脂多糖诱导肝细胞HMGB1释放及其信号通路研究

目的研究脂多糖对肝细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放的诱导作用及其胞内信号通路。方法采用正常大鼠肝细胞BRL-3A培养,观察100μg/L脂多糖诱导不同时间后细胞HMGB1 mRNA表达水平和细胞培养上清液中HMGB1含量的变化,及不同浓度的丝裂原活化蛋白激酶信号通路抑制剂SB202190、U0126对其诱导作用的影响。HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测。结果脂多糖诱导BRL-3A肝细胞6 h后HMGB1 mRNA表达水平和培养上清液中HMGB1含量明显升高(P<0.01),后者随着诱导时间延长而进一步升高;20μmol/L SB202190和20μmol/LU0126对脂多糖诱导HMGB1胞外释放有不完全的抑制作用,但对HMGB1 mRNA表达无影响。结论内毒素脂多糖诱导肝细胞HMGB1的mRNA表达和胞外释放,丝裂原活化蛋白激酶信号通路参与其释放过程。

血清高迁移率族蛋白B1与脓毒症小鼠心肌细胞凋亡的相关性研究

目的探讨血清高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)水平与心肌细胞凋亡率及血清脑钠肽(brain natriupeptide,BNP)的相关性;评价正丁酸钠(sodium butyrate,SB)对脓毒症小鼠心肌凋亡的影响及心功能不全的保护效应。方法采用小鼠盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)建立脓毒症模型。120只小鼠随机分为假手术组(Sham组)、CLP组及SB组,每组40只。用ELISA法检测各组0、12、24、48、72 h血清HMGB1与BNP浓度,用流式细胞仪测定各组0、12、24、48、72 h心肌细胞凋亡率,分别对HMGB1与心肌细胞凋亡率、HMGB1与BNP进行相关性分析。另外,研究正丁酸钠对脓毒症小鼠心肌细胞凋亡率、血清BNP以及120 h生存率的影响。结果血清HMGB1浓度在CLP术后12 h开始升高,并与心肌细胞凋亡率及血清BNP浓度在12、24、48、72 h各时间点均呈显著相关性(P<0.05);正丁酸钠能明显降低心肌细胞凋亡率及血清BNP浓度,并显著改善脓毒症小鼠生存率(P<0.05)。结论 HMGB1可能参与脓毒症小鼠心肌凋亡的过程,并导致心功能不全;应用正丁酸钠干预能减轻心肌凋亡,改善心功能。

HMGB1在肝癌及癌旁肝组织中的表达及意义

目的了解高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在肝炎、肝癌癌旁组织、肝癌组织中的表达,及其与肝组织损伤程度、肝癌发生发展的关系。方法慢性乙型肝炎(CHB)患者46例,肝癌癌旁组织标本20例,肝癌组织标本20例(配对组织),采用常规HE染色法观察肝组织炎症与纤维化程度,用免疫组化方法判断HMGB1在肝组织中的表达。结果 (1)正常肝、CHB、癌旁组织、肝癌组织中的HMGB1的表达差异有统计学意义(H=7.29,P=0.027);(2)肝组织炎症不同分级与HMGB1的表达有等级相关关系(rs=0.318,P=0.031),肝组织纤维化不同程度与HMGB1的表达有等级相关关系(rs=0.296,P=0.042);(3)肝癌组织中HMGB1的表达与肝癌Edmondson分级间无等级相关关系(rs=0.206,P>0.05)。结论 HMGB1有可能作为反映肝脏炎症和纤维化的间接指标,与肝癌的发生发展密切相关。

缺血再灌注诱导小鼠肝细胞释放高迁移率族蛋白B1对P38MAPK信号通路的影响

目的探讨P38MAPK通路在缺血再灌注诱导小鼠肝细胞释放高迁移率族蛋白Bl（HMGBl）中的作用及其可能机制。方法建立小鼠肝缺血再灌注损伤模型，分为假手术组（Sham）、缺血再灌注组（IR）与HMGBl释放抑制剂组（GA）。检测各组小鼠血清ALT、TNF-α和HMGBl变化，HE染色观察肝组织病理学改变，TUNEL法检测肝脏细胞凋亡情况，免疫组化与Westernblot法检测HMGBl、P-P38、P38和Caspase-3的表达。结果与Sham组相比，在IR组可见ALT（423．4±99．6）、TNF-α（84．3±21．4）和HMGB1（0．79±0．04）表达增高，而GA组则较IR组降低（P〈0．05）。病理学检查可见IR组肝细胞肿胀、肝窦变窄和灶状坏死等变化，而GA组肝组织病理改变较IR组明显改善。与Sham和GA组相比，IR组HMGB1从细胞核向核外释放增加，并且IR组的细胞凋亡率[（59．3±9．1）％]、肝组织HMGB1、p-P38和Caspase-3的表达水平最高（P〈0．05）。结论缺血再灌注诱导小鼠肝细胞释放HMGBl导致肝细胞损伤的机制可能与通过释放HMGB1而激活P38MAPK通路有关。

首发精神分裂症患者血清中高迁移率族蛋白B1及细胞因子的变化分析

目的 观察首发精神分裂症患者抗精神病药治疗前后血清中高迁移率族蛋白B1（HMGB1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1 β）、白细胞介素-6（IL-6）的变化及其相互关系,探索HMGB1在精神分裂症免疫机制中的作用.方法 收集郑州大学第一附属医院2013年1月至2014年12月住院治疗的首发未用药精神分裂症患者30例和30名健康对照者.酶联免疫法（ELISA）测定用药前后血清IL-1β、IL-6、TNF-αHMGB1水平,以阳性和阴性症状量表（PANSS量表）评定患者用药前后的精神症状.结果 （1）首发精神分裂症患者血清HMGB1[（80±13） μg/L]、IL-1β[（51 ±6） ng/L]、IL-6[（44±18） ng/L]、TNF-α水平[（59±10） ng/L]均高于健康对照组[（54±13）μg/L,（25 ±19、17 ±8、41±16） ng/L]（均P＜0.05）;经利培酮治疗后,患者血清中上述因子水平均低于治疗前,且差异均有统计学意义（均P＜0.05）.（2）精神分裂症患者血清HMGB1水平与IL-1β、IL-6、TNF-α水平、PANSS量表阴性症状评分均呈正相关（r=0.377、0.426、0.454、0.558,均P＜0.05）.结论 精神分裂症患者存在免疫激活,HMGB1可能在精神分裂症免疫机制中发挥促炎作用,抗精神病药物治疗后HMGB1水平的下降可能为精神症状改善的一个监测指标。