人肺癌细胞转录因子——C/EBP和HMG样蛋白的EMSA检测

目的 检测人肺癌细胞中是否存在与Na+ H+ 交换蛋白 1(NHE 1)基因转录相关的重要转录因子———C EBP和HMG样蛋白。方法 采用电泳迁移率改变分析法 (EMSA)检测人肺癌细胞株核蛋白中C EBP和HMG样蛋白的表达及其水平。结果 EMSA检测到A5 49细胞和转染NHE 1反义载体的A5 49细胞均有转录因子C EBP和HMG样蛋白的表达 ,且后者表达水平高于前者 ;采用 5 0倍未标记的片段能完全抑制相应转录因子与32 P标记的相同片段的结合。结论 A5 49细胞核蛋白中存在能与C EBP结合序列和Poly(dA∶dT)区结合的转录因子 ,即C EBP和HMG样蛋白 ,后者的表达水平高于前者。特异性竞争抑制试验表明外源性特异DNA片段能抑制相同片段与转录因子的结合。

蒙药巴特日七对小鼠胶质瘤的治疗作用及可能机制

目的观察蒙药巴特日七治疗小鼠胶质瘤的疗效,并就其机制作初步探讨。方法构建小鼠胶质瘤,将小鼠随机分为4组:对照组、低、中、高剂量治疗组,每组20只。隔天记录肿瘤体积,计算抑瘤率,持续给药12 d后处死小鼠,取肿瘤组织,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况。Western印迹和RT-qPCR检测高迁移率族蛋白(HMG)B1、Toll样受体(TLR)4、核因子(NF)-κB的蛋白和mRNA表达水平。Western印迹检测不同组肿瘤组织中自噬相关蛋白的表达。结果蒙药巴特日七呈剂量依赖性抑制胶质瘤裸鼠移植瘤生长,促进胶质瘤细胞凋亡。蒙药巴特日七呈剂量依赖性抑制HMGB1、TLR4、NF-κB的蛋白和mRNA表达水平。结论蒙药巴特日七可能通过HMGB1/TLR4/NF-κB通路发挥肿瘤抑制作用。