云南傣族、汉族HLA-G基因14bp插入/缺失多态性研究

14bp插入/缺失多态性是指存在于HLA-G基因第8外显子3′非翻译区(3′UTR)的一个插入/缺失多态,因其能影响HLA-GmRNA的稳定性,并进一步影响HLA-G蛋白的翻译而受到广泛关注。文章采用PCR和电泳技术对云南傣族和汉族两个人群进行了HLA-G基因14bp插入/缺失多态性的检测分析,结果显示傣族和汉族人群+14bp等位基因频率分别为31.97%和40.87%,+14bp/+14bp基因型频率分别为8.20%和17.31%,+14bp/-14bp基因型频率分别为47.54%和47.11%。与国内外已报道的其他人群的数据比较表明:云南汉族群体中HLA-G基因14bp插入/缺失的分布与其他群体相似;傣族则有自己独特的基因型和等位基因分布特点,推测其可能受到了遗传漂变的作用,但不排除自然选择作用的影响。

中国4个民族群体HLA-G基因14bp插入/缺失多态的分布特征及其HLA-A位点的相关性

近年来,位于HLA-G基因第8外显子3′UTR的一个14 bp插入/缺失多态位点与复发性流产、自身免疫性疾病和肝癌等疾病相关而引起广泛关注。本实验室前期的研究表明,不同群体的HLA-G基因14 bp插入/缺失频率具有群体语系分布特点。文章对土族、裕固族、傈僳族和怒族进行HLA-G基因14 bp插入/缺失的基因分型,结合HLA-A基因分型数据,分析土族、裕固族、傈僳族和怒族4个民族群体中14 bp插入/缺失与HLA-A等位基因的关系。研究结果显示:(1)尽管HLA-G基因14 bp插入频率在不同群体中的分布具有各自群体的特点,但遵循着按语系及语族分布的规律,除汉藏语系汉语族与阿尔泰语系蒙古语族无差异外,语族间差异明显;(2)不同群体中,14 bp插入与不同的HLA-A等位基因相关联。

海南地区汉、黎民族父源性HLA-G基因14 bp缺失多态性及与重度PE的关系

目的:探讨父源性HLA-G基因第8外显子14 bp缺失多态性与海南汉、黎族重度子痫前期(PE)的相关性及种族间差异。方法:采用PCR和直接测序法对对照组(100对汉族、80对黎族正常妊娠者父儿)、PE组(84对汉族、74对黎族重度子痫患者父儿)HLA-G基因第8外显子14 bp多态性进行分析,比较组间基因型和等位基因频率差异,通过父/儿基因型配伍,比较汉、黎族重度PE组和对照组间基因型配伍频率分布差异。结果:汉族父代、子代HLA-G 14 bp插入/缺失的等位基因及基因型分布在重度PE组和正常妊娠组差异无统计学意义(P>0.05);黎族重度PE组新生儿HLA-G−14 bp频率和−14 bp/−14 bp基因型频率显著低于黎族正常对照组(P=0.003,P=0.001);黎族重度PE组父(−14 bp/−14 bp)/儿(−14 bp/−14 bp)基因型配伍频率显著低于对照组(P=0.003)。结论:HLA-G基因14 bp缺失多态性与汉族重度PE无显著相关性,黎族父(−14 bp/−14 bp)/儿(−14 bp/−14 bp)基因型配伍可能降低母亲发生重度PE的风险。

HLA-G基因在妊娠期高血压疾病中的研究进展

妊娠期高血压疾病(HDCP)是妊娠期特有的疾病,其病因复杂,普遍认为其与遗传易感性相关。HLA-G基因复合体是人体内最复杂的遗传多态系统。近年研究证实,HLA-G基因与HDCP密切相关。现就HLA-G基因在HDCP中的研究进展做一综述。

贵州省3个少数民族HLA-G基因14bp插入/缺失的多态性研究

目的:了解贵州省3个少数民族(布依族、水族、苗族)群体人类白细胞抗原-G(HLA-G)基因14 bp插入/缺失多态性的分布规律及其与遗传背景之间的关系。方法:采用PCR扩增、电泳及测序的方法对来自贵州地区的布依族、水族、苗族共344例健康个体DNA进行HLA-G基因14 bp插入/缺失多态性检测,并与文献报道的仡佬族、壮族等13个民族群体的HLA-G基因14 bp插入/缺失多态性分布数据进行对比。结果:布依族、水族和苗族人群的+14 bp等位基因频率分别为23.7%、26.0%和38.1%,+14 bp/+14 bp基因型频率分别为9.40%、10.4%和15.9%,14 bp插入频率比较示布依族和苗族差异有统计学意义(χ2=11.345,P=0.001),苗族与水族差异有统计学意义(χ2=6.125,P=0.009)而布依族和水族间比较差异无统计学意义(P>0.017);与其他人群数据比较,苗族群体的14 bp插入/缺失分布与其他人群相似,而作为壮侗语族的布依族、水族则有自己独特的14 bp插入/缺失分布规律。结论:布依族、水族人群的14 bp插入/缺失分布相似,但是与苗族人群的分布存在一定的差异。

HLA-G基因非编码区多态性与重度子痫前期的相关性

目的:探讨HLA-G非翻译区多态性与重度子痫前期的发病有无相关性。方法:对孕晚期重度子痫前期患者、正常足月妊娠妇女,提取全血基因组DNA。利用PCR方法检测HLA-G3’UTR 14bp基因多态性,比较两组间等位基因及基因型的频率分布;利用巢氏PCR方法扩增HLA-G 5’URR上游调控区,并进行基因测序,比较两组间等位基因及基因型的频率分布。结果:①重度子痫前期组HLA-G 14bp缺失多态性的等位基因频率、基因型频率分布与正常妊娠组比较均无统计学差异(P>0.05);②HLA-G5’URR-716和-964位点基因型和等位基因型频率分布在重度子痫前期组和正常妊娠组间存在统计学差异(P<0.05);③HLA-G 5’URR-1140位点基因型和3’UTR 14bp多态性结合,在重度子痫前期组和正常妊娠组间存在统计学差异(P<0.05)。结论:①HLA-G 14bp缺失多态性的存在可减低母亲重度子痫前期的发病风险;②HLA-G 5’URR部分SNP可能与重度子痫前期的易感性相关;③HLA-G5’URR-1140位点基因型和HLA-G3’UTR 14bp多态性的结合可能与重度子痫前期的易感性有关。

选择压力对五个少数民族群体HLA-G基因3’非翻译区多态性的影响

目的探讨选择压力与遗传背景对中国5个南北方少数民族群体HLA-G基因3＇非翻译区（untranslatedregions，UTR）多态性的影响。方法采用PCR扩增及DNA测序的方法，对中国3个南方少数民族（仡佬族、水族、傣族）和2个北方少数民族（柯尔克孜族及蒙古族）共432人进行HLA-G基因第8外显子3’UTR区域多态性位点的基因分型，并选择10个中性短串联重复（shorttandemrepeats，STR）多态性位点进行基因分型。结果在蒙古族、柯尔克孜族和仡佬族的HLA-G基因3’UTR区中检测到8个多态性位点，在傣族和水族中检测到7个多态性位点。3’UTR区域的多态性位点在3个南方少数民族群体的观察杂合度大多高于期望杂合度，在北方的两个少数民族群体中，二者的关系是相反的。STR的期望杂合度和观察杂合度的关系均为随机。单倍型Ewens—Watterson中性检测在南方的傣族和水族中有统计学意义。3个南方群体HLA-G基因3’UTR区域多态性构建基因树与群体STR系统发育树有所偏差。结论居住于中国南方的傣族和水族的HLA-G基因3，UTR区域可能受到选择作用，这种选择作用可能由与病原选择所驱动的。

HLA-G基因3'UTR多态性与类风湿关节炎发病相关性的Meta分析

本研究选用Meta分析的方法对HLA-G基因3'UTR的2个多态位点14 bp I/D和+3142G/C多态性与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)发病的相关性进行系统评价,以探究RA发病遗传背景的循证医学证据。全面检索PubMed、中国知网、万方数据库中HLA-G基因14 bp I/D和+3142G/C与RA关系的病例对照研究,最终纳入符合要求的文献7篇,研究数据包括病例组1411例、对照组1526例。使用RevMan 5.3软件对筛选出的符合要求的文献进行Meta分析。结果显示,HLA-G基因14 bp I/D与RA发病不相关,+3142G/C隐性纯合突变与RA发病相关(GG vs GC+CC:OR=1.34,95%CI 1.09~1.65,P=0.006)。根据人种进行亚组分析,发现HLA-G基因14 bp I/D与南美洲人群、高加索人群和东亚人群的RA发病均不相关,+3142G/C隐性纯合突变与高加索人群的RA发病相关(GG vs GC+CC:OR=1.35,95%CI 1.06~1.71,P=0.01)。该研究提示,HLA-G基因+3142G/C隐性纯合突变可能是RA发病的危险因素,且与人种有关;HLA-G基因14 bp I/D尚不能认为与RA发病有关联。

HLA-G基因3′UTR区14bp的多态性与上海地区中国人群SLE的关联性

非经典HLAⅠ类分子HLA-G基因位于SLE易感区域6p21.1-6q15内,为研究其3′端非翻译区(3′UTR)一段14 bp的缺失/插入多态性与SLE易感性的关联,我们抽提了受试者外周血基因组DNA,并通过双脱氧链终止测序法对286例中国人群正常人及486例SLE患者进行该多态性位点的分型,然后对该多态性位点的基因型及等位基因的分布频率进行病例-对照分析。发现总的SLE患者组及SLE各患者组的基因型及等位基因频率分布与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。因此,提示HLA-G可能为中国人群SLE的易感基因。

HLA-G研究进展

ＨＬＡ－Ｇ基因属于非经典ＨＬＡ－Ｉ类基因，具有低多态性和限制性表达的特点，其功能与母胎免疫耐受有关。本文介绍了近年来关于ＨＬＡ－Ｇ基因研究的进展。

人白细胞抗原-G基因多态性与脑胶质瘤易感性之间的关系

目的:探讨人白细胞抗原-G(HLA-G)基因多态性和血清中可溶性HLA-G(sHLA-G)水平与脑胶质瘤易感性之间的关系。方法:选择264例脑胶质瘤患者(脑胶质瘤组)和264例健康志愿者(对照组),采用测序检测HLA-G的等位基因,采用ELISA测定血清中sHLA-G水平。结果:G:010101、G:010102、G:010404和G:010401与脑胶质瘤的风险转变和疾病分级相关;多因素回归分析表明年龄、性别、吸烟状态和脑胶质瘤切除程度均非Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤风险因素;G:010101(OR=2.06,P=0.009),G:010102(OR=1.24,P=0.012),G:010404(OR=1.88,P=0.035),G:010401(OR=1.88,P=0.017)与Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤发生风险显著相关;脑胶质瘤患者血清中s HLA-G水平显著高于对照组(P<0.001);sHLA-G水平≥32.0 U/mL的神经胶质瘤患者的生存时间短于sHLA-G水平<32.0 U/mL的患者(χ^2=9.088,P=0.033)。结论:HLA-G等位基因突变是脑胶质瘤的独立危险因素,血清中s HLA-G水平也许可作为评估脑胶质瘤患者预后的生物标志物。

新生猪胰岛细胞的HLA-G_1基因转染

目的探讨HLA-G1基因转染新生猪胰岛细胞的可行性,检测其表达和功能状况。方法体外分离纯化新生猪胰岛细胞,脂质体载体转染HLA-G1基因。免疫荧光法检测HLA-G1基因在胰岛细胞上的表达状况;51Cr释放实验分析其对人NK细胞细胞毒的抑制作用。结果新生猪胰岛细胞HLA-G1基因表达率大约为50%,体外转染24-48 h达高峰;混合淋巴细胞培养(胰岛细胞+ NK细胞)后,空质粒转染组的胰岛细胞溶解率为71.57%,而转染组胰岛细胞溶解率为53.5%。结论利用脂质体Genejammer转染体外培养的新生猪胰岛细胞,可以获得靶基因的瞬时高效表达; HLA-G1基因转染可以有效抑制NK细胞对异种胰岛的细胞毒作用。

HLA-G 与慢性炎症性疾病的研究进展

非经典人类白细胞抗原G（ human leukocyte an-tigen-G， HLA-G）是机体内重要的免疫耐受分子，经选择性剪切可产生4种膜结合型 HLA-G 蛋白（ mHLA-G，HLA-G1～G4）和3种可溶型HLA-G蛋白（ sHLA-G， HLA-G5～G7）。相对于 HLAⅠ类分子，HLA-G具有有限的基因多态性，且存在多个位点和sHLA-G表达水平显著相关，其中研究最多的是14 bp插入／缺失等位基因多态性（14 bp＋／-多态性）。当HLA-G基因为14 bp插入纯合子时，外显子8起始区的一个92 bp片段将被剪切，从而有助于HLA-G mRNA转录水平更稳定。但HLA-G转录水平与蛋白表达存在不均一性，中国汉族人种基因型为14 bp＋／＋人群外周血 sHLA-G 较14 bp＋／-、14 bp-／-人群外周血sHLA-G分泌水平显著降低，进一步提示HLA-G 14 bp＋／-多态性在sHLA-G分泌过程中发挥了至关重要的作用［1］。

HLA-G1抑制人自然杀伤细胞杀伤猪血管内皮细胞的研究

目的 研究HLA G1基因抑制人自然杀伤细胞 (NK细胞 )对猪血管内皮细胞杀伤的作用。方法 利用脂质体介导的基因转染技术将 pcDNA3 HLA G1转入原代培养的猪血管内皮细胞 ,以间接免疫荧光技术在蛋白质水平上检测HLA G1分子在猪内皮细胞上的表达 ;以NK细胞系(NK92 )和外周血单个核细胞为效应细胞 ,用四甲基偶氮唑盐 (MTT)法检测转染细胞对NK细胞杀伤活性的抑制效应。结果 与未转染HLA G1的对照组相比 ,NK92和外周血单个核细胞对转有HLA G1的猪血管内皮细胞的杀伤效率均有明显降低 (P <0 .0 5 )。结论 HLA G1分子可以明显抑制人NK细胞对猪血管内皮细胞的杀伤。

人类白细胞抗原G与移植免疫耐受

人类白细胞抗原-G（human leucocyte antigen G,HLA-G）是一种非经典的主要组织相容性复合体Ⅰ类分子（major histocompatibility complex,MHC-Ⅰ）.近年来,对HLA-G基因与分子的研究日趋增多.自1989年Geraghty首次报道克隆成功HLA-G[1],1998年法国圣路易斯医院免疫学研究所举办了第1届HLA-G专题国际会议,