miR-1297靶向HMGA1基因以调节胃癌细胞的侵裘和迁移

目的:探讨miR-1297是否可以通过靶向高迁移率组A1(HMGA1)调控胃癌的迁移和侵袭。方法:通过逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测定了胃癌组织(n=30)和邻近正常组织中miR-1297和HMGA1的表达水平。体外培养胃腺癌SGC-7901细胞系和人正常胃粘膜上皮细胞GES-1。将SGC-7901细胞分为空白组、阴性对照组、miR-1297 mimics组、miR-1297 inhibitor和miR-1297 inhibitor+HMGA1 siRNA组。采用Transwell法检测SGC-7901细胞的迁移和侵袭情况。Western blot检测蛋白水平的变化。荧光素酶报告基因法检测miR-1297特异性靶基因。结果:miR-1297在胃癌组织和SGC-7901细胞中表达下调,HMGA1 mRNA水平同时升高(P<0.001),并且miR-1297与HMGA1 mRNA表达均呈负相关关系(P<0.05)。与空白组和阴性对照组相比,miR-1297 mimics组可抑制细胞在体外的迁移和侵袭能力(P<0.05)。此外,miR-1297通过靶向HMGA1的3'-UTR下调HMGA1。与空白和阴性对照相比,转染miR-1297 inhibitor下调miR-1297表达后细胞迁移和侵袭能力显著增加(P<0.05),同时转染HMGA1 siRNA(miR-1297 inhibitor+HMGA1 siRNA组)后这种促进能力被逆转(P<0.05)。结论:miR-1297通过靶向HMGA1抑制SGC-7901细胞的迁移和侵袭,提示miR-1297/HMGA1轴为胃癌提供了一种新的前瞻性治疗策略。

HMGA1、sHLA-G联合TSGF检测在宫颈癌早期筛查及病情评估中的应用

目的分析血清高迁移率族蛋白A1(HMGA1)、可溶性白细胞G抗原(sHLA-G)联合恶性肿瘤特异生长因子(TSGF)检测在宫颈癌早期筛查及病情评估中的应用价值。方法选取2019年2月至2022年2月安徽医科大学第二附属医院收治的110例宫颈癌患者(恶性组),另选取本院同期收治的宫颈上皮内瘤变110例作为良性组,及健康体检女性110名作为对照组。受试对象均进行HMGA1、sHLA-G、TSGF检测。对比三组HMGA1、sHLA-G、TSGF表达水平,收集恶性组患者资料,对比不同临床分期、分化程度、淋巴结转移者HMGA1、sHLA-G、TSGF表达水平,绘制ROC曲线分析HMGA1、sHLA-G、TSGF联合检测对宫颈癌筛查的价值。结果HMGA1、sHLA-G、TSGF表达水平由高到低依次为恶性组>良性组>对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05)。临床Ⅲ-Ⅳ期、低分化、淋巴结转移者HMGA1、sHLA-G、TSGF表达水平分别高于临床Ⅰ~Ⅱ期者、中-高分化、淋巴未转移者,差异有统计学意义(P<0.05)。依据ROC曲线可知,HMGA1、sHLA-G、TSGF对宫颈癌诊断AUC值分别为0.781(95%CI:0.699~0.861)、0.706(95%CI:0.607~0.804)、0.722(95%CI:0.629~0.816),HMGA1+sHLA-G+TSGF联合诊断的AUC值为0.813(95%CI:0.717~0.896),高于三者单独检测(P<0.05)。结论HMGA1、sHLA-G、TSGF表达水平与宫颈癌恶性程度相关,三者联合检测可提高宫颈癌早期筛查效能,或可作为宫颈癌筛查及诊断的指标应用于临床。

HMGA1在膀胱癌细胞中的作用及其机制研究

目的探讨高迁移率族蛋白A1(High Mobility Group Protein A1,HMGA1)对人膀胱移行细胞癌细胞(T24)迁移和化疗耐药的作用及其分子机制。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫蛋白印迹(Western blot)的方法检测HMGA1在人膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1)和人膀胱癌T24细胞中的表达;用脂质体将构建好的HMGA1 siRNA瞬时转染入T24细胞中,CCK-8法检测沉默HMGA1后膀胱癌细胞增殖能力的变化;平板划痕和Transwell实验检测沉默HMGA1后膀胱癌细胞迁移能力的变化;CCK-8法和流式细胞术检测沉默HMGA1后膀胱癌细胞化疗敏感性和存活率的变化;Western blot检测沉默HMGA1后下游相关基因的改变。结果RT-PCR实验表明,相比于SV-HUC-1细胞中HMGA1 mRNA的表达水平(0.98±0.01),HMGA1 mRNA在人膀胱癌T24细胞中的表达上调(3.55±0.13,P<0.001);T24细胞中HMGA1蛋白表达量明显高于SV-HUC-1细胞(P<0.05);相比于阴性对照组,沉默HMGA1后,膀胱癌细胞的增殖水平明显降低(P<0.001);且膀胱癌细胞的迁移能力也显著下调(P<0.01);另外,膀胱癌细胞的化疗敏感性和凋亡率也显著增加(P<0.01)。随着化疗药物浓度增加,PI3K和AKT表达不断降低;且在降低HMGA1表达水平后,PI3K和AKT表达水平也降低。结论HMGA1在膀胱癌细胞中表达上调,高水平HMGA1可能通过调控PI3K/AKT通路促进膀胱癌细胞的转移和化疗耐药,有望为临床膀胱癌的治疗提供新的分子靶点和理论依据。

LINC00665通过let-7i/HMGA1促进肝癌细胞增殖与侵袭的机制研究

目的探讨LINC00665通过let-7i/HMGA1对肝癌细胞增殖与侵袭能力的影响。方法通过qRT-PCR分析LINC00665在肝癌组织中的表达情况。选择人肝癌细胞Hep3B和Huh7细胞,分别将其分为siRNA-NC组、siRNA-LINC00665组、let-7i mimics-NC组、let-7i mimics组进行转染;采用qRT-PCR和Western blot检测各组的HMGA1 mRNA和蛋白水平;CCK8法检测各组细胞的增殖活力;划痕实验检测各组细胞的划痕愈合率;Transwell实验检测各组细胞的侵袭数量。结果LINC00665在肝癌组织中的表达量显著高于正常组织。hep3B和Huh7细胞转染48 h后,与si-NC组相比,si-LINC00665组细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降,HMGA1的mRNA和蛋白水平下降,let-7i的表达水平升高;与let-7i mimics-NC组相比,let-7i mimics组细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降,HMGA1的mRNA和蛋白水平下降。结论LINC00665通过let-7i/HMGA1途径,在肝癌进展中调控肿瘤增殖和侵袭作用,LINC00665有望成为临床肝癌治疗的新靶点。

HMGA1对TGF-β1诱导HTR-8/SVneo细胞上皮间质转化的影响

目的研究高迁移率蛋白A1(HMGA1)对HTR-8/SVneo细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)诱导所致上皮间质转化(EMT)过程中的作用。方法将HMGA1的小分子干扰RNA(siRNA)转染进人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo,将细胞分为空白对照组、阴性对照+lipofectamine 3000组、lipofectamine 3000组、阳性对照+lipofectamine 3000组、HMGA1 SiRNA-1+lipofectamine 3000组、HMG1 SiRNA-2+lipofectamine 3000组、HMG1 siRNA-3+lipofectamine 3000组,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法,检测各组的HMGA1基因和蛋白表达,筛选出沉默效率最佳的siRNA;TGF-β1诱导HTR-8/SVneo发生EMT,研究TGF-β1对EMT过程的影响;使用筛选后的siRNA与TGF-β1共同作用,检测HMGA1、N-cadherin、E-cadherin的表达情况;加入TGF-β1用于诱导细胞,探究PI3K/AKT和NF-κB通路相关蛋白的表达状况;利用PI3K/AKT和NF-κB通路抑制剂阻断通路,研究HMGA1在通路介导下EMT过程的作用机制。结果HMGA1 siRNA-1组沉默效果最佳,可用于后续实验;与空白对照组相比,TGF-β1组E-cadherin蛋白表达水平降低,N-cadherin蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);干扰HMGA1表达可以阻止TGF-β1诱导HTR-8/SVneo细胞发生EMT;TGF-β1诱导后,通路相关蛋白p-AKT、AKT、NF-κB表达量均增加,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);加入通路抑制剂后,HMGA1的表达量主要受PI3K/AKT通路的影响,而NF-κB通路的抑制剂对HMGA1的影响较小。结论HMGA1在TGF-β1诱导的HTR-8/SVneo细胞EMT过程中发挥着重要作用,而且TGF-β1主要通过PI3K/AKT通路调控HMGA1的表达,进而促进细胞发生EMT。

miR-4465通过靶向下调HMGA1的表达抑制肝细胞癌Hep3B细胞的恶性生物学行为

目的:探讨miR-4465靶向高迁移率族蛋白A1(HMGA1)对肝细胞癌Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:收集2020年5月至2021年9月在皖南医学院第一附属医院确诊为肝细胞癌患者的16对癌组织和癌旁组织样本,采用qPCR分析miR-4465在肝细胞癌组织和Hep3B、Huh7细胞中的表达情况,双荧光素酶报告基因实验验证miR-4465与HMGA1的调控关系。按转染物的不同将Hep3B细胞分为mimics-NC组、miR-4465-mimics组、inhibitor-NC组、miR-4465 inhibitor组、si-NC组、si-HMGA1组;另外分组转染mimics-NC+pcDNA-NC、miR-4465 mimics+pcDNA-NC和miR-4465 mimics+pcDNAHMGA1进行回复实验。采用qPCR和WB法检测各组细胞中HMGA1 mRNA和蛋白水平的变化,CCK-8法检测各组细胞增殖能力的变化,划痕实验检测各组细胞迁移能力的变化,Transwell实验检测各组细胞侵袭能力的变化。结果:miR-4465在肝细胞癌组织和细胞中的表达水平显著低于癌旁组织和正常肝细胞(P<0.05或P<0.001)。转染48 h后,过表达miR-4465的Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著下降(P<0.05、P<0.01或P<0.001);敲低miR-4465后细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显升高(P<0.05、P<0.01或P<0.001)。双荧光素酶报告实验验证了HMGA1-3’UTR与miR-4465的靶向结合关系,miR-4465可以靶向下调HMGA1mRNA和蛋白质的表达(均P<0.01)。过表达HMGA1能部分逆转过表达miR-4465对细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及HMGA1表达的抑制作用(均P<0.05)。结论:miR-4465通过靶向下调HMGA1在肝细胞癌Hep3B细胞中的表达,从而抑制Hep3B细胞的恶性生物学行为。

siRNA抑制HMGA1基因表达对甲状腺乳头状癌K1细胞增殖的影响

目的研究HMGA1-siRNA基因对甲状腺乳头状癌K1细胞增殖的影响。方法 HMGA1-siRNA组转染HMGA1的小干扰RNA(siRNA);阴性对照组转染HMGA1的无关序列,并转染甲状腺乳头状癌K1细胞。采用CCK-8法检测转染HMGA1-siRNA基因后对K1细胞增殖的影响;RT-PCR法检测正常组、HMGA1-siRNA组和阴性对照组的HMGA1-mRNA表达;Western blot法检测三组的HMGA1蛋白表达;Transwell侵袭实验检测三组HMGA1-siRNA基因转染后K1细胞的侵袭能力。结果 HMGA1-siRNA基因对K1细胞的抑制增殖作用明显,呈现时间-剂量依赖关系;HMGA1-siRNA基因在K1细胞中mRNA和蛋白的表达显著低于正常组和阴性对照组;HMGA1-siRNA组K1细胞侵袭能力显著低于正常组和阴性对照组。结论 siRNA可以沉默HMGA1基因,减缓甲状腺乳头状癌K1细胞增殖。

杜洛克猪HMGA1基因多态位点与生长、饲料利用性状的关联分析

试验对 HMGA1基因的两个 SNPs 位点进行分析,研究了 HMGA1基因核苷酸多态性与生长、饲料利用性状的关联性。利用大白猪和民猪重测序结果比较发现了 HMGA1基因的两个 SNPs 位点（g.-543 T 〉 C 和g.1356 C〉T）,利用 Sequenom 质谱测序平台对杜洛克猪 g.-543 T〉C 和 g.1356 C〉T 位点进行基因分型,并分析该位点多态性与生长、饲料利用性状的关联性。结果发现,杜洛克猪群体 g.-543 T〉C 位点,CT 与 CC 基因型相比,90日龄体重升高了2.15 kg （P 〈0.05）,30 kg 体重日龄降低了3.21 d （P 〈0.05）,断奶重升高,剩余采食量降低,100 kg 体重日龄减少,30-100 kg 平均日增重、40-90 kg 平均日采食量、40-90 kg 平均日增重均降低。杜洛克猪群体 g.1356 C〉T 位点,CC 与 TT 基因型相比,90日龄体重升高了0.37 kg （P 〈0.05）；平均日采食量降低0.13 kg/d （P 〈0.05）,100 kg 背膘厚降低0.43 mm （P 〈0.05）,剩余采食量降低了70.42 g （P 〈0.05）,30 kg 体重日龄降低了0.56 d （P 〈0.05）；40-90 kg 平均日采食量降低了0.17 kg （P 〈0.05）,断奶重升高,100 kg 体重日龄增大,30-100、40-90 kg 平均日增重均降低；CT 与 TT 基因型结果与上结果类似。结果初步表明 HMGA1基因两个 SNPs 位点的突变有利于杜洛克猪的生长、饲料利用效率的提高。

高迁移率族蛋白A1(HMGA1)在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的:研究肝细胞癌(hepatocelluar carcinoma,HCC)中高迁移率族蛋白A1(high mobility group protein A1,HMGA1)的表达情况,探讨HMGA1基因在HCC中的表达与肝内转移以及临床病理参数之间的关系。方法:采用实时定量荧光聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,QRT-PCR)检测52例肝细胞癌组织和配对的癌旁组织、10例正常肝脏组织中HMGA1mRNA的表达,用免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测HMGA1蛋白在肝细胞癌中的表达,评价HMGA1的表达与HCC临床病理学因素的相关性。结果:肝癌组织中HMGA1mRNA的表达较正常肝脏中升高6.82倍,其中有、无肝内转移组较正常肝组织分别升高13.36倍和4.63倍(P<0.05)。HMGA1mRNA的表达与TNM分期、Edmonson分级、肝内转移有关(P<0.05)。肝细胞癌中有肝内转移组较无肝内转移组HMGA1蛋白表达明显增强。结论:HMGA1基因在肝细胞癌中的表达较正常肝脏组织中明显升高,并与肿瘤的肝内转移相关,有望成为肝细胞癌诊断和治疗的新靶点。

RNAi沉默HMGA1基因对肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响

目的:筛选HMGA1基因沉默稳定转染肝癌细胞株,检测沉默后肿瘤细胞凋亡、周期和增殖的变化。方法:靶向HMGA1的RNAi载体转染肝癌细胞,G418筛选得到稳定转染细胞株并鉴定;MTT法和FACS检测细胞增殖、凋亡及细胞周期。结果:成功建立基因沉默HMGA1稳定细胞株;HMGA1基因沉默后,细胞凋亡百分率(29.46±3.04%)明显高于质粒对照组和空白对照组(1.96±0.76%和2.04±0.70%,P<0.01);G0-G1期细胞百分率(75.21±2.35%)明显高于质粒对照组和空白对照组(37.98±3.02%和39.23±3.63%,P<0.01),G2-S期(24.79±2.35%)显著低于质粒对照组和空白对照组(62.03±3.01%和60.77±3.63%,P<0.01);MTT检测显示,HMGA1沉默细胞增殖与质粒对照组和空白对照组相比显著降低(P<0.01或0.05)。结论:基因沉默HMGA1可促进肿瘤细胞凋亡,抑制细胞增殖。

HMGA1基因转染诱导NIH3T3细胞恶性转化实验研究

目的:通过建立稳定转染外源HMGA1基因的NIH3T3细胞,探讨HMGA1基因表达与肿瘤发生、发展的相关性。方法:脂质体转染法将真核表达载体pcDNA3·0-HMGA1稳定转染NIH3T3细胞,G418筛选获得阳性细胞克隆;RT-PCR法及基因测序技术,确定外源HMGA1基因在阳性细胞克隆转录水平的表达;MTT法绘制细胞生长曲线以及流式细胞术测定细胞周期观察细胞增殖能力的变化;软琼脂集落形成实验判断转染细胞的非锚定依赖性生长能力;RT-PCR法检测转染细胞免疫抑制因子VEGF和FasL mRNA表达。结果:筛选获得稳定转染HMGA1基因的NIH3T3细胞克隆,与对照细胞相比稳定转染HMGA1基因,细胞生长增殖速度加快,在软琼脂中形成细胞集落,并表达免疫抑制因子VEGF和FasL mRNA。结论:HMGA1基因转染可诱导正常NIH3T3细胞恶性转化,并参与调控免疫抑制因子mRNA表达,揭示HMGA1是肿瘤发生发展、转移以及免疫逃逸的关键分子。

横纹肌肉瘤中HMGA1和HMGA2的表达及其临床意义

目的探讨高迁移率蛋白A1(HMGA1)和高迁移率蛋白A2(HMGA2)在横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)中的表达特点及其与临床病理参数、细胞增殖的关系。方法应用免疫组化法分别检测39例RMS和10例正常横纹肌组织中HM-GA1、HMGA2和Ki-67蛋白表达水平;原位杂交法分别检测39例RMS中HMGA1和HMGA2基因mRNA的表达。结果 HM-GA1和HMGA2在RMS中的蛋白阳性表达率分别为76.9%(30/39)和64.1%(25/39),表达水平分别高于正常横纹肌组织(P<0.05);mRNA阳性表达率分别为69.2%(27/39)和66.7%(26/39),表达水平分别高于正常横纹肌组织(P<0.05)。HM-GA1、HMGA2在蛋白水平的表达与其各自的mRNA水平表达之间具有较好一致性。两者分别在胚胎型(ERMS)和腺泡型(ARMS)中的表达差异无统计学意义(P>0.05),而在不同分化程度之间的表达差异有统计学意义(P<0.05);在有复发或转移的病例与无复发或转移的病例中表达差异有统计学意义(P<0.05);在Ki-67阳性的高增殖组与Ki-67阴性的低增殖组之间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HMGA1和HMGA2过表达可能与RMS的发生、发展密切相关,有望成为判断该肿瘤预后的指标之一,并为靶向治疗提供依据。

结直肠癌组织中GPR15和HMGA1表达情况及其临床预后价值研究

目的探讨结直肠癌(CRC)组织中孤儿受体G蛋白偶联受体15(GPR15)和高迁移率族蛋白组A1(HMGA1)的表达情况及其临床预后价值。方法选取2019年1月至2020年1月于扬州大学附属医院接受根治性手术治疗的89例CRC患者,收集患者术中的CRC癌组织和癌旁组织。采用实时荧光定量聚合酶链式反应及免疫组化染色法检测组织中GPR15和HMGA1的表达情况,分析CRC癌组织中GPR15及HMGA1表达与患者临床病理特征的关联性。采用Kaplan-Meier法分析CRC癌组织中GPR15、HMGA1表达情况与患者生存预后的关联性。采用Cox回归分析CRC患者预后的影响因素。结果CRC癌组织中GPR15、HMGA1 mRNA相对表达量显著高于癌旁组织(P<0.05)。CRC癌组织中GPR15、HMGA1蛋白的阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05)。TNM分期Ⅲ期、低分化程度及合并淋巴结转移的CRC癌组织中GPR15、HMGA1阳性表达率分别高于Ⅰ~Ⅱ期、高中分化程度及无淋巴结转移的CRC癌组织,差异有统计学意义(P<0.05)。GPR15阴性组生存预后显著优于阳性组(log-rank检验:χ^(2)=9.124,P=0.003);HMGA1阴性组生存预后显著优于阳性组(log-rank检验:χ^(2)=10.140,P=0.001)。肿瘤TNM分期Ⅲ期、低分化程度、合并淋巴结转移、GPR15阳性、HMGA1阳性是促进CRC患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论CRC癌组织中GPR15和HMGA1的表达水平升高,两者与CRC患者不良临床病理特征密切相关,可作为新的评估CRC患者预后的肿瘤标志物。

卵巢上皮癌组织中HMGA1的表达及其意义

目的:探索卵巢上皮癌组织中HMGA1的表达及其对卵巢癌诊断与预后的意义。方法:通过半定量RT-PCR法分析36例卵巢癌和36例正常卵巢上皮组织中HMGA1的表达情况。结果:36例正常卵巢上皮组织中均未检测到HMGA1的转录产物;36例卵巢上皮癌组织中,有26(72.0%)例HMGA1呈阳性表达;HM-GA1在原发性卵巢上皮浸润癌中的表达与病理分级相关,21例G3的卵巢癌组织中有18例(86.0%)呈阳性表达,而10例G1和G2的卵巢癌组织中仅有4(40.0%)例呈阳性表达(P<0.001),与临床分期及病理分型无关(P>0.05)。结论:HMGA1在卵巢癌组织中呈过度表达状态,与卵巢上皮浸润癌病理分级相关,可作为卵巢癌诊断与良恶性鉴别诊断指标。

HMGA1与肿瘤的研究进展

高迁移率族蛋白（high mobility group protein，HMG）由Goodwin等于1973年首次在牛胸腺细胞中发现，它是细胞核内一类水溶性强、在聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈现高迁移率的小分子蛋白质。通常分为三大超家族HMG1／HMG2家族、HMG14/HMG17家族及HMGA1家族。2000年国际HMG学术机构根据其分子量大小、序列相识性和DNA结合特性予以重新命名为HMGA家族、HMGB家族和HMGN家族闭。HMGA可分为HMGA1和HMGA2，HMGA1分子又由HMGA1a．HMGA1b和HMGA1c 3种蛋白质组成．这三种蛋白质由同一个基因编码．

RNA干扰技术抑制JEG-3细胞中HMGA1的表达

目的:以人类高迁移率蛋白A1(HMGA1)为靶基因,采用RNA干扰(RNAi)技术特异性地抑制JEG-3细胞中HMGA1的表达。方法:针对HMGA1基因设计、合成一段小干扰RNA(siRNA),用脂质体lipo-fectamine2000将该siRNA转染JEG-3细胞,采用RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白质水平检测该siRNA对HMGA1表达的影响。结果:针对HMGA1的siRNA能够明显下调JEG-3细胞中HMGA1的表达水平,并具有良好的特异性。结论:在JEG-3细胞系中采用RNAi技术特异性下调了HMGA1基因的表达,为研究HMGA1基因在肿瘤细胞中的作用奠定实验基础,也为进一步研究HMGA1在治疗人类绒毛膜细胞癌的临床应用提供了有益帮助。

基于Cancer Browser数据库分析HMGA1在肾癌中的表达及预后

目的明确HMGA1基因在肾癌中的表达差异及其对上皮间质转化、预后的影响。方法利用Cancer Browser数据库检测HMGA1基因表达与肾癌分级分期、预后的相关性。通过Western blot实验检测HMGA1在肾癌组织、癌旁正常组织、肾癌细胞以及正常肾小管上皮细胞内的蛋白表达。通过Cancer Browser数据库检测HMGA1与Twist1、Twist2在肾癌中的相关性,并通过Western blot实验检测肾癌ACHN细胞系以及肾小管上皮细胞HK2内HMGA1、Twist1、Twist2的蛋白表达。结果 HMGA1的基因表达与肾癌的Grade分级、Stage分期、TNM分期呈正相关,且差异有统计学意义(P<0.05)。而HMGA1在肾癌组织中的蛋白表达显著高于其在癌旁正常组织内的表达,且肾癌细胞中HMGA1的蛋白表达也显著高于其在肾小管上皮细胞内的表达。肾癌患者中HMGA1与Twist2的表达呈正相关(P<0.000 1),而与Twist1的表达无明显相关(P=0.752 6),Western blot结果亦提示HMGA1和Twist2蛋白在肾癌细胞内均呈高表达,而Twist1在肾癌细胞及肾小管上皮细胞内表达无差异。最后的生存分析显示,HMGA1高表达的肾癌患者生存期显著低于HMGA1低表达的(P=0.007 7)。结论 HMGA1可能是肾癌诊断和预后的一种潜在生物学标志物,而高表达的HMGA1与肾癌患者的不良预后有关。

RNA干扰抑制肺腺癌细胞HMGA1表达对化疗敏感性的影响

目的探讨慢病毒介导的RNA干扰沉默HMGA1对肺腺癌细胞株SPCA-1化疗敏感性的影响。方法制备HMGA1siRNA慢病毒质粒,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定;HMGA1siRNA慢病毒质粒和阴性siRNA慢病毒质粒转染肺癌细胞株SPCA-1(阳性组和阴性组),半定量RT-PCR和Western blot检测其对细胞HMGA1基因表达的影响;MTT实验检测吉西他滨对阳性组和阴性组细胞生长、增殖的影响;流式细胞仪检测两组细胞凋亡率。结果 PCR和测序证实,成功构建HMGA1siRNA的慢病毒载体;RT-PCR和Western blot证实阳性组细胞存在HMGA1基因表达下调;分别应用不同浓度的吉西他滨处理两组细胞72 h后,MTT实验检测结果显示,阳性组细胞生长抑制率较阴性组明显增高;用0.05μg/ml、0.5μg/ml、5μg/ml吉西他滨处理细胞72 h后,应用流式细胞仪检测结果显示,阳性组细胞凋亡率较阴性组增高。结论 HMGA1siRNA能特异性下调细胞SPCA-1中HMGA1的表达,增强了该肺腺癌细胞对吉西他滨的敏感性。

siRNA对卵巢上皮癌细胞HMGA1基因表达抑制的实验研究

目的:探讨小分子干扰RNA对卵巢上皮癌细胞中高迁移率蛋白家族A1(High mobility group A1,HMGA1)基因表达的影响,了解HMGA1基因在卵巢上皮癌发生、发展中的作用。方法:设计并合成HMGA1siRNA,分为两组,实验组以不同浓度[(1.0,2.5,5.0)μg/L,下同]的HMGA1 siRNA转染HMGA1基因高表达的卵巢上皮癌细胞系OVCAR细胞,对照组以等量阴性对照siRNA转染OVCAR细胞,实时荧光定量RT-PCR技术检测转染后OVCAR细胞中HMGA1 mRNA的表达,HMGA1 mRNA的表达以PCR循环数阈值(Ct值)表示;蛋白印迹法测定OVCAR细胞中HMGA1蛋白的表达;显微镜观察并计数转染后存活的OVCAR细胞数。结果:HMGA1 siRNA转染OVCAR细胞后,明显下调OVCAR细胞中HMGA1 mRNA及蛋白的表达水平,实验组不同浓度HMGA1 siRNA转染后,OVCAR细胞的Ct值分别为(19.62±0.02),(20.46±0.02),(20.57±0.03)个循环数,与对照组[分别为(19.30±0.02),(19.45±0.01),(19.58±0.03)个循环数]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。上述浓度转染后,实验组OVCAR细胞的HMGA1蛋白表达水平(分别为0.75±0.02,0.56±0.02,0.19±0.03)分别与对照组(分别为1.92±0.25,1.80±0.29,1.15±0.18)比较,差异有统计学意义(P<0.01)。实验组OVCAR细胞生长较对照组明显受到抑制(P<0.05)。结论:HMGA1 siRNA可以下调HMGA1 mRNA及其蛋白的表达水平,抑制细胞生长,提示HMGA1基因在卵巢上皮癌的发生、发展中具有重要作用。

HMGA1在肺癌中的表达及临床病理学意义

目的探讨肺癌组织中高迁移率蛋白A1(high-mobility group A1,HMGA1)的表达及其对肺癌患者预后的影响。方法收集2002年至2010年284例在浙江医院肺癌手术治疗患者的临床病理资料和术后生存随访资料,通过免疫组化的方法检测HMGA1的表达,分析其与患者临床病理指标及预后之间的关系。结果 HMGA1在284例肺癌组织中有252例(88.7%)呈阳性表达,并且与患者生存期短密切相关(P<0.001)。而与年龄、性别、肿瘤组织学类型、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、临床TNM分期等没有明显关系。结论肺癌组织HMGA1表达阳性预示预后较差,而不同的表达强度与预后无明显相关。