罕见病研究:HLCS基因突变致全羧化酶合成酶缺乏症

男性患儿,16月龄,因发现头面部红斑15个月,外阴红斑10个月,加重5 d就诊。患儿新生儿期即出现口周、眼周红斑,婴儿期出现颈部、腋下、外阴三角区等腔口和皱褶部位的红斑、丘疹,可见脱屑和糜烂。血气分析提示代谢性酸中毒,血遗传代谢病氨基酸和酰基肉碱谱分析、尿液有机酸分析结果均提示多种羧化酶缺乏症,基因检测结果提示HLCS基因存在c.1522C>T(p.R508W)纯合突变。最终该患儿诊断为全羧化酶合成酶缺乏症,口服生物素治疗取得良好的临床疗效。该文总结了1例全羧化酶合成酶缺乏症患儿的临床资料,对其病因、诊断、治疗进行归纳总结,为临床医生诊断该类罕见疾病提供思路。

杜洛克猪HLCS基因组织表达分析及其编码区多态性与剩余采食量的关联

旨在探究羧化全酶合成酶基因(holocarboxylase synthetase,HLCS)在杜洛克猪各组织中的表达情况及其编码区多态性与剩余采食量(residual feed intake,RFI)之间的关系。本研究利用荧光定量PCR检测HLCS基因在杜洛克猪8种组织中的相对表达量;利用PCR和测序在RFI高、低组个体中扩增HLCS基因的编码区用以寻找多态位点,并对获得的位点在杜洛克群体中分型,进而分析多态位点与RFI的关联性。结果表明,HLCS在脂肪组织中表达量最高,肝次之,在心和肌肉中痕量表达。在杜洛克个体中共发现5个多态位点,其中c.1408G>C和c.1976A>G为错义突变位点。在杜洛克群体中,c.1408G>C与RFI关联不显著(P>0.05);c.1976A>G与RFI显著关联(P<0.05),GG基因型个体的RFI比AA基因型个体低0.063 4kg。这些结果表明,HLCS与RFI密切相关,c.1976A>G可作为猪RFI性状选育的潜在分子标记,为进一步开展HLCS基因影响猪剩余采食量的功能鉴定奠定了研究基础。

杜洛克猪HLCS基因多态位点与生长发育性状的相关性分析

本研究旨在明确羧化全酶合成酶(holocarboxylase synthetase,HLCS)基因突变与杜洛克猪生长发育性状的相关性。利用Illumina SNP60芯片测序结果研究HLCS基因的突变位点,分析突变位点的多态性信息、突变位点与生长发育性状的关联性及突变位点的单倍型。结果显示,杜洛克猪HLCS基因具有4个SNPs位点:Ssc13:200455646 T>C、Ssc13:200458655 G>C、Ssc13:200504530 G>T、Ssc13:200551864 T>G,均符合Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),呈现中度多态性。关联分析结果发现,Ssc13:200455646 T>C位点TT基因型100 kg背膘、剩余采食量均显著高于TC和CC基因型(P<0.05);Ssc13:200458655 G>C位点GG基因型个体100 kg背膘、剩余采食量均显著高于CG和CC基因型(P<0.05);Ssc13:200504530 G>T位点GT基因型平均日采食量、平均日增重均显著高于TT基因型(P<0.05),GT基因型个体100 kg日龄显著小于TT基因型(P<0.05);Ssc13:200551864 T>G位点TG基因型平均日采食量、平均日增重均显著高于GG基因型(P<0.05),TG基因型个体100 kg日龄显著小于GG基因型(P<0.05);其余性状各位点不同基因型间无显著差异(P>0.05)。Ssc13:200455646 T>C和Ssc13:200458655 G>C位点呈现高度连锁,Ssc13:200504530 G>T与Ssc13:200551864 T>G位点呈现高度连锁。结果表明,HLCS基因4个SNPs位点的多态性与杜洛克猪的剩余采食量、平均日采食量、平均日增重、100 kg日龄和100 kg背膘均具有显著相关性,可为猪的生长发育遗传改良奠定基础。

Hlcs干扰对C2C12细胞成肌成脂分化后糖酵解基因表达的影响

旨在研究全羧化酶合成酶(holocarboxylasesynthetase,Hlcs)对糖酵解基因表达的影响,为进一步研究细胞糖酵解奠定基础。本试验以C2C12细胞为试验材料,采用siRNA技术干扰Hlcs基因,通过荧光定量PCR和Westernblotting检测Hlcs基因干扰对糖酵解基因表达的影响。结果表明,在C2C12细胞分化过程中,Hlcs基因与Pfkm、Pkm、Hk-2基因的表达趋势一致,提示Hlcs基因与糖酵解具有相关性。干扰Hlcs后,细胞分化形成的肌管数量明显少于对照组,糖酵解限速酶Pfkm的mRNA水平显著降低(P<0.05),而显著提高了Pkm的mRNA水平和蛋白表达水平(P<0.05);生物素作为羧化酶的辅酶,能够显著上调Pkm、Hk-2的mRNA水平(P<0.05)。干扰Hlcs后,细胞分化形成的脂滴数量明显少于对照组,Pfkm的mRNA水平显著升高(P<0.05),且Pkm的mRNA水平和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);生物素的添加能够显著上调Pfkm、Pkm的mRNA水平(P<0.05)。综上所述,在C2C12细胞分化过程中,Hlcs基因与糖酵解基因表达趋势一致,且干扰Hlcs基因可以抑制成肌分化C2C12细胞中Pfkm和Hk-2基因的表达,促进Pkm的表达;而促进成脂分化C2C12细胞中Pfkm和Pkm的表达,抑制Hk-2基因的表达。

一例多种羧化酶缺乏症的HLCS基因变异分析

目的对1例临床诊断为多种羧化酶缺乏症(multiple carboxylase deficiency,MCD)的患儿及其父母进行相关致病基因的变异分析,为临床诊断及遗传咨询提供依据。方法应用PCR技术和DNA测序技术对患儿的MCD致病基因BT和HLCS编码区进行变异检测,并对患儿父母进行相应基因变异分析。在80名正常人中对未报道过的基因变异进行PCR-限制性片段长度多态性分析。结果患儿的BT基因编码区未发现碱基改变,HLCS基因存在c.286delG(p.Val96Leufs*162)和c.1648G>A(p.Val550Met)复合杂合变异,其中c.286delG(p.Val96Leufs*162)经PCR-限制性片段长度多态性分析验证为新变异。结论HLCS基因c.286delG(p.Val96Leufs*162)和c.1648G>A(p.Val550Met)变异可能为患儿的致病原因,致病基因的检出为临床诊断及遗传咨询提供了依据,同时丰富了HLCS基因变异谱。

全羧化酶合成酶缺乏症临床特点和基因突变分析

【目的】探讨全羧化酶合成酶缺乏症(HCSD)的临床及基因突变特点。【方法】回顾性分析2014至2017年经我院遗传代谢病实验室基因检测确诊的6例HCSD患儿的基因检测结果及其临床资料。【结果】共有6例患儿(3女3男),发病年龄7月~7岁3月。临床表现以反复顽固性皮疹为主,部分合并有生长发育落后、神经系统症状。实验室检查3例有高乳酸血症,尿GC-MS检测:均有3-羟基异戊酸(3HIV)、3-甲基巴豆酰甘氨酸(3HMG)、3-羟基丙酸(3HP)和甲基枸橼酸(Me-citrate)增高。血串联质谱检测:均有3-羟基异戊酰基肉碱(C5-OH)增高。患儿入院后予口服生物素及对症治疗,1周后皮疹明显消退。例1~4患儿均为HLCS基因第11外显子发生c.1522C>T纯合子突变。例5患儿HLCS基因第8外显子发生c.1088T>A纯合子突变。例6患儿HLCS基因第11外显子发生c.1544G>A与c.1558G>A复合杂合突变。其中,c.1558G>A未见报道。【结论】全羧化酶合成酶缺乏症的临床表现缺乏特异性,对临床疑诊的病人可进行尿GC-MS和血MS-MS检测。基因检测有助于HCSD的诊断,c.1522C>T纯合子突变可能与早发型HCSD有关;c.1558G>A为新生突变。

HLC-PE水泥基灌浆材料有机塑性膨胀剂的研究

HLC-PE水泥基灌浆材料有机塑性膨胀剂是由水泥塑性阶段水解发气反应物经特殊工艺处理制成,能够提供水泥水化初期塑性膨胀特性的一种产品。当其掺量为水泥用量1%～3%时,能保证各类水泥基灌浆材料满足GB/T 50448—2008《水泥基灌浆材料应用技术规范》对3、24 h竖向膨胀性能要求。消泡剂对其膨胀性能无影响;HLC-PE与硫铝酸钙膨胀剂复合使用可有效防止各类水泥基灌浆材料早期及后期收缩,有效保证灌浆质量。

日本虎斑猛水蚤的重金属急性毒性及其作为标准测试生物的潜在意义

以静态实验法研究重金属Cu、Cd、Pb和Zn单独以及两两联合对日本虎斑猛水蚤(Tigriopus japonicus)的急性毒性效应,并分析其是否适宜作为我国海水重金属毒性测试的标准生物。结果显示,单独作用下,Cu、Cd、Pb和Zn对受试生物的24h LC50分别为0.26、0.14、0.40和0.65mg·mL-1,海水中这4种重金属对该桡足类的安全浓度阈值分别为2.6、1.4、4.0和6.5μg.L-1。其中,Cu和Zn的安全浓度低于国家海水水质第一类标准,而Cd和Pb介于国家第一和第二类水质标准之间,这表明受试生物对这4种重金属的毒性十分敏感。而上述4种重金属两两联合对受试生物均为增强作用,说明重金属联合作用促使该桡足类动物的毒性敏感性增强。日本虎斑猛水蚤适宜作为我国海水重金属毒性测试的标准生物。

土壤溶液中Ca^(2+)降低Cd^(2+)对赤子爱胜蚓的毒性

基于生物配体模型(BLM),在模拟土壤溶液中研究了Cd2+在不同Ca2+浓度下对赤子爱胜蚓(E. fetida)的毒性.结果表明,随着Ca2+浓度的变化,Cd半致死浓度(LC50)也发生相应变化.当Ca2+浓度从0.2mmol/L增加到1.0mmol/L时,由于Ca2+与Cd2+竞争相同的生物配体点位(BL),导致48h后Cd2+对赤子爱胜蚓毒性显著降低.定量分析表明,蚯蚓半致死浓度LC50{Cd2+}activity(以自由镉离子活度表示)与{Ca2+}activity(自由钙离子活度)间存在良好的相关性,Ca2+对Cd2+毒性的影响可通过相关方程预测.研究还表明,Cd2+的LC50随时间呈指数形式逐渐下降.

青年肝炎、肝硬化患者中肝癌早期诊断的相关因素

目的探讨青年慢性肝炎(CAH)、肝硬化(HLC)患者中肝癌(PHC)早期诊断的相关因素。方法对324例年龄<39岁的青年CAH、HLC、PHC患者进行调查,从家族史、过去史、饮酒史、临床症状、体征、肝功生化指标、AFP、HBVM进行比较分析,并进行相对危险度(OR值)计算。结果(1)PHC组的男女之比4.16∶1;(2)PHC组72.63%的患者合并肝硬化;(3)HLC组,有明确的家族肿瘤史及肝癌史者,发生肝癌的相对危险度(OR)分别为26.78和2.27;(4)PHC组中,16.84%有长期大量饮酒史,OR值为3.78;(5)PHC组AFP(+)率68.36%,>400ng/ml者占44.89%,而CAH及HLC组AFP(+)率则为12.26%、15.00%,仅0、1.67%(>400ng/ml);(6)HBV感染标记随CAH→HLC→PHC的发展呈递减关系。结论男性青年CAH、HLC是PHC的高危人群;肝炎的病程与反复发作及PHC的发生密切相关;家族肝癌及其他肿瘤史在青年肝癌的发生中相对危险度较高,长期大量饮酒对乙肝病毒确有加速和加重作用,为肝癌的一个促发因素;腹泻是肝癌患者常见的、较早出现的一个临床症状,应引起医务人员重视。

毛细胞白血病的超微结构诊断特征

目的探讨毛细胞白血病（HCL）超微结构诊断特征。方法利用透射电镜观察7例HCL患者外周血或骨髓中毛细胞的超微结构特征。结果电镜下可见毛细胞，其超微结构特点是：①微绒毛特点：数量多、微绒毛长、粗细相同、形态各样；②胞核特点：卵圆形，稍有刻痕，异染色质沿核膜内面分布；③胞质特点：细胞器丰富，首次发现髓鞘结构小体，但未见核糖体板层复合体。结论毛细胞的微绒毛特点是HCL超微结构诊断的重要特征，胞核和胞质特点可用做HCL鉴别诊断的参考特征，核糖体板层复合体不一定是HCL的诊断特征。

HLC-1抗裂防渗剂在大型混凝土工程中的应用

补偿收缩混凝土能够有效地解决大体积混凝土的冷缩和干缩开裂。HLC -I抗裂防渗剂是制备补偿收缩混凝土的优秀材料 ,具有微膨胀、总碱含量低、水化热低、耐硫酸盐侵蚀等特点 ,适合在大体积混凝土中应用。HLC -I抗裂防渗剂已经成功应用于润扬长江公路大桥、绍兴污水处理厂等大型工程中。工程应用表明 :HLC -I抗裂防渗剂能有效提高混凝土抗裂性能 。

四种重金属对中华倒刺鲃的急性毒性

在常温静水条件下，进行了硫酸铜、硫酸镉、醋酸铅和氯化汞对中华倒刺鲃鱼苗的急性毒性试验，结果表明：四种药物依次对中华倒刺鲃鱼苗的96hLC50分别为0．28mg·L^-1、0．42mg·L^-1、2．11mg·L^-1、0．40mg·L^-1．其安全浓度分别为：O．0280mg·L^-1、0．0211mg·L^-1、0．0248mg·L^-1、O．00400mg·L^-1。

近交系HLC小鼠血液学指标测定

目的 :了解HLC小鼠血液学指标及T淋巴细胞及其亚群 ,提供HLC小鼠的生物学数据。方法 :分别对HLC小鼠、无毛小鼠及昆明小鼠进行RBC、WBC、BPC、Hb测定及白细胞分类计数。α 醋酸萘酯酶法染色观察其T淋巴细胞及其亚群。结果 :HLC小鼠RBC、WBC、BPC、Hb与无毛小鼠及昆明小鼠相比 ,差异无统计学意义 ,3种小鼠的白细胞分类计数基本一致。HLC小鼠T淋巴细胞总数、T辅助细胞及T抑制细胞与昆明小鼠及无毛小鼠比较 ,差异均无统计学意义 (P >0 .0 5)。结论 :HLC小鼠血液学指标与昆明小鼠及无毛小鼠相一致 ,T淋巴细胞及其亚群趋于正常 。

HLC近交系小鼠骨髓嗜多染红细胞微核检测

目的 :了解HLC近交系小鼠骨髓微核自发率。方法 :将HLC小鼠、无毛小鼠及昆明种小鼠各分为 2组 ,一组取骨髓涂片观察 ,另一组腹腔注射 1 0 0mg/kg环磷酰胺 ,1 8h后取骨髓涂片观察 ,计算微核率。结果 :HLC近交系小鼠嗜多染红细胞微核自发率与无毛小鼠和昆明小鼠差异无统计学意义 (P >0 .0 5) ;腹腔注射环磷酰胺后 ,HLC近交系小鼠与无毛小鼠及昆明小鼠骨髓微核率均显著升高 (P <0 .0 1 ) ,但 3者之间差异无统计学意义 (P >0 .0 5)。结论 :HLC近交系与无毛小鼠及昆明小鼠微核自发率相似 。

类人胶原蛋白的聚集行为与固定化方法

类人胶原蛋白(HLC)具有特殊的结构特点,能够和多种生物分子发生相互作用,将其固定化作为介质在分离纯化中具有一定的实用价值。通过考察不同的溶液组成和环境因素对HLC之间聚集行为的影响,使用环氧氯丙烷将HLC固定在Sepharose微球表面制成具有一定分离纯化功能的介质。结果表明:在固定化过程中,HLC浓度的影响较小,而温度、pH值影响较大,葡萄糖、CaCl2对于HLC的自聚合表现出较强的抑制作用。最终确定在温度为45℃,pH=9.0的环境条件下,每1 mL Sepharose微球添加15 mg HLC,葡萄糖质量浓度15%,CaCl2浓度0.3 mol/L的反应体系中,能够有效实现HLC的固定化。

豫医无毛小鼠近交系与HLC小鼠近交系遗传纯度检测

目的:检测豫医无毛小鼠近交系(YYHL)与HLC小鼠近交系的遗传纯合程度。方法:依据GB/T14927.12001检测分布于8条染色体上的13个生化标记基因位点:Car2、Hbb、Es1、Trf、Mod1、Idh1、Es2、Es3、Mup、Pgm1、Gpd1、Ce2、Gpi1;每个品系抽样4只,并用标准近交系C57BL/6、DBA/2、615、BALB/c作对照,对YYHL小鼠近交系和HLC小鼠近交系进行遗传检测。结果:YYHL与HLC小鼠近交系在所检测的13个生化标记基因位点上达到100%纯合。但2个近交系在Hbb、Idh1、Ce2生化标记基因位点上不同。结论:YYHL小鼠近交系与HLC小鼠近交系在遗传纯度方面均已达到近交系要求,可作为新的近交系应用于科学研究。

HLC-ZS1预制简支箱梁盆式橡胶支座灌浆料的研究

进行了基于硫铝酸盐水泥体系的预制简支箱梁盆式橡胶支座灌浆材料的试验研究,以硫铝酸盐水泥、矿粉和石膏为原材料,辅以骨料,高效减水剂、早强剂、缓凝剂等材料,通过合理的配合比探索,研制出了满足《客运专线桥梁盆式橡胶支座暂行技术条件》要求的HLC-ZS1预制简支箱梁盆式橡胶支座灌浆料。

基于NBS颜色距离及半监督聚类的织物图像分割

为提高纺织CAD技术,对织物图像的分割进行了研究。依据半监督聚类理论,提出了一种基于HLC颜色空间的以NBS颜色距离为优化准则的半监督聚类的织物图像分割算法。算法利用有限的人工信息,即在织物图像上点击有限的几个点以标识相应区域之间的关系,从而得到满足用户给定限制的织物图像分割结果。算法首先对织物图像进行量化转换处理,而后在HLC色彩空间中集成先验的分割信息进行色彩聚类。实验结果表明,该算法在织物图像分割中是一种可行的方法。