4082名上海骨髓库汉族无关供者HLA-A、B、DRB1高分辨等位基因及单体型多态性研究

目的了解上海地区汉族人群HLA-A、B、DRB1在高分辨分型水平上的等位基因及单体型频率分布特征。方法采用PCR-测序分型技术(Sequence-based typing,SBT)对4 082名随机、无血缘关系、健康的中华骨髓库上海分库汉族造血干细胞捐献者进行HLA-A、B、DRB1高分辨基因分型,利用计数法和最大似然性原理方法分别计算HLA-A、B、DRB1等位基因及单体型频率。结果 4 082例样本中,共观察到204个HLA等位基因,其中频率>0.1的HLA-A、B、DRB1等位基因分别有A*11∶01、A*24∶02、A*02∶01、B*46∶01、DRB1*09∶01、DRB1*15∶01。841条A-B单体型中,70条单体型呈现显著的连锁不平衡(ALD>0,HF≥3.67×10-4,χ2>3.84),8条表现为强连锁不平衡(RLD>0.40),17条单体型的频率高于0.01;1 027条B-DRB1单体型中,99条单体型呈现显著的连锁不平衡(ALD>0,HF≥3.67×10-4,χ2>3.84),12条表现为强连锁不平衡(RLD>0.40),12条单体型的频率高于0.01;3 344条A-B-DRB1单体型中,681条单体型是"可靠的"(频率≥3.67×10-4),单体型频率高于0.001有135条。结论获得上海地区汉族人群HLA-A、B、DRB1高分辨等位基因频率和单体型分布数据及相关遗传参数,为临床移植供者的选择、中国人群CWD表的制订、骨髓库最适库容的评估及人类遗传学研究提供参考数据。

黑龙江地区汉族HLA-A、B、DRB1基因及单倍型的研究与应用

目的研究中国造血干细胞捐献者资料库黑龙江分库汉族捐献者HLA-A、B、DRB1等位基因和单体型频率分布特征,探讨中国广大地区乃至世界其他人种利用黑龙江汉族捐献者进行造血干细胞移植的可能性。方法采用序列特异性引物(PCR-SSP)和序列特异性寡核苷酸探针(PCR-SSOP)基因分型技术,对黑龙江地区汉族捐献干细胞的9 019名供者进行HLA-A、B、DRB1基因低分辨检测。结果共观察到77个HLA等位基因,其中频率>0.1的A、B、DRB1座位特异性分别为A2、A11、A24、B13、DR15、DR9、DR7、DR12、DR4。432条A-B单体型中,25条单体型的频率高于0.01,101条单体型呈现显著的正连锁不平衡,21条表现为强连锁不平衡(RLD>0.40);437条B-DRB1单体型中,22条单体型的频率高于0.01,115条单体型呈现显著的正连锁不平衡,16条表现为强连锁不平衡;2 002条A-B-DRB1单体型中,971条单体型有意义(频率≥1.66×10-4),18条单体型频率高于0.005。截止2007年3月通过中国造血干细胞捐献者资料库管理中心检索,成功移植20例。结论黑龙江汉族人群HLA-A,B,DRB1等位基因和单体型的分布特征接近北方汉族人群,与中国汉族人总体分布特征相似。未发现群体特有的基因和单体型,但具有其自身分布特征。不同地区、不同人群有可能在中国造血干细胞库黑龙江地区汉族捐献者中寻找到HLA相合的供者。其中中国人群最容易找到HLA相合供者,其次是日本人和韩国人。

湖南地区人群HLA-A、B、DRB1等位基因多态性的研究

目的研究湖南地区人群HLA-A、B、DRB1位点等位基因的多态性。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术对3 664名湖南籍健康人进行HLA-A、B、DRB1等位基因的低分辨分型。结果本次研究共检出HLA-A、B、DRB1位点等位基因74种,其中A位点17种,B位点44种,DRB1位点13种。A位点中A*11(34.42%)、A*02(31.88%)、A*24(18.01%)、A*33(6.18%)为湖南人群的优势基因。B位点中B*40(23.70%)>B*46(17.76%)>B*15(13.99%)>B*13(8.60%)。DRB1位点中,频率最高的为DRB1*09(19.69%),其次为DRB1*15(14.01%)、DRB1*12(12.97%)、DRB1*04(11.96%)、DRB1*08(9.02%),频率最低的为DRB1*01(0.88%)。与其他地区不同人群相比,HLA-A、B、DRB1各位点等位基因的分布均有显著的差异。结论湖南人群的HLA-A、B、DRB1位点等位基因具有复杂的多态性,中国各地常见的基因均有分布,白血病患者在湖南不难找到合适的造血干细胞供者。本研究结果可作为湖南地区人群正常参考值,为人类学及HLA与疾病相关的研究提供了有力的背景资料。

HLA-A/B/C/DRB1/DQB1对非血缘造血干细胞移植影响的分析

本研究探讨供受者HLA-A/B/C/DRB1/DQB1等位基因不合的数目和位点对非血缘造血干细胞移植的影响。选取北京市道培医院101例非血缘造血干细胞移植病例,分别根据供受者HLA-A/B/C/DRB1/DQB1位点0-3个等位基因不合和HLA-C位点的不同,分组统计移植后1年以上总生存率、急性GVHD发生率和复发率。结果表明:①按供受者HLA等位基因水平10/10全相合组(30例)与9/10相合组(32例),8/10相合组(31例)以及7/10相合组(8例)分组比较,10/10和9/10组的1年以上总活存率(OS)较8/10组(78%and 82%vs50%,p=0.39)增多;10/10组、9/10组和8/10组复发率为16%和18%vs20%;10/10组没有Ⅱ度以上GVHD发生,9/10和8/10组10%左右。7/10组虽然病例数少,缺乏统计学意义,但结果证实安全有效。②)对比HLA-C位点等位基因不合组与HLA-10/10全合组,HLA-C不合组有延长1年以上总生存率(77%vs85%,p=0.30),降低复发率的趋势(8%vs17%,p=0.47),其Ⅱ度以上GVHD发生率明显增高,统计学有明显差异(0%vs25%,p=0.006)。③按抑制性KIR的配体HLA-C1/C2将HLA-10/10组与HLA-C一个等位基因不合组按供受者HLA-C1/C2 match和mismatch分为两组(37例和5例),发现1年以上总生存率、复发率,GVHD发生率无明显差异(78%vs80%,14%vs20%,和5%vs20%)。结论:供受者HLA-A/B/C/DRB1/DQB1等位基因不相合数目0-2个情况下,数目越少,1年以上生存率越高,复发率和急性GVHD无明显差异。7/10组是安全的。HLA-C不相合组GVHD发生率明显增高,有减少复发和延长生存率的趋势,但其原因是否与抑制性KIR与其配体HLA-C1/C2有关,尚待研究。

中国北方汉族人寻常型天疱疮与HLA-A、B单倍型的相关性研究

目的:探讨HLA-A、B单倍型与中国东北地区汉族人寻常型天疱疮的相关性。方法:采用标准微量淋巴细胞毒试验方法对寻常型天疱疮患者组及正常对照组进行HLA-I类抗原分型并计算单倍型频率进行比较。结果:与对照组比较,寻常型天疱疮患者组中单倍型HLA-A2、B5,HLA-A2、B13,HLA-A3、B40,HLA-A3、B13,HLA-A3、B16,HLA-A3、B5和HLA-A10、B40的频率明显增高(P<0.05),而单倍型HLA-A2、B46在患者组中未发现。结论:特异单倍型可能是决定寻常型天疱疮发生的重要因素。

PCR-SSP法HLA-A、B基因分型与血清学分型的比较

目的比较聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)进行HLA-Ⅰ类A、B抗原位点分型的准确性,并探讨血清学分型错误发生的原因。方法用PCR-SSP以及单克隆抗体血清学分型技术对HLA-A、B分型并比较。结果34例样本PCR-SSP基因分型无假阳性和假阴性出现。PCR-SSP法与血清学比较,血清学检出错误或漏检率分别为HLA-A位点23.5%,B位点26.5%。血清学发生错误或易混淆的抗原有:A2和A68、A32和A33,B5、B60和61。结论PCR-SSP法进行HLA-A、B抗原等位基因分型具有分辨率高、特异性强、重复性好、实验过程简捷快速、分型结果较血清学更加准确可靠的优点。

遵义地区汉族HLA-A、B等位基因多态性的研究

目的从基因水平调查遵义地区汉族人群HLA-A、B等位基因频率,并了解其多态性分布状况。方法应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法对遵义汉族200名健康个体进行等位基因分型。结果遵义地区汉族HLA-A、B等位基因频率分布,在低分辨水平,共检出12个A*基因,25个B*基因,与我国北方、南方汉族比较,更接近南方汉族人群。南方汉族中分布频率极低的B*07,在遵义汉族分布频率较高(GF值为2.0%)。结论遵义汉族人群HLA-A、B基因具有较为丰富的多态性,其分布符合南方汉族的特点,又具有高频B*07地区性遗传特征。

辽宁地区斑秃患者与HLA-A、HLA-B等位基因相关性研究

目的探讨HLA-A、HLA-B等位基因与斑秃的相关性。方法采用LABTypeTM SSO技术检测44例斑秃患者和200例正常对照的HLA-A、HLA-B等位基因频率。结果 HLA-A*11(χ2=6.08,P<0.05)、HLA-B*13(χ2=29.80,P<0.01)、HLA-B*40(χ2=8.04,P<0.01)、HLA-B*46(χ2=5.86,P<0.05)和HLA-B*51(χ2=8.82,P<0.01)的等位基因频率显著增高。结论 HLA-A*11、HLA-B*13、HLA-B*40、HLA-B*46和HLA-B*51可能是斑秃的易感基因。

内蒙古地区急性淋巴细胞白血病病人HLA-A、B等位基因多态性的研究

目的:探讨人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)HLA-A、B等位基因多态性与急性淋巴细胞白血病的相关性。方法:采用Luminex流式细胞术-序列特异性寡核苷酸探针(flow cytometry-sequencespecific oligonucleotide probe,FLOW-SSOP)反向杂交方法对内蒙古地区48例急性淋巴细胞白血病病人HLA-A、B等位基因多态性进行分析,以北方地区健康群体资料作为正常对照。结果:(1)在HLA-A等位基因中,急性淋巴细胞白血病A*31XX、A*6901等位基因频率高于对照组(1.955%、0.071%),差异有统计学意义(P<0.05);A*33XX等位基因频率低于对照组(5.825%),差异有统计意义(P<0.05);(2)在HLA-B等位基因中,急性淋巴细胞白血病B*07XX、*27XX、*38XX、*41XX、*49XX、*59XX等位基因频率高于对照组(2.069%、0.968%、0.702%、0.091%、0.051%、0.061%),差异有统计学意义(P<0.05);其中HLA-B*59XX的相对风险度高(RR=35.156),其它等位基因频率在两组之间无显著性差异。结论:HLA-A*31XX、A*6901;B*07XX、B*27XX、B*38XX、B*41XX、B*49XX、B*59XX等位基因与ALL相关联,有遗传易感作用。HLA-B*59XX等位基因携带者,可能患ALL的风险度增高(RR=35.156)。

脐血HLA-AB分型方法探讨

目的 探讨脐血HLA AB分型方法。方法 分别采用血清学方法和PCR SSP基因定型方法对 1 0 2份脐血HLA A、B位点进行检测。结果 两方法对比分析结果显示血清学近 1 8.6 %不能得出满意结果 ,HLA A、B位点错定率分别为 6 .1 %和 1 0 .8% ,总错误率 1 6 .9%。结论 脐血HLA表达水平低 。

汉族、维吾尔族慢性粒细胞白血病与HLA-A、B、DRB1基因相关性研究

目的:探讨汉族、维吾尔族慢性粒细胞白血病(CML)的人类白细胞抗原(HLA)与患病的相关性。方法:采用聚合酶链式反应技术(PCR)对138名(维吾尔族67名、汉族71名)CML型白血病患者和300名(维吾尔族和汉族各150例)正常健康人做HLA-A、B、DRB1基因检测分型,并比较HLA基因多态性的分布频率及其差异与CML的相关性。结果:维吾尔族CML患者A*69基因频率低于健康人(P<0.05),B*38、DRB1*18基因频率高于健康人(P<0.05);汉族CML患者A*31、B*50、B*62、B*75、DRB1*12基因频率高于健康人(P<0.05)。结论在排除疾病因素和种族差异后,发现维吾尔族CML患者的A*69基因可能为抗CML的保护基因;B*38、DRB1*18可能为CML患病的易感基因;汉族CML患者的A*31、B*50、B*62、B*75、DRB1*12可能为CML患病的易感基因。

人血痕的HLA-A,-B抗原的测定

前言HLA(人类白细胞抗原)是迄今所知最复杂的一种人类遗传标记系统,至1980年确定的抗原已达92种,在法医学亲权鉴定中已广泛应用HLA分型,并成为最有效的工具之一。但在血痕检验方面,尚处于探索阶段。C·H·Rittner等(1974)首先采用淋巴细胞毒抑制试验测定血痕的HLA抗原。

广西壮族人群HLA-A、B、DRB1基因多态性与神经纤维瘤病Ⅰ型相关性研究

目的:探讨广西壮族人群的HLA-A、B、DRB1基因多态性与神经纤维瘤病Ⅰ型的相关性。方法:选取25例广西壮族神经纤维瘤病Ⅰ型患者作为病例组,98例壮族健康个体为对照组,应用直接测序法(sequence-based typing,SBT)比较两组HLA-A、B、DRB1基因多态性有无差异。结果:病例组的A*2601、B*1518、DRB1*0406、DRB1*1032的频率显著高于对照组(P<0.05)。结论:广西壮族神经纤维瘤病Ⅰ型患者HLA-A、B、DRB1的等位基因频率均与广西壮族正常人群不同。

HLA-A,B血清学分型与DNA分型的比较

目的 :比较 136例样本HLA A ,B血清学分型与DNA分型结果。方法 :应用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)技术 ,设计 38对引物 ,检测常见的HLA A ,B基因。结果 :136例样本中有 6 0例血清学分型与DNA分型结果不符合(4 4 1% ) ;HLA A特异性血清学分型错误率在纯合子中分别占 2 3 3%与 9 4% (共 11 2 % ) ,在HLA B中分别占 47 4%与18 4% (共 2 0 6 % ) ;HLA A特异性血清学分型假阴性 6 6 % ,假阳性 2 5 % ,错误指认特异性 2 1% ,HLA B特异性则分别为6 7% ,3 6 % ,10 3%。结论 :HLA A纯合子血清学分型错误率明显高于杂合子 (P <0 0 5 ) ;HLA B纯合子血清学分型错误率也明显高于杂合子 (P <0 0 0 5 ) ;HLA B特异性血清学分型错误率显著高于HLA A特异性 (P <0 0 0 5 )。

黑龙江地区人群HLA-A、B、DRB1高分辨等位基因及单体型多态性研究

目的:研究中国造血干细胞捐献者资料库黑龙江分库无关捐献者HLA-A、B、DRB1高分辨等位基因和单体型频率分布特征。方法:采用PCR-测序分型技术(SBT)对13 670名随机、无血缘关系、健康的中华骨髓库黑龙江分库造血干细胞捐献者进行HLA-A、B、DRB1高分辨基因分型,利用计数法和最大似然性原理方法分别计算HLA-A、B、DRB1等位基因及单体型频率。结果:共观察到286个HLA等位基因,其中频率>0.1的A、B、DRB1座位特异性分别为A*02∶01、A*24∶02、A*11∶01、DR*07∶01、DR*09∶01、DR*15∶01。1 087条A-B单体型中,22条单体型的频率高于0.01,267条单体型呈现显著的正连锁不平衡(ALD>0,HF≥1.09×10-4,χ2>3.84),12条表现为强连锁不平衡(RLD>0.80);1 329条B-DRB1单体型中,19条单体型的频率高于0.01,357条单体型呈现显著的正连锁不平衡,18条表现为强连锁不平衡(RLD>0.80);4 428条A-BDRB1单体型中,1 348条单体型有意义(频率≥1.09×10-4),17条单体型频率高于0.005。结论:获得黑龙江地区人群HLAA、B、DRB1高分辨等位基因频率和单体型分布数据及相关遗传参数,等位基因和单体型的分布特征接近北方汉族人群,但具有其自身分布特征。

黑龙江地区蒙古族HLA-A、B、DRB1等位基因及单体型的研究

目的研究黑龙江地区蒙古族人群HLA-A、B、DRB1基因及单体型频率的分布特征,探讨黑龙江地区蒙古族患者利用中华骨髓库的无关供者资源进行移植的可能性,以及其他地区患者利用本地区中华骨髓库的无关供者资源进行移植的可能性。方法采用序列特异性寡核苷酸探针(PCR-SSOP)技术,对祖居黑龙江地区的157例无血缘关系蒙古族健康供者外周血血样进行HLA-A、B、DRB1基因分型,并翻译成相应的抗原特异性;采用最大似然法(EM)通过Arlequin3.1软件计算HLA基因和单体型频率,并统计相关的遗传参数。结果得到黑龙江地区蒙古族人群的HLA-A、B、DRB1基因及单体型频率及分布情况。黑龙江地区蒙古族人群中,频率>0.1的A、B、DRB1座位特异性分别为A2(0.342 3)、A24(0.153 2)、A11(0.139 6)、DR15(0.139 6)、DR7(0.135 1)、DR12(0.126 1)、DR9(0.117 1)、DR4(0.103 6);频率>0.03的A-B、B-DRB1单体型为A2-B61(0.066 7)、A1-B37(0.045 045)、A2-B48(0.040 541)、A2-B62(0.036 036)、A24-B54(0.031 532)、A2-B46(0.031 013)、B13-DR7(0.031 5)、B58-DR17(0.031 5);频率>0.02的A-B-DRB1单体型为A1-B37-DR10(0.027 0)、A2-B46-DR9(0.022 5)、A2-B48-DR12(0.0225)、A2-B62-DR12(0.022 5)、A30-B13-DR7(0.022 5);频率>0.0134的有意义两座位单体型中,A30-B13、B50-DR7、B58-DR17连锁不平衡强度最高(ALD>0.7)。并将这些数据与其它地区人群HLA数据进行了比较。结论黑龙江地区蒙古族人群具有独特的HLA-A、B、DRB1基因及单体型频率分布特征,其分布与民族和地域关系紧密。

广西造血干细胞骨髓库HLA-A、B、DRB1高分辨等位基因多态性研究

目的研究广西地区人群造血干细胞捐献志愿者的HLA-A、B、DRB1位点在高分辨水平上的等位基因多态性、基因频率及单体型分布特征。方法应用PCR-直接测序法(PCR-SBT)对中国造血干细胞捐献者资料库(CMDP)广西分库,3 431名无个体血缘关系健康供者的HLA-A、B、DRB1等位基因进行高分辨分型。结果共检出HLAA等位基因43个,B等位基因80个和DRB1等位基因42个,HLA-A-B-DRB1单体型检测到1507种。其中频率>0.05的常见等位基因,包括5种HLA-A∶A~*11∶01,A~*24∶02,A~*02∶03,A~*02∶07,A~*33∶03;6种HLA-B∶B~*46∶01,B~*40∶01,B~*15∶02,B~*58∶01,B~*13∶01,B~*38∶02;7种HLA-DRB1∶DRB1~*15∶01,DRB1~*16∶02,DRB1~*09∶01,DRB1~*03∶01,DRB1~*12∶02,DRB1~*14∶54,DRB1~*15∶02。487条HLA-A-B单体型中,79条单体型呈现显著的正连锁不平衡(ALD>0,HF≥1.09×10-4,χ2>3.84),5条表现为强连锁不平衡(RLD>0.40),18条单体型的频率>0.01;597条HLA-B-DRB1单体型中,68条单体型呈现显著的正连锁不平衡(ALD>0,HF≥1.09×10-4,χ2>3.84),8条表现为强连锁不平衡(RLD>0.40),16条单体型的频率高于0.01;1 507条HLA-A-B-DRB1单体型中,统计分析三座位单体型最常见的是A~*33∶03-B~*58∶01-DRB1~*03∶01(0.058 8)。结论广西地区人群HLA-A、B、DRB1位点在高分辨水平上获得等位基因频率、单体型分布数据及相关遗传参数,为今后开展临床造血干细胞移植、中国人群CWD表的制订和骨髓库最适库容的评估等研究及相关疾病研究提供本地区信息。

外阴硬化性苔藓中医辨证分型与HLA-A\B\DRB1基因多态性的相关性研究

目的:观察中国汉族妇女外阴硬化性苔藓患者中医辨证分型与HLA-A\B\DRB1基因多态性的相关性。方法:选取中国汉族妇女外阴硬化性苔藓中属肝肾阴虚型40例、肝经湿热型36例,正常健康中国汉族妇女62人(正常对照组),分别采用PCR-SSP方法进行基因多态性关联检测分析。结果:HLA-B*15、HLA-DRB1*12等位基因在外阴硬化性苔藓各中医证型出现的频率均升高,与正常对照组相比有极显著性差异(P<0.01);等位基因HLA-B*40在肝肾阴虚组患者中呈低表达,与正常对照组比较亦有极显著性差异(P<0.01)。结论:HLA-B*15、HLA-DRB1*12等位基因可能是中国汉族妇女VLS肝肾阴虚型与肝经湿热型的易感基因,HLA-B*40等位基因可能是中国汉族妇女VLS肝肾阴虚型的保护性基因,而与VLS肝经湿热型无相关性。HLA-B*40等位基因在两组中的显著性差异提示中医辨证分型的物质基础和异质性,对VLS的诊断、治疗、预测和中医辨证分型均具有重要意义。