严重药物不良反应分子标志物HLA-B*58:01、HLA-B*15:02和HLA-A*31:01在山东汉族人群中的分布

目的调查山东汉族人群HLA-B*58:01、HLA-B*15:02和HLA-A*31:01等位基因携带率和等位基因频率,指导患者临床用药,并评估进行临床基因筛查的必要性。方法调查山东省骨髓库具有HLA-A、HLA-B位点高分辨数据的汉族人群样本,统计HLA-B*58:01、HLA-B*15:02和HLA-A*31:01等位基因携带率和等位基因频率,并按照志愿者籍贯进行分组,归为14个地市。结果山东汉族人群中,HLA-B*58:01、HLA-B*15:02、HLA-A*31:01等位基因携带率分别为8.65%、3.03%和7.3%。日照、东营、临沂地区HLA-B*58:01等位基因携带率达10%以上;枣庄、滨州和济南地区HLA-A*31:01等位基因携带率达8%以上;聊城、济南、淄博地区HLA-B*15:02等位基因携带率分别为3.96%、3.84%和3.77%。结论山东地区汉族人群患者在使用别嘌醇和卡马西平药物之前进行HLA-B*58:01和HLA-A*31:01基因筛查是有必要的,HLA-B*15:02等位基因携带率虽较低,但有条件的地区可以在开展用药前进行基因筛查,以减少严重药物不良反应的发生。

HLA-B^(*)15∶02基因型的快速鉴别方法建立及临床应用

目的建立rs144012689位点的焦磷酸测序方法,从多个角度评估其预测芳香族类抗癫痫药物严重皮肤不良反应的性能。方法筛选最优的聚合酶链反应(PCR)扩增体系,评估该研究建立的rs144012689位点焦磷酸测序方法的检测限、灵敏度、特异度,并分析其与Sanger测序、商品化试剂盒的一致性。收集该院2019-2021年确诊为史蒂文斯-约翰逊综合征(SJS)的患者,评价该方法对确诊病例的检出性能。结果该方法检测rs144012689位点筛选出人类白细胞抗原(HLA)-B 15∶02基因型的灵敏度和特异度均为100%,检测限为0.4 ng/μL基因组DNA。60份标本焦磷酸测序结果均与Sanger测序及商品化试剂盒检测结果一致。2份SJS确诊患者标本的焦磷酸测序和HLA-B高分辨分型结果均提示携带HLA-B 15∶02基因型。结论该研究建立的方法具备快速、检测限低、灵敏度高和特异度高的优点,可用于芳香族类抗癫痫药物不良反应高危基因HLA-B 15∶02的筛查。

人白细胞抗原B~*1502基因型和年龄对抽搐或癫痫患儿血同型半胱氨酸浓度的影响

目的探讨具有人白细胞抗原B*1502(HLA-B*15:02)不同基因型和年龄对抽搐或癫痫患儿血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度的影响,研究患儿血浆Hcy浓度的影响因素,以减少血浆Hcy增高所致的潜在致病风险。方法选取2015年10月至2016年6月间检测HLA-B*15:02基因型的抽搐或癫痫患儿15例,比较不同基因型患儿的血浆Hcy浓度;并将后者对应患儿年龄作线性回归分析。结果血浆Hcy平均浓度在未携带HLA-B*15:02基因患儿中为(8.38±4.23)μmol/L,在携带HLA-B*15:02基因患儿中为(13.03±0.97)μmol/L,携带者明显高于未携带者。随着患儿年龄增加,血浆Hcy浓度有增高趋势(r2=0.29,P<0.05)。结论 HLA-B*15:02基因携带者和较大年龄抽搐或癫痫患儿有发生血Hcy增高的倾向,增加患儿潜在致病风险。HLA-B*15:02基因型和年龄可预测抽搐患儿血浆Hcy浓度变化倾向。

脐血HLA-B15组血清学与DNA定型方法的比较研究

目的 探讨血清学方法对脐血HLA B1 5特异性组分型存在的误差 ,及应用PCR SSP方法分型的可行性。方法 分别采用微量淋巴细胞毒实验和PCR SSP方法对 1 37份脐血做分型对比研究。结果 DNA分型成功率 1 0 0 % ,特异性、敏感性好 ,血清学对B1 5组分型总误差 1 5 % ,主要发生在B62、B75、B1 51 1 / 1 50 8/ 4

广东汉族人群HLA-B~* 15等位基因分布

目的了解广东献血者汉族人群HLA-B*15等位基因的多态性。方法从1 691名广东汉族献血者中采用中/低分辨分型获得带有HLA-B*15基因型466例样本,进一步应用PCR-SBT技术进行测序分型,获得广东汉族人群B*15高分辨分型结果。应用PyPop软件计算HLA-B*15各等位基因频率,同时与其他人群资料进行比较。结果共检测到16种已知HLA-B*15等位基因,其中以B*15∶02(64.75%)最常见,其次为B*15∶01(13.26%),B*15∶25(4.554%),B*15∶27(4.158%),B*15∶12(3.960%),这5种等位基因占B*15等位基因家族的90.69%。在B*15等位基因家族中,表达B75抗原的等位基因B*15∶02、B*15∶11和B*15∶21共占67.92%,但表达B62抗原的B*15等位基因多态性最强,共检出6种等位基因。结论广东汉族人群中HLA-B*15等位基因表现出高度的多态性及其特有的分布特征。

湖北骨髓库汉族人群HLA-B^＊ 15多态性分析

目的检测湖北骨髓库汉族捐献者HLA-B*15高分辨基因型,了解其基因频率和基因多态性分布特点。方法采用PCR-SBT的分型技术,对3 325名汉族捐献者进行HLA-B高分辨基因分型;基于等位基因频率,采用Hierarchical Clustering算法对各人群进行聚类分析。结果 3 325例分型结果中,HLA-B分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。共检出16种HLA-B*15等位基因和8种血清学特异性,基因频率排在前5位的是:B*15∶01(0.047 67),B*15∶02(0.045 56),B*15∶11(0.016 09),B*15∶18(0.009 92),B*15∶27(0.009 32)。在B*15等位基因家族中,表达B62抗原的B*15等位基因多态性最强,共检出7种等位基因,共占47.15%;表达B75抗原的等位基因B*1502、B*1511和B*1521共占41.85%。我国南方和北方汉族人群在基因频率上存在显著的差异。如等位基因B*15∶02的频率在北方和南方人群中分别为0.017 8和0.096 69。尽管湖北汉族与我国南方汉族聚为一族,但在基因频率上表现出从北到南的过渡形态。结论在湖北骨髓库汉族捐献者中HLA-B*15等位基因水平表现出丰富的多态性和特有的分布特征;湖北汉族具有典型的我国南北人群交流的特征。

Bna.C02SWEET15通过光周期途径正向调控油菜开花时间

开花时间是作物的重要农艺指标,关系着作物的生育周期和产量。糖转运体作为植物重要的碳水化合物运输载体,作用于油菜开花时间的研究鲜有报道。本研究在油菜FOX-Hunting文库中鉴定了一个与油菜开花相关的蔗糖转运蛋白Bna.C02SWEET15,通过组织表达和亚细胞定位分析,转基因和突变体表型观察,开花关键基因表达水平检测等解析其生物学功能与调控机制。Bna.C02SWEET15在油菜各组织部位均能够表达,在花后30d种子中最显著。Bna.C02SWEET15定位于细胞膜,启动子活性主要在花药和花后30d种子中。在拟南芥中过表达Bna.C02SWEET15使植株开花提前,利于植株开花的光周期关键基因CO、FT、LFY表达明显上升,负调控基因FLC表达量降低。拟南芥突变体atsweet15a和RNAi-Bna.C02SWEET15转基因油菜均为晚花表型。推测Bna.C02SWEET15能够通过光周期途径正向调控油菜开花时间影响油菜的生育周期。研究结果对理解糖转运体在作物中的调控作用,为油菜高产育种提供了基因资源,奠定了理论基础。

miR-15b靶向ABCC5对K562/A02细胞增殖、凋亡及阿霉素耐药性的影响

目的探讨微RNA(miRNA/miR)-15b对K562/A02细胞增殖、凋亡及阿霉素耐药性的影响及其机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测K562和K562/A02细胞中miR-15b表达情况;将体外培养的K562/A02细胞随机分为对照组(正常培养)、miRNA对照(miR-NC)组(转染模拟物阴性对照)和miR-15b组(转染miR-15b模拟物),实时荧光定量PCR检测K562/A02细胞中miR-15b和ATP结合盒转运蛋白C5(ABCC5)mRNA表达,噻唑蓝法检测K562/A02细胞增殖和阿霉素耐药性,流式细胞仪检测K562/A02细胞凋亡情况,双荧光素酶报告基因实验检测miR-15b与ABCC5的靶向关系,免疫印迹法检测K562/A02细胞中ABCC5蛋白表达情况。结果与K562细胞比较,K562/A02细胞中miR-15b表达水平明显降低[(0.25±0.03)比(0.97±0.05)](P<0.01)。miR-15b组K562/A02细胞miR-15b表达水平及24、48、72 h的细胞增殖抑制率明显高于对照组和miR-NC组(P<0.05),而miR-NC组与对照组K562/A02细胞中miR-15b表达水平以及24、48、72 h的K562/A02细胞增殖抑制率比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-15b组K562/A02细胞凋亡率明显高于对照组和miR-NC组[(23.05±2.85)%比(13.64±2.12)%、(11.58±1.48)%](P<0.05),而miR-NC组与对照组K562/A02细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-15b组K562/A02细胞增殖抑制率明显高于对照组及miR-NC组(P<0.05),而miR-NC组与对照组K562/A02细胞增殖抑制率比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-NC组与对照组K562/A02细胞对阿霉素的IC 50值比较差异无统计学意义(P>0.05);miR-15b组K562/A02细胞对阿霉素的IC 50值明显低于对照组和miR-NC组(P<0.05),其相对于对照组和miR-NC组的逆转倍数分别为2.70倍和2.88倍。各组细胞荧光素酶活性比较差异有统计学意义(P<0.01),miR-15b+ABCC5-WT组细胞荧光素酶活性明显低于miR-NC+ABCC5-WT组(P<0.05);miR-NC+ABCC5-WT组与miR-NC+ABCC5-MUT组和miR-15b+ABCC5-MUT组比较差异无统计学意义(P>0.05);且miR-NC+ABCC5-MUT组与miR-15b+ABCC5-MUT组比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组细胞中ABCC5蛋白和mRNA表达水平比较差异有统计学意义(P<0.01),miR-NC组与对照组细胞中ABCC5蛋白和mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);miR-15b组细胞中ABCC5蛋白和mRNA表达水平均明显低于对照组及miR-NC组(P<0.05)。结论miR-15b可能通过抑制ABCC5表达抑制K562/A02细胞增殖,促进其凋亡并降低阿霉素耐药。

0Cr15Ni7Mo2Al不锈钢铣削加工刀具磨损研究

对0Cr15Ni7Mo2Al不锈钢在铣削加工中切削速度与刀具耐用度和切削路程长度的关系及刀具磨损情况进行了研究。用小型工具显微镜观测了刀具磨损形态,并对刀具磨损机理进行分析。结果表明:铣削0Cr15Ni7Mo2Al不锈钢时,不宜采用较低切削速度和较高切削速度,最佳切削速度在38m/min左右,而崩刃和粘结磨损是铣削0Cr15Ni7Mo2Al不锈钢时刀具磨损的主要形态。

姜黄素衍生物C15对白血病K562/A02细胞多药耐药的逆转作用

目的:探讨姜黄素衍生物C15对人白血病K562/A02细胞多药耐药(multidrug resistance,MOR)的逆转作用及其作用机制。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;流式细胞术检测P-糖蛋白(P-gp)外排泵功能和细胞周期;免疫印迹法检测蛋白表达;P-gp-GloTM Assay System试剂盒检测P-gp ATP水解酶(ATPase)活性。结果:C15对K562/A02细胞半数抑制浓度(IC50)大于50μmol·L-1。对K562/A02细胞无明显细胞毒的浓度为2.5,5.0,10.0μmol·L-1的C15逆转对K562/A02细胞对阿霉素(ADR)耐药的倍数分别为2.60,5.39,11.39,对长春新碱(vincristine,VCR)耐药的倍数分别为4.50,18.07,124.35,但是对非P-gp底物的化疗药物顺铂(cisplatin,CIS)和敏感细胞K562基本无逆转效果。2.5,5.0,10.0μmol·L-1 C15可以增加耐药细胞K562/A02胞内罗丹明123(Rh-123)的蓄积量分别为1.93,2.30,2.47倍。C15增加阿霉素(adriamycin,ADR)在K562/A02细胞中的蓄积水平,降低P-gp介导的Rh-123外排速率。2.5,10.0μmol·L-1 C15与300 nmol·L-1 VCR联合作用后,可使K562/A02细胞的G2/M期比例从9.36%增加到67.57%和69.38%。C15对P-gp蛋白和ATPase的活性没有抑制作用。结论:C15可能是P-gp的非衣物型抑制剂,且具有逆转K562/A02细胞MDR的作用,该作用与其抑制细胞P-gp的外排泵功能有关。

流动注射——分光光度法快速测定儿童发锌含量

介绍流动注射（ＦＩＡ）—分光光度法快速测定微量锌的方法，并研究了ＦＩＡ—分光光度法测定发锌含量的实验条件，实际测定了１６２名２～６岁学龄前男女儿童头发中锌含量，平均回收率为９９．３％±０．６３，精密度ＲＳＤ＝０．４１％。

携带HLA-B＊13：02基因引发卡马西平药物不良反应1例

卡马西平（carbamazepine，CBZ）是常用的抗癫痫药物之一，主要用于治疗部分性发作和部分性发作继发全身强直-阵挛发作癫痫。在我们临床工作中发现1例卡马西平过敏患者，现对其基因表达及临床表现进行报道如下。

新等位基因HLA-B＊37：04．02的序列分析

目的确定1名中国人的HLA新等位基因。方法应用聚合酶链反应一序列特异性寡核苷酸探针（polymerase chain reaction-sequence specific oligonucleotide probes，PCR-SSOP）基因分型技术和基于测序的分型方法（sequencing-based typing，SBT）对1名中华骨髓库辽宁分库志愿捐献者的HLA基因进行分型，通过软件分析该基因序列及与最相近等位基因序列的差异。结果PCR-SSOP结果显示，该个体HLAB基因座反应格局出现异常；测序结果表明其B基因座第3外显子序列与所有已知HLA-B等位基因序列均不一致，与序列最相近的等位基因B＊37：04：01在所检测的第2和3外显子中的差异只是在第3外显子发生了nt618G〉A1个核苷酸替代，导致相应的第206位密码子由GcG〉GCA，但第206位编码的丙氨酸并未改变。结论该基因为HLAB新等位基因，被世界卫生组织HLA因子专用术语命名委员会正式命名为HLA-B＊37：04：02（GU391034）。

卡马西平药物过敏研究进展

卡马西平是目前引发药物不良反应中较常见的一种。其引发的药物过敏反应包括药物超敏综合征中的一系列症状;严重时会导致致死率高的SJS/TEN疾病。全基因组研究表明汉族人群中卡马西平过敏与HLA-B*15:02高度相关,而在欧洲人群中则是与HLA-DPB1*13:01相关联。除HLA外,多项研究也表明卡马西平过敏发病时也常伴随着病人体内HHV-6病毒的再激活。本文从上述这些方向对卡马西平药物过敏的研究进展进行详细阐述;并对小分子药物致敏的分子机制的多种理论进行说明。

鲁迅小说的悲剧艺术赏析与思考

以鲁迅小说为对象,浅谈鲁迅的悲剧观,认识鲁迅悲剧作品内容的美学特征;浅析鲁迅小说悲剧艺术的创造性开拓,说明鲁迅对于悲剧艺术的独特贡献;由鲁迅小说悲剧的学习,引发出应给予青少年悲剧作品阅读的补充等思考.

复杂路况下的多姿态机器人行走策略

本文提出一种切换姿态的策略,并依据该策略设计可切换姿态的移动机器人系统。首先,对道路状况进行检测,确定相应姿态和最终目标角度,然后用恒角加速度变化率的公式更新子目标角度,并将计算得到的子目标角度送入直立环控制器控制,实现机器人在复杂路况下的快速姿态切换。研究结果表明,本文提出的姿态切换策略可以稳定切换姿态,且在不超调的前提下,相对于没采用恒角加速度变化率,采用恒角加速度变化率的切换姿态策略平均速度提高了63.8%;同时,验证了本文提出的避障策略的可行性和多姿态机器人存在的潜在价值。

基于单片机的出租车计价器

本款出租车计价器以IAP15F2K61S2单片机为核心器件,利用实验用的小电机转动模拟出租车车轮转动。在路程和速度的算法上,由霍尔传感器检测车轮的转动,从而产生电平脉冲,对此脉冲进行计数,实现计程,单片机根据脉冲个数计算出总里程和价格。