人肝癌细胞的HLA-Ⅰ类抗原表达

为了为肝癌细胞毒性 T细胞疫苗设计、构建及免疫治疗策略的决策提供体外实验研究依据 ,采用免疫细胞化学 L SAB法及流式细胞术观察了体外培养人肝癌细胞的 HL A- 类抗原表达情况。结果显示 ,人肝癌细胞株 Alexander、Hep G2、SMMC- 772 1、QGY- 770 3都有较强的 HL A- 类抗原表达 ,这使细胞毒性 T细胞杀伤肝癌细胞成为可能。

原发性肝细胞癌的HLA-Ⅰ类抗原表达

目的 确定体内原发性肝细胞癌细胞的 HL A - 类抗原表达情况。方法 采用免疫组织化学L SAB法对 6例原发性肝细胞癌冰冻组织进行研究。结果 6例标本的肝癌细胞都有较强的 HL A- 类抗原表达。结论 从 HL A- 类抗原表达角度看 ,研制肝癌

慢性乙型病毒性肝炎、肝癌组织HLA-Ⅰ类抗原的表达及意义

目的:探讨慢性乙型肝炎、肝癌组织中人类白细胞抗原I(HLA-I)的表达和临床意义。方法:应用流式细胞仪对51例慢性乙型肝炎患者肝组织和43例原发性肝癌癌组织中的HLA-I抗原进行检测。结果:肝癌组织中HLA-I抗原表达为36.47±19.38,明显低于慢性乙肝的79.54±41.55和正常肝组织的81.86±46.53(P均<0.01),而慢性乙型肝炎肝组织和正常肝组织HLA-I类抗原表达无明显差异(P>0.05),伴有肝内和(或)淋巴结转移的肝癌组织中HLA-I抗原表达较无转移组明显降低(22.83±11.59 vs 46.28±23.16,P<0.05);HLA-I类抗原表达与血清AFP水平呈明显负相关(r=-0.741 1,P<0.01),但与肝癌组织分化程度呈明显正相关(r=0.805 1,P<0.05)。结论:HLA-I抗原表达异常与肝癌的发生和转移密切相关。

HLA-Ⅰ类抗原在喉癌中的表达及意义

目的:研究HLA-Ⅰ类抗原在喉癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化方法检测HLA-I类抗原在40例喉癌组织及癌旁正常组织中的表达。结果:HLA-Ⅰ类抗原在喉癌组织中表达下调比例60%,缺失比例17.5%。有转移淋巴结组与无转移淋巴结组之间差异存在统计学意义。结论:HLA-Ⅰ类抗原在喉癌组织中表达下调或缺失,可能与淋巴结转移相关。

可溶性HLA-Ⅰ类抗原的含量在干扰素治疗慢性乙型肝炎中的变化及意义

测定可溶性HLA -I类抗原的含量在干扰素-α治疗慢性乙型肝炎中的变化,并分析其意义。血清可溶性HLA -I类抗原的含量用夹心ELISA方法测定。治疗第8周,完全反应组患者可溶性HLA -I类抗原的含量显著高于治疗前的水平;治疗第16周和第2 4周,可溶性HLA -I类抗原的含量均显著低于治疗前。部分反应组和无反应组在治疗过程中可溶性HLA -I类抗原的含量与治疗前相比无显著变化。可溶性HLA -I类抗原含量的变化反映了慢性乙型肝炎治疗中患者免疫功能受到调节。

γ-干扰素基因的导入及删除对人肿瘤细胞HLA-Ⅰ、Ⅱ类抗原表达的影响

目的：制备有效的细胞因子基因修饰的肿瘤细胞作为“瘤苗”。方法：用缺陷型逆转录病毒作为载体将人γ－干扰素（ＩＦ－γ）含信号肽ｃＤＮＡ转导入人胃癌细胞株ＭＫＮ、４５，经Ｇ４１８筛选后得－ＩＦＮ－γ基因修饰株ＭＫＮ－４５－ＩＦＮ。ＰＣＲ方法测得有标记基因ＮｅｏＲ及ＩＦＮ－γ基因的存在，但经３个月连续传代培养后，ＰＣＲ仅能检测到ＮｅｏＲ基因，而未检出ＩＦＮ－γ基因、ＨＬＡ－Ⅰ、Ⅱ类单抗间接免疫荧光法流式细胞仪测定了上述相应时期ＩＦＮ－γ基因修饰肿瘤细胞ＨＬＡ－Ｉ、Ⅱ类抗原的表达。结果：随着ＩＦＮ－γ基因在染色体中被删除，ＨＬＡ－Ⅰ、Ⅱ类的表达又恢复至与ＭＫＮ－４５相同的水平。结论：为确保ＩＦＮ－γ基因的作用，应不断检测其基因的存在。

HLA-I类抗原的组织配型基因芯片的建立及应用

目的:应用基因芯片技术进行北方汉族人群HLA-I类抗原中分辨度分型研究,建立稳定的HLA检测芯片。方法:采用寡核苷酸芯片分型方法,依据第十三届国际组织相容性工作会议报告及相关文献,同时考虑遗传的连锁不平衡,及强脊炎、幼年型糖尿病等与HLA密切相关的遗传病等因素,选择了中国人群基因频率较高的等位基因,根据HLA-I类不同基因亚型的独特序列,完成了探针的设计与筛选,最后设计了122条探针(HLA-A56条,HLA-B66条)制成基因分型芯片。采用带荧光标记的引物,用合适的PCR方法扩增HLA-I类抗原上的多态性区域,产物与芯片上探针杂交。杂交结果经荧光扫描并用特定软件分析判断阳性探针,以此确定样品基因型。结果:所有样本的HLA-I类抗原基因分型均获成功。此中分辨度探针可分出598个I类抗原等位基因,可检出I类抗原特异性57个。结论:基因芯片用于HLA-I类抗原分型可行。其分辨率高,特异性强,可用于HLA基因分型、骨髓移植、器官移植的HLA配型、与HLA有密切关系的遗传性疾病的人群筛查。

淋巴细胞表面HLA-I类抗原的阻断

为了研究阻断淋巴细胞表面HLA I类抗原与其相应抗体特异性结合的方法及效果 ,在 2 2℃和 pH 7.4PBS介质中采用甲氧基聚乙二醇 苯并三唑碳酸盐 (mPEG BTC) ( 12mmol/L)处理淋巴细胞。结果表明 ,经mPEG BTC处理后的淋巴细胞与相应HLA I类抗体的微量淋巴细胞毒试验为阴性。结论 :在 2 2℃和pH 7.4条件下mPEG BTC可以阻断淋巴细胞表面HLA I抗原与其相应抗体的特异性结合。

ELISA测定血清可溶性HLA-I类抗原

目的 建立定量测定可溶性HLA I类抗原的ELISA方法。方法 测定上海地区汉族正常人群血清可溶性HLA I类抗原的含量 ,并进一步研究可能影响这一含量的因素。结果 测得 116例上海地区汉族正常个体血清可溶性HLA I类抗原的含量为 5 2 9 3 2±2 82 88ng/ml。结论 性别和常见HLA A位点抗原型别对血清可溶性HLA I类抗原的含量未造成显著影响。

HLA-Ⅰ、CD8和CD4在宫颈不同病变组织中的表达及意义

目的检测人类白细胞抗原1(HLA-Ⅰ)类抗原、CD8和CD4分子在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样变(CIN)、宫颈癌和癌旁组织中的表达,探讨其表达与宫颈不同病变的关系。方法宫颈癌、CIN、慢性宫颈炎和癌旁组织标本各20份,采用免疫组织化学SP法检测HLA-Ⅰ类抗原、CD8和CD4分子的表达。结果在宫颈癌、CIN、慢性宫颈炎和癌旁组织中,HLA-Ⅰ类抗原的阳性表达率分别为40%、95%、100%和100%,宫颈癌组的表达率明显降低(P<0.01);CD8分子的阳性表达率分别为35%、95%、100%和100%,宫颈癌组的表达率明显降低(P<0.01);CD4分子的阳性表达率分别为45%、80%、100%和100%,宫颈癌组的表达率亦明显降低(P<0.01)。HLA-Ⅰ类抗原和CD8分子的表达呈正相关(r=0.913,P<0.001)。结论 HLA-Ⅰ类抗原、CD8和CD4分子在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中表达减少及无表达,3者在宫颈病变程度由低到高的发生发展过程中可能起着重要的保护作用。