唾液腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中hMSH2、hMLH1蛋白的表达和意义

探讨错配修复基因hMSH2、hMLH1蛋白在唾液腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中的表达及意义。免疫组织化学SP法检测涎腺多形性腺瘤27例及癌在多形性腺瘤中蜡块标本22例,共49例标本hMSH2、hMLH1蛋白的表达情况。涎腺多形性腺瘤瘤旁正常组织、涎腺多形性腺瘤和癌在多形性腺瘤组织中hMSH2、hMLH1蛋白表达的阳性率分别为28.57%和42.86%、96.3%和85.19%及90.91%和86.36%。hMSH2及hMLH1在涎腺多形性腺瘤和癌在多形性腺瘤组织中均表达上调。

hMLH1和miR-148a表达与散发性结直肠癌微卫星不稳定性的关系

目的检测散发性结直肠癌(sCRC)组织中人类错配修复基因1(hMLH1)蛋白和miR-148a表达及其与微卫星不稳定性(MSI)的关系。方法收集黄冈市中心医院病理科保存的sCRC组织标本90例及其对应癌旁正常组织。收集患者临床病历资料,采用多重荧光PCR法检测组织DNA微卫星不稳定性,免疫组化染色法检测组织hMLH1蛋白表达,实时荧光定量PCR(qPCR)检测组织miR-148a表达量,双荧光素酶报告实验分析miR-148a和hMLH1 mRNA靶向关系。结果90例sCRC组织中,检出MSI 29例(32.22%),hMLH1蛋白表达缺失24例(26.67%)。经荧光素酶报告基因分析,miR-148a mimics可抑制含有hMLH1 mRNA 3′UTR-WT序列的报告基因质粒的荧光素酶活性;而且hMLH1蛋白表达缺失组织中miR-148a相对表达量高于未缺失组织(P<0.05);此外MSI组织中hMLH1蛋白表达缺失率和miR-148a相对表达量均高于微卫星稳定性(MSS)组织。右半结肠和直肠部位、pN_(0/1)期、pM _(0)分期hMLH1蛋白表达缺失率和MSI比例高于左半结肠、pN_(2)期、pM_(0)期(P<0.05);另外肿瘤直径>5.0 cm、右半结肠和直肠、pT_( 3/4)期、pN_(2)期、pM_(1)分组织miR-148a相对表达量低于肿瘤直径≤5.0 cm、左半结肠、pT_(1/2)期、pN_(0/1)期、pM_(0)期组织(P<0.05)。结论约30%的sCRC患者存在hMLH1蛋白表达缺失和MSI状态;sCRC肿瘤组织miR-148a相对表达量降低,导致对hMLH1基因表达的抑制作用减弱,可能是影响sCRC肿瘤细胞MSI状态的重要原因之一。

hMLH1 hMSH2蛋白缺失与直肠癌临床病理特征预后的相关性研究

目的：探讨hMLH 1、hMSH2 蛋白缺失与Ⅱ、Ⅲ期直肠癌患者临床病理特征及预后的相关性。方法：选取91例行直肠癌根治术且病理诊断明确的患者，采用免疫组织化学法检测患者hMLH 1、hMSH2 蛋白表达情况，采用χ2检验分析hMLH 1、hMSH2蛋白表达缺失与直肠癌临床病理特征之间的关系；采用Kaplan-Meier 生存曲线、Log-Rank检验、Cox 风险回归模型分析不同因素与预后的关系。结果：hMLH 1 蛋白表达缺失率为30.77% ，hMSH2 蛋白表达缺失率为19.78% ；hMLH 1 和（或）hMSH2 蛋白缺失的患者与hMLH 1、hMSH2 蛋白表达无缺失的患者相比，在性别、年龄、病理类型、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期6 个方面临床病理特征差异无统计学意义（P 均〉0.05）；单因素及多因素分析显示hMLH 1 和（或）hMSH2 蛋白情况及淋巴结转移数目为直肠癌患者预后的影响因素（P=0.010，P=0.032），且为独立影响因素（P=0.026，P=0.035）；hMLH 1 和（或）hMSH2 蛋白缺失的患者2 年无病生存率较hMLH 1、hMSH2 蛋白无缺失的患者明显提高（P=0.036）。 结论：hMLH 1、hMSH2 蛋白缺失的直肠癌患者与hMLH 1、hMSH2 蛋白无缺失的患者具备相似的临床病理特征，但hMLH 1、hMSH2 蛋白缺失的患者预后较好。

胃癌微卫星不稳定与hMLH1蛋白表达缺失的相关性研究

目的:分析胃癌组织微卫星不稳定性、hMLH1蛋白表达以及两者的关系。方法:选取65例胃癌组织标本,常规酚-氯仿法提取DNA,选取基因组上的五个微卫星位点BAT26、BAT25、D5S346、D2S123和D17S250,进行PCR扩增,扩增产物加入GeneScan 500size standard共同热变性后,用60g/L的SLPA添加8mol/L尿素做筛分递质的毛细管电泳进行分析。被检测的5个微卫星位点如出现≥2个位点的不稳定,定为微卫星的高度不稳定(MSI-H),1个位点出现不稳定定为微卫星的低度不稳定(MSI-L),没有位点出现不稳定定为微卫星稳定(MSS),石蜡切片常规免疫组织化学SP方法检测hMLH1蛋白的表达。结果65例胃癌组织中,有21例(32.3%)表现为MSI-H,20例(30.8%)有hMLH1蛋白表达的缺失。在21例MSI-H的胃癌组织中,18例(85.7%)有hMLH1蛋白表达的缺失。44例MSI-L/MSS的胃癌组织中仅2例(4.5%)有hMLH1表达的缺失。胃癌的MSI-H与hMLH1蛋白表达的缺失高度相关,P<0.01。其中,25例高分化腺癌有7例(28.0%)表现为MSI-H,6例(24.0%)有hMLH1表达的缺失;40例中低分化腺癌14例(35.0%)表现为MSI-H,12例(30.0%)有hMLH1蛋白表达的缺失。26例早期癌有1例(3.8%)表现为MSI-H,2例(7.7%)有hMLH1蛋白表达的缺失;39例中晚期癌20例(51.3%)表现为MSI-H,17例(43.6%)有hMLH1蛋白表达的缺失。微卫星不稳定在中晚期胃癌明显高于早期胃癌(P<0.01),但在不同分化程度的胃癌间差异无统计学意义;hMLH1蛋白表达缺失与分化程度无关,但在早期与中晚期的胃癌间差异有统计学意义,P<0.05。结论:由hMLH1基因所致细胞修复功能缺陷与部分胃癌的发生有关,而与胃癌的生物学行为无关;胃癌的微卫星不稳定性随着肿瘤的演进而增加。

ARID1a和错配修复蛋白HMLH1在子宫内膜样腺癌中的表达及意义

目的探讨ARID1a和HMLH1在子宫内膜样腺癌中的表达及意义。方法选取子宫内膜癌患者94例,收集癌灶组织与癌旁组织(包括正常子宫内膜及子宫内膜非典型增生)。采用免疫组化学法测定不同病灶组织中ARID1a与HMLH1蛋白阳性率,分析与临床病理特征的关系。结果子宫内膜癌病灶组织中ARID1a、HMLH1蛋白阳性率低于子宫内膜非典型增生(P<0.05);癌旁组织中正常组织与子宫内膜非典型增生ARID1a、HMLH1蛋白阳性率差异无统计学意义(P>0.05);子宫内膜癌组织中ARID1a、HMLH1蛋白表达与分化类型、肿瘤分期具有统计学意义(P<0.05);与年龄、肿瘤部位、肿瘤直径及肌层浸润深度无统计学意义(P>0.05)。结论ARID1a及HMLH1蛋白均可以在子宫内膜癌中缺失表达,检测两个蛋白表达对诊断早期子宫内膜样腺癌有一定的辅助诊断意义。

大肠癌发生中突变型P53与hMLH1表达的关系

[目的]探讨在大肠癌发生过程中错配修复基因hMLH1对p53基因突变的影响。[方法]采用免疫组化SP法检测37例正常大肠黏膜、32例大肠腺瘤与165例大肠癌中P53及hMLH1蛋白的表达。[结果]①正常大肠黏膜组、大肠腺瘤组与大肠癌组P53蛋白的阳性表达率分别为0%、21.9%与48.5%,三组间差异有显著性意义(P<0.05);hMLH1蛋白的阳性表达率分别为100%、87.5%与87.3%,其中正常大肠黏膜组与大肠癌组的差异有显著性意义(P<0.05)。②高中分化、低分化与黏液腺癌组中P53蛋白的阳性表达率分别为53.5%、17.6%与16.7%,其中前者与后两者的差异有显著性意义(P<0.05);hMLH1蛋白的阳性表达率分别为90.8%、70.6%与50.0%,前者明显高于后两者(P<0.05)。③在大肠腺瘤轻中度不典型增生和重度不典型增生组中P53蛋白的阳性表达率分别为18.5%与40.0%(P>0.05);hMLH1蛋白的阳性表达率分别为92.6%与60.0%(P<0.05)。④大肠腺瘤中随hMLH1蛋白的表达减少P53蛋白表达增多,但无明显相关性(P>0.05);大肠癌中两者的表达呈明显负相关(P<0.05)。[结论]大肠癌发生过程中hMLH1基因的功能异常可能是p53基因突变的原因之一。

胃癌组织中hMLH1基因的表达及意义

目的:探讨hMLH1基因在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理参数的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测52例胃癌组织和30例正常胃黏膜组织中hMLH1蛋白的表达。结果:hMLH1蛋白在胃癌及正常胃黏膜组织中的阳性表达率分别为61.54%和93.33%(P=0.002);hMLH1蛋白表达与胃癌临床病理参数无显著相关性(P>0.05)。结论:hMLH1蛋白表达缺失与胃癌的发生有关,可能是胃癌发生的早期事件。

Ⅲ期鼻咽癌组织中hMLH1与p53的表达变化及意义

目的探讨Ⅲ期鼻咽低分化鳞癌中错配修复基因家族成员hMLH1和p53的表达及其与肿瘤临床病理特征的关系。方法应用免疫组化EnVison法检测58例Ⅲ期鼻咽低分化鳞癌标本。结果58例鳞癌组织中,hMLH1阳性率为79.3%,有颅底侵犯者为71.8%,显著低于无颅底侵犯者的94.7%(P<0.05)。hMLH1表达与患者年龄、性别和5a生存期无关。p53阳性率为65.5%,有颅底侵犯者为74.5%,显著高于无颅底侵犯者的47.4% (P<0.05)。p53表达在生存期≥5a者为31.6%,显著低于生存期<5a者的82.1%,P<0.05。结论Ⅲ期鼻咽低分化鳞癌中有颅底侵袭的患者更易出现hMLH1阴性表达和p53的阳性表达。p53阳性表达率随患者生存期的延长而降低。Ⅲ期鼻咽低分化鳞癌中hMLH1与p53的表达,可以作为判断鼻咽癌生物学行为和预后的指标。

hMLH1和hMSH2蛋白表达在遗传性非息肉病性大肠癌诊断中的应用

目的 评价错配修复基因hMLH1和hMSH2蛋白表达在筛选遗传性非息肉病性大肠癌(HNPCC)中的价值。方法 收集大肠癌患者 6 6例 ,分为HNPCC患者 (A组 ,n =19)、高度可疑HNPCC患者 (B组 ,n =2 0 )、符合Bethesda指导标准的可疑HNPCC患者 (C组 ,n =14 )及散发性大肠癌患者 (D组 ,n =13)四组 ,用免疫组化方法检测各组错配修复基因hMLH1和hMSH2的蛋白表达。结果 A组hMLH1和hMSH2蛋白表达减低或缺失达 72 .8% ;B组为 6 0 .0 % ;C组为 2 8.4 % ;D组为 7.7%。hMLH1和hMSH2蛋白表达减低或缺失与HNPCC显著相关 (P =0 .0 0 0 8)。此外 ,hMLH1蛋白表达减低或缺失率显著高于hMSH2 (P <0 .0 1)。结论 hMLH1和hMSH2蛋白表达减低或缺失与HNPCC的可能性显著相关 ,免疫组化检测此二种蛋白表达能快速、有效地帮助临床医生评估患者HNPCC的可能性 ,同时提示相应错配修复基因存在突变。中国HNPCC患者中hMLH1基因发生突变的机会可能高于hMSH2基因。