而避免对于HLA-Ⅰ类抗体所致的PTR,保证输注效果。

酸洗脱血小板表面HLA-Ⅰ类抗原对血小板活化和凋亡的影响

目的探讨酸洗脱血小板表面HLA-Ⅰ类抗原对血小板活化和凋亡的影响。方法将10(人)份健康人机采血小板(0.5 ml/份)用pH3柠檬酸缓冲液处理(同时以PBS处理作对照组)后,利用多色流式细胞技术检测血小板表面HLA-Ⅰ类抗原及P-选择素(CD62p)的表达,Annexin V染色检测血小板的早期凋亡率。结果 pH3柠檬酸缓冲液及PBS处理后的血小板表面HLA-Ⅰ类抗原的表达为(23.83±9.93)%vs.(98.15±2.20)%(P<0.05),CD62p的表达为(45.94±10.13)%vs(20.29±4.24)%(P<0.05),血小板的早期凋亡率为(65.29±15.74)%vs(14.65±5.09)%(P<0.05)。结论 pH3柠檬酸缓冲液处理血小板可有效去除血小板表面HLA-Ⅰ类抗原,并同时诱导血小板的活化和凋亡。

中国汉族个体HLA-Ⅰ类基因全长序列鉴定及多态性比较

目的鉴定中国汉族个体HLA-Ⅰ类3个基因座-A、-B、-C的全长序列并比较其各亚区多态性。方法利用前期已建立的HLA-Ⅰ类基因3.7-4.5 kb全长序列高保真扩增、克隆及步移测序方法,从业已经过HLA高分辨测序分型、结果已知的1 000(人)份中国汉族造血干细胞捐献者的血样中,分别选择含HLA-A、-B、-C所有血清学家系等位基因的标本45、38、52份做序列鉴定与比较。结果共获得汉族个体HLA-Ⅰ类基因110条全长序列,包括38个HLA-A等位基因4.2 kb序列,30个HLA-B等位基因3.7 kb序列,以及42个HLA-C等位基因4.3-4.5 kb序列;所获110个等位基因的全长序列均提交Gen Bank及IMGT/HLA数据库,获得WHO命名委员会的命名,其中首次报道全长序列的等位基因有70个,包括新等位基因21个、修正序列的等位基因2个、5'-启动子序列及3'-UTR序列或内含子序列的等位基因47个,其他40个等位基因均在5'-启动子及3'-UTR区,延伸了IMGT/HLA数据库中释放发布的全长序列。结论 1)所鉴定的全长序列可为HLA-Ⅰ类基因测序分型引物和探针的正确设计、HLA基因表达调控、分子进化及疾病关联等研究,提供详实的基础资料和信息;2)中国汉族个体HLA-C基因的第2、3外显子及3'-UTR区,与HLA-A、-B相应区域比较,其全长序列多态性水平及分布较独特,暗示HLA-C基因免疫学功能的独特性。

96例血小板基因配型患者的HLA-Ⅰ类抗体特性分析及抗原免疫原性估算

目的 分析血小板基因配型患者的HLA-Ⅰ抗体特异性,并估算HLA抗原免疫原性。方法 标本来自医院送检本中心申请血小板基因配型的血小板输注无效(PTR)患者,共计96份。采用Luminex技术对患者标本进行HLA-Ⅰ抗体特异性检测,并根据MFI分析抗体表达水平。人群HLA抗原错配率、相对免疫原性根据HLA-A、-B位点等位基因频率分布和抗体检出频次分别进行估算。结果 96份患者标本均检出HLA-Ⅰ类抗体,但抗体种类分布较广。HLA-A、-B、-C磁珠包被抗原(共计97个)对应抗体的平均阳性检出率分别为0.38、0.47、0.28。在浙江人群中HLA-A和-B系统中,抗原频率较高的分别为HLA-A2、A11、A24和HLA-B60、B46、B58,其相对免疫原性分别为0.403、0.283、0.342和0.100、0.067、0.178。结论 PTR患者存在不同种类特性的HLA-Ⅰ抗体,证实不同HLA-A、-B抗原的相对免疫原性存在差异。

原发性肝细胞癌的HLA-Ⅰ类抗原表达

目的 确定体内原发性肝细胞癌细胞的 HL A - 类抗原表达情况。方法 采用免疫组织化学L SAB法对 6例原发性肝细胞癌冰冻组织进行研究。结果 6例标本的肝癌细胞都有较强的 HL A- 类抗原表达。结论 从 HL A- 类抗原表达角度看 ,研制肝癌

恶性血液病患者HLA-Ⅰ类抗体检出率和PRA水平与输血频次相关性研究

目的研究恶性血液病患者HLA-Ⅰ类抗体检出率和PRA水平与输血频次的关系。方法采用ELISA法对32名反复输血的恶性血液病患者血清做血小板HLA-Ⅰ类抗体筛查试验和确定试验。结果 32名患者中有6名为HLA-Ⅰ类抗体阴性转阳性,输血次数与HLA-Ⅰ类抗体阳性率(0—100%)的相关系数为0.926(P<0.05);输血次数(11—60次)和PRA水平相关系数为0.824(P<0.05);输注浓缩血小板数量[(20.00±17.89)Uvs(1.15±2.15)U]与HLA-Ⅰ类抗体阴性转阳性也具有一定的关系(P<0.05)。结论反复输血的恶性血液病患者HLA-Ⅰ类抗体阴性转阳性的发生率随着输血次数的增多而增加;其PRA水平也随着患者输血次数的增多而增高。

HLA-Ⅰ类多态性对B淋巴母细胞样细胞系TNF产生的影响

通过对２３个已确定ＨＬＡⅠ类型别的ＬＣＬ进行ＴＮＦ生物活性的检测，结果发现：携带ＨＬＡＢ５２型别的个体，其ＬＣＬ经ＬＰＳ刺激后，ＴＮＦ生物活性比不携带ＨＬＡＢ５２的个体低（Ｐ＜００１），且以ＨＬＡＢ５２纯合子细胞表达量最低，杂合子次之。提示，ＴＮＦ的产生可能是一种受ＨＬＡ特异性等位基因控制的遗传性状，影响ＴＮＦ的产生可能是ＨＬＡ复合体发挥免疫调节的重要因素之一。

慢性乙型病毒性肝炎、肝癌组织HLA-Ⅰ类抗原的表达及意义

目的:探讨慢性乙型肝炎、肝癌组织中人类白细胞抗原I(HLA-I)的表达和临床意义。方法:应用流式细胞仪对51例慢性乙型肝炎患者肝组织和43例原发性肝癌癌组织中的HLA-I抗原进行检测。结果:肝癌组织中HLA-I抗原表达为36.47±19.38,明显低于慢性乙肝的79.54±41.55和正常肝组织的81.86±46.53(P均<0.01),而慢性乙型肝炎肝组织和正常肝组织HLA-I类抗原表达无明显差异(P>0.05),伴有肝内和(或)淋巴结转移的肝癌组织中HLA-I抗原表达较无转移组明显降低(22.83±11.59 vs 46.28±23.16,P<0.05);HLA-I类抗原表达与血清AFP水平呈明显负相关(r=-0.741 1,P<0.01),但与肝癌组织分化程度呈明显正相关(r=0.805 1,P<0.05)。结论:HLA-I抗原表达异常与肝癌的发生和转移密切相关。

HLA-Ⅰ类抗原在喉癌中的表达及意义

目的:研究HLA-Ⅰ类抗原在喉癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化方法检测HLA-I类抗原在40例喉癌组织及癌旁正常组织中的表达。结果:HLA-Ⅰ类抗原在喉癌组织中表达下调比例60%,缺失比例17.5%。有转移淋巴结组与无转移淋巴结组之间差异存在统计学意义。结论:HLA-Ⅰ类抗原在喉癌组织中表达下调或缺失,可能与淋巴结转移相关。

HLA-Ⅰ类分子与乙型肝炎的相关性研究

人类白细胞抗原（ＨＬＡ）主要由三类抗原组成，ＨＬＡ－Ⅰ类抗原（ＨＬＡ－Ａ、Ｂ、Ｃ）和Ⅱ类抗原（ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＰ、ＤＱ）及Ⅲ类抗原（ＨＬＡ－ｃ２、Ｂｆ、ｃ４Ａ、ｃ４Ｂ）。ＨＬＡ－Ⅰ类分子以膜抗原形式广泛分布于人体有核细胞表面。在内源性抗原提呈及对细胞...

沙眼衣原体感染对Hela细胞HLA-Ⅰ类分子表达的影响

目的 探讨沙眼衣原体 (Ct)感染对上皮细胞系Hela细胞HLA Ⅰ类分子表达的影响。方法 用直接免疫荧光和流式细胞仪分析等方法 ,对感染Ct的Hela细胞HLA Ⅰ类分子表达水平进行检测。结果 Ct感染的Hela细胞HLA Ⅰ类分子表达水平随感染剂量增加和感染时间延长而下降 ,并且IL 10抗体能部分抑制这种下降。结论 Ct感染可下调Hela细胞HLA Ⅰ类分子表达 ,下调与感染过程中分泌的IL 10有关 。

可溶性HLA-Ⅰ类抗原的含量在干扰素治疗慢性乙型肝炎中的变化及意义

测定可溶性HLA -I类抗原的含量在干扰素-α治疗慢性乙型肝炎中的变化,并分析其意义。血清可溶性HLA -I类抗原的含量用夹心ELISA方法测定。治疗第8周,完全反应组患者可溶性HLA -I类抗原的含量显著高于治疗前的水平;治疗第16周和第2 4周,可溶性HLA -I类抗原的含量均显著低于治疗前。部分反应组和无反应组在治疗过程中可溶性HLA -I类抗原的含量与治疗前相比无显著变化。可溶性HLA -I类抗原含量的变化反映了慢性乙型肝炎治疗中患者免疫功能受到调节。

HLA-Ⅰ类DNA分型进展及临床意义

本文综述了HLA-Ⅰ类DNA分型的进展及临床意义,并与血清学分型做了比较。

可溶性HLA-Ⅰ类抗原及其临床意义的研究进展

ＨＬＡ是一类复杂的人类遗传多肽性系统，其研究工作在医学实践中有十分重要的意义。其中，ＨＬＡ－Ⅰ类抗原在移植排斥反应中起着重要作用，是组织排斥应答的主要抗原，同时对细胞毒Ｔ细胞起约束作用，ＨＬＡ－Ⅰ类抗原除了以膜抗原形式存在于细胞膜表面外，目前也已从人类的血清和淋巴液，尿液及乳汁中检出，称为可溶性ＨＬＡ抗原（ＳｏｌｕｄｌｅＨＬＡＡｎｔｉｇｅｎｓ，ｓＨＬＡ）。本文综述了ｓＨＬＡ－Ⅰ分子的分泌、结构、检测、在免疫调节及在自身免疫病、器官移植、感染等生理、病理状况下的意义。

广州地区209例HLA-Ⅰ类抗体引起的血小板输注无效患者抗体特异性及epitopes分析

目的了解广州地区人类白细胞抗原(HLA)⁃Ⅰ类抗体所致血小板输注无效(PTR)患者的HLA抗体特异性及高频抗原决定簇。方法采用ELISA方法对209例PTR患者的HLA⁃Ⅰ类抗体进行检测。运用Luminex检测平台,通过HLA特异性抗体检测试剂盒(LIFECODES LSA^(TM)CLASS I)检测患者血清中针对HLA⁃A、B及Cw的特异性抗体;经MATCH IT!和HLA Matchmaker软件分析,获得患者HLA⁃Ⅰ类抗体特异性及相应epitopes。统计分析PTR患者血清中针对HLA⁃A、B、Cw位点的特异性抗体及epitopes的阳性频率。结果209份HLA⁃Ⅰ类抗体阳性PTR患者标本中共检出95种特异性抗体,其中针对HLA⁃A位点的抗体29种,以A*24:02(42.58%)最常见;检出针对HLA⁃B位点的抗体48种,阳性频率较高的有B*27:08(50.72%)、B*82:02(45.45%)、B*15:12(44.98%)、B*07:02(44.02%)、B*35:01(42.58%)、B*35:08(42.58%)和B*27:05(42.11%);针对血小板低表达Cw位点的抗体仅检出18种,常见C*07:01(19.62%)和C*07:02(18.66%)。运用HLA Matchmaker软件分析,共检出182种HLA⁃I类epitopes,以163 LG(19.28%)、71 KA(16.27%)、30 G(15.06%)、163 EW(11.45%)和127 K(11.45%)相对高频。结论获得广州地区PTR患者体内HLA⁃Ⅰ类抗体的分布特点,对血小板供者库的建立以及Eplet配型方法的开展提供理论依据。

人群HBV易感性与HLA-Ⅰ、Ⅱ类基因相关性研究

[目的]探讨人类白细胞抗原Ⅰ、Ⅱ类基因与乙型肝炎病毒（HBV）感染的相关性。[方法]2003～2004年，采用PCR-SSP方法对青岛市178例HBV感染者（实验组）和1383名无血缘关系的自愿骨髓捐献者（对照组）分别进行HLA-Ⅰ、Ⅱ类基因分型检测。[结果]HLA-DR9、DR12的分布频率在实验组为30．9％（55／178）和28．0％（50／178），在对照组为20．7％（286／1383）和19．5％（270／1383）（P〈0．01）。[结论]HLA—DR9、DR12有助于HBV对宿主的感染，可能是HBV的易感基因。