髓系白血病细胞系HLA-Ⅱ基因型的探讨

目的检测髓系白血病细胞系HLA-Ⅱ基因型。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对4种髓系白血病细胞系(U937、K562、HEL、MEG)的HLA-Ⅱ基因型进行DNA分型。结果该4种白血病细胞系的HLA-Ⅱ基因型分别是,U937细胞:DRB1*0301/*0301,DQB1*0201/*0201,DPB1*0402/*0402;K562细胞:DRB1*0301/*0301,DQB1*0201/*0201,DPB1*0402/*0402;HEL细胞:DRB1*1302/*1302,DQB1*0201/*0201,DPB1*1401/*1401;MEG细胞:DRB1*1406/*0410,DQB1*0401/*0401,DPB1*0501/*0501。结论该4种细胞系虽然来源于不同个体,但均属于髓系肿瘤细胞,国际FAB分类均属于急性髓系白血病细胞。然而,分子免疫遗传学类型有所差异。通过本研究提高了髓系白血病细胞系HLA-Ⅱ基因型认识,对今后髓系白血病分子免疫遗传学的研究,提供了初步资料。

抗SSA和SSB抗体与HLA-Ⅱ基因的相关性分析

目的 探讨云南汉族系统性红斑狼疮 (SLE)患者抗SSA和SSB抗体与HLA DRB1、DQA1、DQB1等位基因及单体型的相关性。方法 采用多聚酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)技术对 6 3例云南汉族SLE患者和 5 4名同民族健康对照进行DRB1、DQA1、DQB1基因分型。结果 云南汉族SLE患者中DR15 (P <0 0 1)、DR16 (P <0 0 5 )、DQA1 0 10 2 (P <0 0 5 )、DQA1 0 10 3(P<0 0 1)、DQB1 0 6 0 1(P <0 0 5 )等位基因频率明显增高 ;抗SSA和SSB抗体阳性的SLE病人中DQA1 0 10 3频率均显著增高 (P =0 0 42 ,P =0 0 0 6 ) ;抗SSB抗体阳性的SLE患者中DQA1 0 5 0 1频率均显著增高 (P =0 0 0 9)。结论 云南汉族SLE抗SSA和SSB抗体的产生与DQA1 0 10 3等位基因相关 ;抗SSB抗体的产生还与DQA1 0 5 0 1相关。

华东地区汉族HLA-Ⅱ类基因与白癜风临床特征的相关性

目的探讨华东地区汉族HLA-Ⅱ类基因与白癜风临床特征的相关性。方法采用聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸探针(PCR-SSOP)方法检测华东地区汉族白癜风患者HLA-DRB1、DQA1和DQB1位点的等位基因,使用SPSS10.0统计软件分析。结果HLA-DQA10103与伴发内分泌疾病的患者有显著正相关,DRB109与C4降低的患者明显负相关。按临床类型分析,发现局限型与DRB109和DQA103正相关,非节段型与DQA103正相关。结论:在华东地区汉族人群中,白癜风的临床特征与HLA-Ⅱ类基因有一定的相关性。

HLA-Ⅱ类基因多态性与乙型肝炎转归的相关性

目的探讨HLAⅡ类基因多态性与乙型肝炎转归之间的关系。方法采用PCRSSP对52例慢性乙型肝炎、30例急性乙型肝炎和106例正常人的HLADRB1、DQA1和DQB1等位基因多态性进行了分析。应用结晶紫染色法检测淋巴母细胞系(LCL)分泌TNF的细胞毒活性。采用MTT法检测淋巴细胞增殖指数。结果HLADRB10301、DQA10501和DQB10301在慢性乙型肝炎组的等位基因频率明显高于正常对照组。HLADRB111011104和DQA10301在慢性乙型肝炎组的等位基因频率明显低于急性乙型肝炎组。HLADRB10301、HLADQA10501、HLADQB10301阳性组LCL分泌TNF的活性和淋巴细胞增殖指数明显低于阴性组,HLADRB111011102、HLADQA10301阳性组LCL分泌TNF的活性和淋巴细胞增殖指数明显高于阴性组。结论HLADRB10301、DQA10501和DQB10301与慢性乙型肝炎的易感性相关,HLADRB111011104和DQA10301与慢性乙型肝炎的抗性相关。HLAⅡ类基因可通过影响TNF和淋巴细胞增殖反应来发挥免疫调节作用,与HBV感染慢性化或HBV清除有关。

HLA-Ⅱ类基因与慢性乙型肝炎重型化的相关性

目的:探讨HLA-DRB1、-DQA1和-DQB1等位基因多态性与慢性乙型肝炎重型化之间的关系. 方法:采用聚合酶链反应/序列特异性引物(PCR/SSP)技术对52例慢性乙型肝炎和32例性慢性重症乙型肝炎的HLA DRB1、-DQA1和-DQB1等位基因多态性进行了分析. 结果:HLA-DRB1*1 001在慢性重症乙型肝炎组的等位基因频率明显高于慢性乙型肝炎组(14.1% vs 1.9%,X2= 19.2 997,Pc=0.0281,RR=9.78).HLA-DQA1和HLA- DQB1等位基因频率在慢性重症乙型肝炎组和慢性乙型肝炎组间差异无显著性. 结论:HLA-DRB1*1 001与慢性乙型肝炎的重型化有关, 可能是—个对判断病情和预后有价值的实验指标.

献血人群中HCV感染与HLA-Ⅱ类基因的相关性研究

目的人类白细胞抗原(HLA)在机体抗病毒免疫中起重要作用,探讨献血人群中丙型肝炎病毒(HCV)感染与HLA-II类基因的相关性。方法选择2011年10月至2013年10月在浙江省血液中心献血的人员中HCV RNA阳性的样本45例,同时以健康人群为对照,其中HLA-DRB1位点对照样本8 333例,HLA-DRB1位点对照样本72例,用PCR-SBT方法测定献血者HLA-II类基因中DRB1和DQB1等位基因情况。结果 HLA-DRB1基因的DRB1*01:02(P=0.0394,OR=23.4,95%CI=2.89~189.1),DRB1*13:01(P=0.0095,OR=5.60,95%CI:1.74~18.00);HLA-DQB1基因的DQB1*03:03(P=0.0402,OR=0.45,95%CI:0.21~0.94),DQB1*06:01(P=0.0456,OR=2.47,95%CI:1.05~5.83),这些基因位点的多态性在HCV RNA阳性献血者中的频率与健康对照人群比较有统计学差异。结论在献血人群中HCV感染与HLA-II类基因中部分多态性位点有相关性。

心脏移植中HLA-Ⅱ类抗原基因配型的实验研究

建立人类白细胞抗原 (HLA) Ⅱ型抗原 4个基因位点DRB1、DQA1、DQB1、DPB1的聚合酶链式反应 -单 -链构象多态分析 (PCR -SSCP)配型方法。实验分三部分 :1 通过预实验确定使用PCR -SSCP检测HLA -DRB1、DA1、DQB1、DPB14个位点的实验条件 ;2 使用以上方法对 1例拟行心脏移植的患者在 12 7例健康人群中进行基因位点的检测配型 ;3 对配型一致及不一致的供体和受体 ,进行体外混合淋巴细胞培养(MLC) ,以检验这种基因配型方法的可靠性。通过PCR -SSCP的检测配型 ,在 12 7例供体中 ,2例DRB1位点、2例DQA1位点、3例DQB1位点、2例DPB1位点与受体相一致。体外MLC证实与受体不一致的供、受体MLC中 ,受体淋巴细胞呈高度增殖反应 ;而与受体某一位点一致的供体 ,其MLC中受体淋巴细胞增殖反应明显降低 (P <0 0 1)。PCR -SSCP是一种快速、准确的HLA

HLA-Ⅱ类基因DR_α及DRB_1 0401转基因小鼠模型的遗传与繁殖

采用类系祖建系的方法 ,对HLA -Ⅱ类基因DRα 和DRB1 0 4 0 1转基因小鼠模型进行了繁育。通过PCR和Southernblot分子杂交的方法 ,检测小鼠尾组织的DNA样品 ,以确定DR基因的整合和复制情况。结果表明 ,HLA -Ⅱ类基因DR已稳定地遗传至第五代(F5) ;共产仔 32 6只 ,PCR检测出阳性小鼠 95只 ,阳性率为 2 9.1 %。PCR—Southern印迹杂交检测 ,发现 68只仔鼠整合有DR基因 ,总有效率为 2 0 9%。经Nothern杂交和RT -PCR检测HLA -DR基因在脾脏和肾脏中均有表达。

山西地区HLA-Ⅱ类基因多态性与妊娠期糖尿病的相关性研究

目的探讨本地区人群HLA-Ⅱ类基因多态性与妊娠期糖尿病的相关性。方法以序列特异引物聚合酶链反应技术,对本地区39例GDM孕妇及42例同期正常健康孕妇的HLA-Ⅱ类基因进行检测。结果GDM组DRB1*0301、DQB1*0201等位基因频率分别为38.5%和28.2%,明显高于对照组的16.7%和9.5%,两组比较有统计学意义;GDM组DQA1*0103等位基因频率为7.7%,明显低于对照组的14.3%,两组比较有统计学意义。结论HLA-DRB1*0301、DQB1*0201等位基因可能是该地区妊娠期糖尿病的易感基因,而DQA1*0103等位基因可能是该地区妊娠期糖尿病的保护基因。

HLA-Ⅱ类基因与人类疾病相关性研究进展

通过DNA分型技术 ,已经明确了多种疾病的发生和发展与HLA Ⅱ类基因相关联。可通过计算相对危险因子 (RR)来判断HLA等位基因的频率。HLA Ⅱ类基因多态性可以改变HLA分子、抗原、T细胞之间相互作用的特性 ,并因此控制对外来抗原 (有时自身抗原 )的免疫应答。HLA Ⅱ类基因的编码的某一氨基酸序列控制着对疾病的易感性和临床性状。构成HLA基因群的各个基因是高度连锁的 ,因而与某一特定疾病关联的易感基因有可能不是单一的 ,而是一些连锁基因的组合。

HLA-Ⅱ类基因多态性与妊娠期糖尿病的关系

妊娠期糖尿病是遗传因素和环境因素共同作用的结果,而人类白细胞抗原(HLA)是其最重要的影响因素之一,多种研究结果表明妊娠期糖尿病的结局可能与其他糖尿病有关联,不同国家不同地区人群各型糖尿病的人类白细胞抗原基因型不同,现就此综述如下。

HLA-Ⅱ类基因DRα及DRB_1~*0401~1转基因小鼠的制备

利用受精卵原核的显微注射技术 ,将人类HLA Ⅱ类DRα及DRB1 0 4 0 1两种基因 ,显微注射至C5 7BL 6×DBA 1杂交小鼠受精卵中 ;并移植至假孕受体鼠的输卵管内。实验先后有 8只鼠妊娠 ,稳定遗传五代 ,经PCR检测 95只HLA DRα、DRB1 0 4 0 1阳性。α 32P dCTP斑点杂交与Southern印迹杂交鉴定出 6 8只整合含有DRα及DRB1 0 4 0 1混合型的转基因小鼠 ,有效率为 2 0 .9%。经Northern杂交[1] 和RT PCR检测 ,其HLA DRα、DRB1 0 4 0 1基因在脾脏和肾脏中均有表达。结果说明 ,携带人类HLA Ⅱ类DRα和DRB1 0 4 0 1基因的转基因动物模型构建成功。

幽门螺杆菌感染与HLA-Ⅱ类基因

幽门螺杆菌(H.pylori)感染目前认为是慢性胃炎、消化性溃疡、胃MALT淋巴瘤和胃腺癌的主要病因,世界卫生组织将其列为Ⅰ类致癌因子,许多研究认为H.pylori感染引起人类胃肠疾病的机制可能与宿主的免疫遗传因素有关,即宿主HLA-Ⅱ类基因中可能存在对H.pylori感染易感和/或抵抗的基因.本文就近年来幽门螺杆菌感染与HLA-Ⅱ类基因相关方面的研究进展作一综述,总结目前研究存在的问题,并展望今后的研究方向.

人群HBV易感性与HLA-Ⅰ、Ⅱ类基因相关性研究

[目的]探讨人类白细胞抗原Ⅰ、Ⅱ类基因与乙型肝炎病毒（HBV）感染的相关性。[方法]2003～2004年，采用PCR-SSP方法对青岛市178例HBV感染者（实验组）和1383名无血缘关系的自愿骨髓捐献者（对照组）分别进行HLA-Ⅰ、Ⅱ类基因分型检测。[结果]HLA-DR9、DR12的分布频率在实验组为30．9％（55／178）和28．0％（50／178），在对照组为20．7％（286／1383）和19．5％（270／1383）（P〈0．01）。[结论]HLA—DR9、DR12有助于HBV对宿主的感染，可能是HBV的易感基因。

广东汉族白癜风与HLA-Ⅱ类基因相关性研究

目的:确定广东籍汉族白癜风发病与HLA-Ⅱ类基因的相关性。方法:采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术,对57例广东籍汉族各型白癜风患者和60例健康对照者静脉血样本HLA-DR,DQ等位基因多态性进行研究。结果:白癜风患者DR7(DRB1*0701)等位基因频率显著升高(RR=6.213,Pc<0.05),DRw52(DRB3*0101/02 DRB3*0201 DRB3*0301),DRw53(DRB4*0101/03/05)和DRw51(DRB5*0101/02 DRB5*0202)基因频率明显低于正常对照组,以上三者两组间比较均有显著性差异(Pc<0.05)。白癜风患者DQ5(DQB1*0501-04)基因频率显著高于正常对照组(Pc<0.05);DQ4(DQB1*0401/02)基因频率显著低于正常对照组(Pc<0.05)。结论:提示HLA-DR7(DRB1*0701)等位基因可能与广东籍汉族白癜风的发病有关。DRw52(DRB3*0101/02 DRB3*0201 DRB3*0301),DRw53(DRB4*0101/03/05)和DRw51(DRB5*0101/02 DRB5*0202)对白癜风发病可能有一定保护作用。DQ5(DQB1*0501-04)可能为白癜风患者的易感基因。

HLA-Ⅱ类基因、脂联素与GDM和T2DM的比较性研究

目的 探讨部分HLA-Ⅱ类等位基因与妊娠期糖尿病（GDM）的相关性，从免疫遗传学角度比较GDM和（T2DM）遗传基础的异同．观测GDM、T2DM患者血浆脂联素水平的变化，分析血浆脂联素与胰岛素抵抗的关系，探讨脂联素在GDM发病中的作用，寻找预测GDM远期可能发生糖尿病的临床指标．方法 采用PCR-SSP检测48例GDM和48例T2DM的部分HLA-Ⅱ等位基因频率，并与48名正常孕妇比较；选取GDM、T2DM患者、正常孕妇组各40例作为研究对象，应用放免法测定受试者血浆脂联素水平．

HLA-Ⅱ类基因、脂联素与GDM和T2DM的比较性研究(摘要)

目的探讨部分HLA-Ⅱ类等位基因与妊娠期糖尿病（GDM）的相关性，从免疫遗传学角度比较GDM和2型糖尿病（T2DM）遗传基础的异同．观测GDM、T2DM患者血浆脂联素水平的变化，分析血浆脂联素与胰岛素抵抗的关系，探讨脂联素在GDM发病中的作用，寻找预测GDM远期可能发生糖尿病的临床指标．方法采用PCR—SSP检测48例GDM和48例T2DM的部分HLA-Ⅱ等位基因频率，并与48名正常孕妇比较；选取GDM、T2DM患者、

器官移植HLA-Ⅱ类基因分型研究及应用

目的：提高ＨＬＡ－Ⅱ类基因ＤＲ、ＤＱ位点分型的准确性，选择合适的供受者对，延长移植物的存活时间。方法：对４２９例肾移植供受者ＨＬＡ－Ⅱ类基因分型进行了研究。ＰＣＲ－ＳＳＰ（聚合酶链式反应－序列特异性引物），全过程耗时３小时。结果：（１）用ＰＣＲ－ＳＳＰ方法可同时、同条件进行ＩＬＡ－Ⅱ类ＤＲ、ＤＱ基因分型。（２）１７２例次供受者ＨＬＡ－ＤＲ位点０个错配（０ＭＭ），其移植肾１年存活率为１００％；１个错配（１ＭＭ）为９２６％；２个错配（２ＭＭ）为８６５％。（３）在与疾病相关的研究中发现，尿毒症患者ＤＲ１０比例明显高于正常人。供受者ＤＲ、ＤＱ位点基因频率及单倍型连锁不平衡参数与国内外报道大致相同。结论：初步建立起一套完整的ＨＬＡ分型手段，为进一步研究ＨＬＡ打下了基础。