HLA-DR位点基因分型在肾移植配型中的应用研究

应用聚合酶链式反应序列特异性引物（ＰＣＲＳＳＰ）技术，对３３１例肾移植供受者进行ＨＬＡＤＲ位点基因分型，其中１０９例同时与血清学分型进行对比研究。显示血清学方法误差率为２９．７％；而ＰＣＲＳＳＰ法的ＤＲ位点分型，所有特异性均能显示，无假阴性及假阳性。随机抽取的２０例样本进行重复实验，重复性为１００％。分型结果经ＩＮＮＯＬＩＰＡＰＣＲ反向ＳＳＯ实验确证，符合率为１００％。此方法耗时４ｈ，较血清学方法操作简便、快速、结果准确可靠，适合于临床器官移植ＨＬＡ分型。

HLA-DR位点的PCR-SSP基因分型

目的 :探讨适用于肾移值供体HLA -DR的快速基因分型方法。方法 :自行设计合成引物建立顺序特异性引物聚合酶链反应技术 ,并对 1 1 0例肾移植供体作HLA -DR基因分型。结果 :DNA提取方法可以满足PCR -SSP分型方法对DNA模板的要求。全部操作耗时 1 2 0min ,1 1 0例标本均分型成功。基因频率范围在 0 .0 0 4 5-0 .1 2 2 7之间 ,以DR4、DR1 5和DR9占多数。结论 :PCR -SSP法作HLA -DR分型具有准确、简便、快速等优点 。

HLA-DR位点的基因芯片分型与临床应用

目的 :建立一种新型的HLA DR位点的基因分型方法 ,为HLA DR的基因分型提供一个较新的思路。方法 :利用基因芯片技术 ,根据HLA不同基因亚型的独特序列设计探针 ,制成分型芯片 ;待检测样品经PCR反应标记上荧光之后 ,与芯片进行杂交 ,根据杂交产生的荧光信号值分析确定样品DR位点的基因亚型。将这一方法应用于 70份标准DNA和 2 0 0份医院移植供受者的HLA DR基因分型并将部分样品进行基因测序。结果 :检测结果表明HLA DR基因分型芯片可准确分辨出DR位点等位基因 30大类 ,耗时 3h。结论 :基因芯片用于HLA DR的基因分型 ,分辨率高、特异性强、重复性好、操作简便 ,对比常规的PCR SSP和PCR SSO方法 ,HLA DR基因芯片方法更为直观 ,并具有集成化优势 ,可以在一张芯片上同时检测HLAI类的A、B位点 ,并实现一张芯片多人份 ,适合于临床应用和骨髓库、脐血库的建立。

中国人群1型糖尿病人类白细胞抗原-DR基因多态性的Meta分析

目的评价中国人群人类白细胞抗原(HLA)-DR基因多态性与T1DM的关联性。方法在T1DM病例组与健康对照组间比较HLA-DR基因位点的比值比(OR)。联合检索中华医学会系列期刊、CNKI数据库、中国科技期刊数据库和Pubmed获得全部相关文献,剔除不符合纳入标准的文献。应用Meta分析软件包REVMAN 5.0统计相关基因位点的OR值,同时评估发表偏倚。结果中国人群中,DR3、DR4、DRB1*0301和DRB1*0405是易感性基因(P均<0.05),总OR值分别为4.42、2.18、6.04和3.21。DR2、DR6、DR15和DRB1*1101是保护性基因(P<0.05),总OR值分别为0.31、0.50、0.51和0.35。危险基因型为DR3/DR4和DR3/DR9(P<0.05),总OR值分别为25.36和5.21。结论在中国人群中,一些与T1DM关联的HLA-DR与国外对其他国家人群的研究报道不尽相同。DR3、DR4、DRB1*0301、DRB1*0405、DR3/DR4和DR3/DR9在多个种族人群中均表现为易感性,与本研究一致;而DR2的保护性效应也与本研究结果较为一致,其余则差异有统计学意义。