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hMSH2反义核糖核酸表达质粒的构建
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作者 钱瑛 余应年 +2 位作者 陈星若 罗建红 谢海洋 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期139-143,共5页
利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),特异地扩增HeLa细胞中hMSH2cDNA的最保守区域,并将其克隆到TA载体,从重组质粒两端进行序列分析,证实为目的片段.将该目的片段反向克隆到哺乳动物表达载体pREP9的B... 利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),特异地扩增HeLa细胞中hMSH2cDNA的最保守区域,并将其克隆到TA载体,从重组质粒两端进行序列分析,证实为目的片段.将该目的片段反向克隆到哺乳动物表达载体pREP9的BamHⅠ和KpnⅠ位点之间,筛选后得pREP9-hMSH2反义表达重组质粒.用磷酸钙-DNA共沉淀法将重组质粒DNA及载体DNA分别导入HeLa细胞,经G418筛选,扩大培养.凝胶阻滞实验证实转染有pREP9-hMSH2重组质粒的HeLa-MSH2-细胞抽提物中G·T和A·C错配结合蛋白质表达明显降低。 展开更多
关键词 hmshz CDNA 质粒 构建
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DNA错配修复基因与大肠癌发生关系探讨
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作者 任舒月 陈春生 +2 位作者 隋承光 陈红 任常山 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期146-148,共3页
目的:检测散发大肠癌患者的hMSH2基因突变及基因组DNA不稳定,以探讨与其发生的关系。方法:PCR、SSCP和DNA序列分析用于检测35例大肠癌患者hMSH2突变和微卫星不稳定。结果:5例患者发现生殖系细胞hMSH... 目的:检测散发大肠癌患者的hMSH2基因突变及基因组DNA不稳定,以探讨与其发生的关系。方法:PCR、SSCP和DNA序列分析用于检测35例大肠癌患者hMSH2突变和微卫星不稳定。结果:5例患者发现生殖系细胞hMSH2突变(外显子72例,82例,151例),2例肿瘤细胞hMSH2突变(外显子7和8各1例),3例DNA序列分析有2例为错义突变,1例为同义突变。微卫星不稳定在9例患者存在。结论:大肠癌中存在hMSH2基因突变和微卫星不稳定,与大肠癌的发生密切相关。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 DNA错配修复 hmshz 基因突变
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hMSH2基因在散发卵巢癌中突变研究
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作者 任舒月 杨滨 +2 位作者 任常山 隋承光 陈红 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期247-249,共3页
目的:研究卵巢癌患者DNA错配修复基因hMSH2(HumanmutShomolog)基因突变,同时检测其基因组微卫星D2S123序列变化。方法:应用PCR、PCR-SSCP和DNA序列分析方法检测了15例卵巢癌患者正... 目的:研究卵巢癌患者DNA错配修复基因hMSH2(HumanmutShomolog)基因突变,同时检测其基因组微卫星D2S123序列变化。方法:应用PCR、PCR-SSCP和DNA序列分析方法检测了15例卵巢癌患者正常细胞和肿瘤细胞中的hMSH2基因突变。结果:3例患者存在hMSH2基因生殖细胞或体细胞突变,序列分析表明有碱基置换的同义突变,有碱基丢失产生的无义突变。有3例患者基因组表现D2S123变化,其中1例检测到hMSH2突变。结论:hMSH2基因突变和卵巢癌发生有关。机理可能为其突变引起基因组不稳定,而引起一系列基因变化。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 hmshz基因 基因突变 DNA修复基因
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