反向PCR-SSOP技术行HLA-AB分型与临床应用

建立快速、准确的DNA分型技术并用于临床移植前HLA AB配型 ,以弥补血清学分型技术的局限性。采用反向聚合酶链反应 序列特异寡核苷酸探针杂交技术 (反向PCR SSOP)进行DNA分型 ,可检出HLA A( 0 10 1- 80 0 1)和B( 0 70 2 1- 82 0 1)等等位基因。结果表明 ,发现利用反向PCR SSOP技术对所有样本分型均获成功 ,无假阳性和假阴性结果出现 ;美国洛杉矶加州大学 (UCLA)质控细胞DNA分型结果与UCLA公布的测序结果一致 ;血清学与基因分型相比 ,血清学结果HLA A错检率 6 .4 %和HLA B错检率为 7.4 %。 2例白血病病人分别有一个HLA抗原血清学方法不能检出。结论提示 ,反向PCR SSOP技术用于HLA分型分辨率高 ,简单快速 ,结果直观、准确 ,分型结果较血清学方法更加精确 ,可适用于临床应用。

应用PCR-SSP进行HLA-AB基因分型及与血清学方法的比较

目的 建立HLAI类基因分型技术并应用于骨髓配型。方法 采用序列特异性聚合酶链反应 (PCR SSP)进行HLA AB基因分型 ,并与HLAI类血清学分型 (微量淋巴细胞毒试验 )进行比较。结果 运用PCR SSP技术共对 2 2例需骨髓移植的病人和 48例供者进行基因分型 ,2例病人确认了HLA完全匹配的亲缘骨髓供者 ,其中 1例已成功进行了骨髓移植 ;基因分型和血清分型比较 ,43例结果完全一致 (6 1.4% ) ,血清分型错误率高达 38.6 % (2 7/ 70 )。结论 PCR SSP分型技术具有准确性高 ,简便快速等优点 。

双色荧光技术检测精子表面HLA-AB单倍型

HLA(人类淋巴细胞抗原)广泛地分布于人体内众多种类有核细胞表面及分泌液中.该系统的遗传多态性日益受到医学,遗传学,特别是法医学的重视。在法医学亲子鉴定中,由于 HLA 系统有极高的非父排除率(其值几接近于其它已知的24个血型系统的累积排除率)。

SSOP基因分型对HLA-AB血清学纯合型结果的校证

目的 建立快速、准确的人类白细胞抗原 (HLA)基因分型技术 ,解决血清学分型局限性。方法 选择HLA -A、B血清学分型纯合型标本 ,应用聚合酶链式反应 -序列特异性寡核苷酸探针杂交 (PCR -SSOP)技术进行基因分型。结果 4 2例HLA -A、4 5例HLA -B血清学纯合型标本 ,经SSOP基因分型 ,其中分别有 3例和 8例为杂合型。结论 SSOP基因分型具有特异性更强、灵敏度更高、结果更为准确可靠等优点 ,是取代传统血清学分型方法较为优越的技术之一。

小月龄胎儿的HLA—AB分型(附一例报告)

人类白细胞抗原(Human Leucocyte Antige，简称HLA)的被发现虽然只有短短三十余年，但对其研究进展异常迅速。这种据认为具有诸多神奇免疫功能的同种抗原，已引起了基础医学、临床医学、预防医学和社会医学等各方面广泛的兴趣和重视。

ICA,PJM逆转肿瘤细胞恶性表型及其机制的研究

目的:研究ICA,PJM逆转肿瘤细胞恶性表型,提高免疫效应细胞识别和杀伤的作用和机制。方法:MTT法检测ICA,PJM对PG细胞增殖的影响以及对CD3AK杀伤敏感性的影响;RT-PCR法检测ICA,PJM对bcl-2和c-fos基因mRNA表达水平的影响;流式细胞术检测细胞表面HLA-A,B,C抗原表达的变化以及c-fos,bcl-2蛋白表达水平的变化。结果:ICA,PJM对PG细胞有明显的增殖抑制作用,可以提高细胞表面HLA-A,B,C分子的表达和c-fos蛋白的表达,抑制bcl-2基因的表达,提高CD3AK细胞对PG细胞的杀伤活性。结论:ICA,PJM可以逆转肿瘤恶性表型,提高免疫效应细胞对肿瘤细胞的识别和杀伤。

复发单疱病毒性角膜炎与HLA抗原

我们对复发单疱病毒性角膜炎(HSK)病人HLA—A、B 抗原进行检测。结果显示HLA—B_5抗原频率有增加的趋势(P<0.05),但校正P 值无显著意义(P>0.05),提示HLA—B_5抗原可能是发生复发HSK的一种易感因素。