HMME-PDT治疗鲜红斑痣238例临床疗效分析

目的:对鲜红斑痣患者HMME-PDT治疗后的临床疗效进行分析并探讨其有关影响因素。方法:对238例鲜红斑痣患者共计296个红斑区给予HMME-PDTT治疗。观察治疗区术后反应并判定其疗效。结果:治疗后红斑区出现水肿、结痂和脱痂等光敏反应。治疗总有效率达100％,其中疗效达Ⅰ级者占8.8％(26/296),Ⅱ级者占36.5％(10/296),Ⅲ级者占48.0％(142/296),Ⅳ级者占6.8％(20/296)。粉红型患者Ⅰ级疗效率(26.3％)明显高于紫红型(8.8％)和增厚型(5.9％)。结论:HMME-PDT治疗鲜红斑痣效果明显,安全可靠。

以532nm激光为光源的HMME-PDT对人类乳腺癌细胞的杀伤作用

目的:探讨532nm激光不同光剂量参数及血卟啉单甲醚(HMME)不同浓度参数对体外培养的乳腺癌细胞(MCF-7)的光动力学杀伤作用。方法:MCF-7细胞用浓度分别为5μg/m l、10μg/m l、20μg/m l的HMME孵育2h后,以532nm半导体激光照射,能量密度分别为0.3J/cm 2、0.6J/cm 2、1.2J/cm 2、2.4J/cm 2、4.8J/cm 2,24h后用CCK-8检测细胞存活率,并在光镜及电镜下观察细胞的形态变化。结果:随着激光剂量的增大,在一定的范围内,细胞的抑制率呈现上升趋势;能量密度为2.4J/cm 2,HM M E浓度为20μg/m l时,达到最大的抑制率为55.5%;并且细胞的抑制率也和H M M E浓度呈剂量依赖型;光镜下可观察到细胞坏死和凋亡样改变。结论:以532nm激光为光源的H M M E-PDT对M CF-7细胞有明显的杀伤作用,并在一定范围内呈光剂量和H M M E浓度剂量依赖型。

激光功率密度对HMME-PDT的视网膜和脉络膜生物学效应的影响

目的观察激光功率密度对血卟啉单甲醚(HMME)的视网膜和脉络膜的光动力效应的影响。方法以新西兰兔正常脉络膜毛细血管层为实验对象,HMME注射剂量为5mg/kg,波长532nm激光作为激发光源,眼底光斑能量密度为20J/cm2,功率密度分别为100、200、300和400mW/cm2,相匹配的照射时间分别为200、100、66和50s,照光时机为注射药物结束后5min之内。在PDT后第6小时和12小时,1、3和5天进行眼底观察、荧光眼底造影,并在眼底造影出现脉络膜毛细血管闭塞时取照光部位进行组织学检查。结果激光功率密度为100mW/cm2,PDT后第5天出现脉络膜毛细血管的选择性闭塞;功率密度为200mW/cm2时,PDT后第3天出现脉络膜毛细血管的选择性闭塞;功率密度为300mW/cm2时,PDT后第1天出现视网膜的非选择性损伤,PDT后第3天视网膜恢复正常,脉络膜毛细血管闭塞;功率密度为400mW/cm2时,PDT后第6h出现视网膜的非选择性损伤,PDT后第5天视网膜恢复正常,脉络膜毛细血管和大部分脉络膜大血管的闭塞。结论在激光能量密度相同时,其功率密度是影响生物学效应的重要因素。即随着功率密度的增加,生物学效应出现的时间提前,照射部位的视网膜和脉络膜大血管受累的可能性越大。

HMME-PDT对人舌鳞癌Tca8113细胞的作用及影响因素初步研究

目的:初步探讨血卟啉单甲醚(HMME)介导的光动力疗法(HMME-PDT)对人舌鳞癌Tca8113细胞的作用及可能的影响因素。方法:以HMME作为光敏剂、发光二极管(LED)为光源的光动力疗法作用于Tca8113细胞。采用MTT法分别检测光敏剂孵育时间、光敏剂浓度、光剂量及光功率密度对Tca8113细胞抑制率的影响。HE染色观察细胞形态学改变,Hoechst 33342荧光染色观察细胞核凋亡情况。结果:细胞抑制率随光敏剂孵育时间延长而增大,呈时间依赖效应;并且随光敏剂浓度和光剂量增加而增大,呈浓度-光剂量依赖效应;在相同光剂量下,抑制率随光功率密度增加而增大,在高剂量时更明显。HE染色显示,与对照组相比,PDT处理组细胞密度明显降低,死细胞明显增多;Hoechst 33342荧光染色可见核染色质浓集、核固缩、核碎裂,出现凋亡小体,呈典型凋亡形态改变。结论:HMME-PDT能有效杀伤Tca8113细胞,光敏剂孵育时间、光敏剂浓度、光剂量及光功率密度以均是影响PDT疗效的重要因素,HMME-PDT主要通过凋亡方式诱导细胞死亡。

卟啉单甲醚光动力疗法(HMME-PDT)灭活HIV的影响因素及其临床前药效学研究

目的：先前的研究证明HMME-PDT能显著灭活HIV-1ⅢB，本实验进一步研究各组成因素对HMME-PDT灭活HIV效应的影响以及HMME-PDT对多种HIV病毒株的灭活效应，探讨其临床应用的可能。

海姆泊芬光动力治疗鲜红斑痣护理专家共识

鲜红斑痣(portwine stains,PWS),又称微静脉畸形,是发生在真皮浅层的先天性毛细血管扩张畸形,发病率为0.3%~0.5%,无明显的男女性别差异[2]。一般出生即有或出生后不久出现,皮损多表现为粉红色至鲜红色的斑点或斑块,部分患者的皮损随着年龄增长颜色会逐渐加深、增厚,可能出现丘疹、结节、增生,部分PWS患者还可能出现多种并发症,严重影响到组织发育或器官功能[3]。

HMME—PDT联合氟制剂预防龋病的动物实验研究

目的:在构建龋病动物模型基础上观察HMME-PDT联合氟制剂预防龋病的效果。方法:选取断奶21d SPF-Wista大鼠80只,种植变形链球菌构建致龋模型后分为蒸馏水、HMME-PDT、氟化钠、以及HMME-PDT+氟化钠组4组,连续8周给大鼠进行口腔处理,采集大鼠唾液培养,记录变形链球菌水平及观察实验组大鼠口内变形链球菌生长繁殖的影响并评估Keyes记分抑制龋损形成的效果。结果:与蒸馏水组相比,其余各组变形链球菌水平和龋齿Keyes记分均有不同程度的降低,其中HMME-PDT显示对窝沟面龋和光滑面龋有较好的防治效果(P<0.05),但均低于氟化钠组;HMME-PDT+氟化钠组未见明显的协同抑龋作用。结论:HMME-PDT能有效抑制口腔变链菌繁殖,降低龋齿的发生率。

两亲性光敏剂血卟啉单甲醚在不同溶液体系中的存在状态

目的测定血卟啉单甲醚(HMME)在不同浓度、不同溶液体系中的存在状态,以分析其对HMME-光动力学疗法(PDT)的影响.方法按所用溶剂实验分为以下4种溶液体系:HMME-磷酸盐缓冲液(PBS)、HMME-二甲基亚砜(DMSO)、HMME-白蛋白缓冲液和HMME-细胞悬液,每种溶液配成2、4、8、10、20、40、60、80和100 μmol/L等9个浓度.首先分别测定其吸收光谱和荧光激发光谱,根据光谱形态特征定性分析HMME在前述9个浓度的4种溶液体系中的存在状态,然后对形成聚集体的溶液利用公式定量分析HMME的缔合数、聚集平衡常数及各浓度下的缔合度.结果通过光谱特征的定性分析发现,浓度为2～10 μmol/L时,HMME在DMSO、白蛋白缓冲液、PBS和细胞悬液中均以单体为主;浓度为20～100 μmol/L时,除DMSO溶液外在其他3种溶液中都有HMME聚集体出现.通过绘制浓度为20～100 μmol/L的HMME在PBS、白蛋白缓冲液和细胞悬液中的状态图,聚集数取2时,状态图线性关系较好,HMME在此3种溶液中形成二聚体.缔合度计算结果显示:浓度为20 μrmol/L的PBS、细胞悬液和白蛋白缓冲液中部分HMME分子开始形成聚集体,但整个溶液仍以单体为主(HMME单体百分数分别为92.3%、90.7%和95.5%);40～100 μmol/L溶液中HMME单体含量随浓度增加而减少,100μmol/L的PBS溶液和细胞悬液中70%～75%HMME为单体,近30%的HMME分子发生了聚集,而白蛋白缓冲液中83%的HMME为单体,20%的HMME分子发生了聚集.HMME在PBS和细胞悬液中的聚集平衡常数近似,而且大于在白蛋白缓冲液中的聚集平衡常数,说明HMME的聚集程度在PBS溶液和细胞悬液中比在白蛋白缓冲液中大.与疏水性血卟啉衍生物(HpD)比较结果显示,在PBS溶液中HMME在60 μmol/L开始出现明显聚集,而疏水性HpD在20μmol/L即开始出现明显聚集;定量比较各溶液体系中HpD的聚集平衡常数均明显大于HMME,且各浓度时的单体含量明显小于HMME,说明HMME在PBS、蛋白缓冲液和细胞悬液中的聚集趋势明显小于HpD.结论两亲性光敏剂HMME在PBS、蛋白缓冲液和细胞悬液中聚集性显著低于疏水性的HpD.浓度低于20μmol/L HMME在4种溶液中均以单体为主,HMME在40～100μmol/L的白蛋白缓冲液、PBS和细胞悬液中都有不同比例HMME分子发生聚集,且都形成二聚体.HMME在不同溶液中的聚集程度不同,按由难到易依次为:DMSO、白蛋白缓冲液、PBS≈细胞悬液.在常规给药条件下,HMME在体液中的存在形式以单体为主,但在高浓度给药时,部分HMME会聚合成聚集体,应注意聚集对HMME-PDT的影响.

HMME介导的光动力对兔血管平滑肌细胞生长抑制及诱导细胞凋亡的作用

目的:观察原代培养的兔血管平滑肌细胞在HMME-PDT作用下生长的变化及其死亡方式。方法:常规台盼兰染色观察HMME-PDT作用后6h和24 h对细胞的杀伤作用,HMME的浓度为10μg/ml,激光剂量为2.4～9.6 J/cm2;HE染色法观察PDT后24 h细胞形态的变化;流式细胞仪AnnexinⅤ/PI双染法检测细胞死亡方式;共聚焦显微镜观察HMME在线粒体的定位。结果:台盼兰法检测结果显示随着PDT能量密度的增加细胞的存活率逐渐下降,光镜下可见大部分细胞呈死亡或凋亡样改变,AnnexinⅤ/PI法检测显示PDT 24 h后凋亡率可达50.5%,共聚焦显微镜观察到HMME在线粒体内有分布。结论:HMME-PDT能显著抑制兔血管平滑肌细胞的生长,并使其发生明显的凋亡。

风湿性关节炎动物模型中血啉甲醚荧光强度的同步检测研究

光动力疗法的疗效依赖于治疗过程中靶组织中光敏剂的含量或浓度 ,而药物在组织中的分布特性是受动物机体调控的 ,因此 ,同一个体不同组织对光敏剂吸收的时间特性需要同时进行检测才能排除个体之间的差异。建立了一套空间三通道激光诱导荧光同步检测装置 ,并用该装置研究了活体大耳白兔风湿性关节炎模型滑膜、软骨和皮肤对血啉甲醚吸收的时间特性。研究结果表明 ,炎性滑膜组织对血啉甲醚的吸收量远大于软骨和皮肤 ,这一差别在静脉给药即刻就很明显 ,在静脉给药后 2 0min内 ,滑膜中的光敏剂药物含量约为软骨和皮肤中的 6倍。因此 ,对于借助血啉甲醚 ,用光动力疗法治疗风湿性关节炎并采用体外照射治疗方案时 ,从注药即刻开始 ,前 2 0min左右进行光照治疗可能是较好的选择。

血管靶向光动力疗法与血卟啉单甲醚光动力疗法治疗微静脉畸形临床对比研究

目的:比较血管靶向光动力疗法(V-PDT)与血卟啉单甲醚光动力疗法(HMME-PDT)治疗微静脉畸形(原称鲜红斑痣)的临床疗效。方法:选取2017年6月-2018年11月在笔者医院皮肤科就诊的42例微静脉畸形患者,根据治疗方法不同将所有患者分为V-PDT组(20例)和HMME-PDT组(22例),V-PDT组患者给予V-PDT治疗,HMME-PDT组患者给予HMME-PDT治疗。观察并比较两组的有效率、不良反应发生情况以及疼痛评分。结果:HMME-PDT组有效率95.45%,显著高于V-PDT组的70.00%,两组有效率比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。HMME-PDT组不良反应发生率9.09%,显著低于V-PDT组的40.00%,且差异具有统计学意义(P<0.05)。HMME-PDT组手术疼痛评分显著低于V-PDT组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在微静脉畸形患者的治疗过程中,采用HMME-PDT进行治疗,临床疗效更加显著,可显著控制不良反应发生率,值得临床推广应用。

基于HMME的PDT体外灭活HL60实验研究

目的:探讨血卟啉单甲醚(HMME)介导的光动力疗法(HMME-PDT)对HL60细胞的作用及PDT前后HL60细胞表面超微结构的变化。方法:CCK-8法检测光敏剂浓度和光照剂量对HL60细胞抑制率的影响,荧光分光光度计监测PDT过程中光敏剂荧光强度随时间的变化,Fluo 3-AM荧光探针检测不同浓度HMME作用后HL60细胞内Ca2+变化,原子力显微镜观测PDT作用前后不同扫描范围HL60细胞表面的超微结构图。结果:细胞灭活率呈光敏剂浓度-光剂量依赖关系,当HMME为50μg/mL,光照剂量为24 J/cm2时,灭活效率达到70%;随着光照时间的增加,光敏剂的荧光强度不断减弱,下降速率也逐渐变慢;随HMME作用浓度增加,钙离子浓度显著升高;HMME-PDT作用后HL60细胞表面结构出现明显变化。结论:HMME-PDT能有效灭活HL60细胞,光敏剂浓度和光剂量是影响PDT疗效的重要因素,PDT过程中伴随有光漂白现象的发生,细胞凋亡和钙离子浓度增加呈正相关,PDT作用前后细胞出现明显萎缩,细胞膜粗糙度增加。

光动力疗法治疗鲜红斑痣的临床应用

鲜红斑痣(PWS)是一种以皮肤表面毛细血管和毛细血管后微静脉的结构异常为特征的先天性进行性毛细血管畸形。这种明显的外观差异通常被认为是一种身体缺陷,随之而来的社会歧视往往会严重影响患者的情绪和身体健康。海姆泊芬(HMME)是国内新批准的用于治疗PWS的光敏剂,自2017年以来,海姆泊芬光动力疗法(HMME-PDT)被广泛用于PWS患者的治疗。HMME-PDT作为治疗PWS的一种新兴疗法,具有良好的安全性和有效性,是最有前景的治疗策略之一。本文将对HMME-PDT治疗PWS的临床问题进行概述,期待未来有更多的研究以提高治疗的有效性、安全性和舒适性。

半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3在血卟啉单甲醚光动力学疗法中对瘢痕成纤维细胞的作用

目的 探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase 3）在增生性瘢痕成纤维细胞（HSF）经光敏剂血卟啉单甲醚（HMME）诱导的凋亡效应中的作用。方法 将原代培养的HSF分为对照组、HMME-光动力疗法（PDT）组和caspase 3抑制剂（Z-DEVD-FMK）组，经caspase 3-异硫氰酸荧光素（FITC）-碘化丙啶（PI）染色后在荧光显微镜下观察各组细胞内caspase 3的荧光强度。收集各组细胞，在活性caspase 3-FITC单染后，经流式细胞术检测活性caspase 3阳性细胞百分率；在PI单染后，经流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 对照组和caspase 3抑制剂组HSF胞质中caspase 3-FITC荧光微弱，PDT组荧光显著增强；对照组活性caspase 3阳性细胞百分率低，HMME-PDT组（30.86% ± 1.21%）上升，caspase 3抑制剂组（2.46% ± 0.18%）降低，后两组间比较，t = 21.76，P 〈 0.05。PI染色分析表明，对照组凋亡率（2.45% ± 0.22%）低，PDT组（30.54% ± 3.78%）显著升高，两组比较，t = 35.90，P 〈 0.05；caspase 3抑制剂组凋亡率（10.46% ± 2.15%）低于PDT组，但显著高于对照组（t = 27.97，P 〈 0.05）。结论 HMME-PDT诱导HSF发生的凋亡效应与caspase 3的激活密切相关，但该凋亡效应并不依赖于caspase 3。

光动力疗法对口腔生物膜致龋病变形链球菌及远缘链球菌作用研究

目的:体外构建符合人体生理环境的龋齿模型,探讨光动力疗法(Photodynamic therapy,PDT)防龋过程中,PDT对口腔生物膜中致龋菌变形链球菌以及远缘链球菌的作用;分析PDT防龋不同剂量的光敏剂以及激光能量对龋齿菌斑抑菌效果的影响,为防龋的临床实践提供实验依据。方法:通过体外远缘链球菌和变形链球菌体外抑菌实验,选择合适的光敏剂和激光剂量;选用变形链球菌以及远缘链球菌在体外构建符合人体生理环境的龋齿模型,并对人工龋模型中口腔生物膜生长曲线进行检测,以及釉质块表面显微硬度测定;检测HMME-PDT对细菌生长活力以及产酸的影响,采用显微硬度分析龋齿表面硬度变化,探讨PDT防龋的作用机制。结果:通过在体外对变形链球菌以及远缘链球菌的培养实验,选定HMME-PDT防龋的最佳HMME剂量为50μg/ml,激光光照剂量为78J/cm2;将牙釉质与致龋菌的共培养成功构建人工龋模型,人工龋齿组釉质表面显微硬度显著低于致龋前,差异有统计学意义(P<0.05);口腔生物膜内致龋菌的生成曲线在第3天达到平台期;PDT防龋可有效的抑制人工龋口腔生物膜中远缘链球菌以及变形链球菌的生长活力和产酸能力,相比于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),从而维持人工龋釉质块表面显微硬度,并显著高于其他组,差异有统计学意义(P<0.05);在大鼠龋齿模型中,PDT治疗能够显著改善大鼠牙龈上皮组织,骨组织等的异常。结论:选择合适的光敏剂剂量以及最佳的激光光照剂量,可有效的抑制人工龋口腔生物膜中远缘链球菌以及变形链球菌的生长活力,抑制其产酸能力,从而防止釉质的表面显微硬度进一步被破坏,HMME-PDT在龋齿的治疗中有着重要的临床价值。

光动力疗法联合超声龈下刮治术和根面平整术治疗重度慢性牙周炎的临床研究

目的比较光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)联合超声龈下刮治术和根面平整术(Ultrasonic scaling and root planing,USRP)与超声联合手工龈下刮治术和根面平整术(Manual scaling and root planing,MSRP)治疗重度慢性牙周炎的临床疗效。方法重度慢性牙周炎患者20例,以自身为对照,每个患者选取牙周探诊深度(Probing depth,PD)≥7 mm的位点,随机分为实验组(USRP+PDT)和对照组(USRP+MSRP)。实验组在USRP后做一次光动力治疗,对照组在USRP后进行彻底地MSRP。对两组术前、术后1和3个月的探诊出血(bleeding on probing,BOP)、牙龈退缩(gingival recession,GR)、牙周探诊深度(Probing depth,PD)和牙龈出血指数(bleeding Index,BI)进行比较分析。结果术前两组相关数据比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后1和3个月两组患者的PD、BOP、BI和GR数值,与治疗前比较均有显著改变,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组PD、BOP、BI和GR数值较对照组改善不显著,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PDT可作为牙周传统治疗方法的一种有发展潜力的辅助治疗手段。

光动力治疗鲜红斑痣模型中单态氧分布初步研究

应用MonteCarlo方法对一种含单血管的组织模型中光分布进行仿真 ,结合光敏剂血啉甲醚 (HMME)分布得出血管中单态氧的分布。为临床上采用光动力疗法 (PDT)治疗鲜红斑痣提供了一个参考。