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hMSH2反义核糖核酸表达质粒的构建
1
作者
钱瑛
余应年
+2 位作者
陈星若
罗建红
谢海洋
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第2期139-143,共5页
利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),特异地扩增HeLa细胞中hMSH2cDNA的最保守区域,并将其克隆到TA载体,从重组质粒两端进行序列分析,证实为目的片段.将该目的片段反向克隆到哺乳动物表达载体pREP9的B...
利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),特异地扩增HeLa细胞中hMSH2cDNA的最保守区域,并将其克隆到TA载体,从重组质粒两端进行序列分析,证实为目的片段.将该目的片段反向克隆到哺乳动物表达载体pREP9的BamHⅠ和KpnⅠ位点之间,筛选后得pREP9-hMSH2反义表达重组质粒.用磷酸钙-DNA共沉淀法将重组质粒DNA及载体DNA分别导入HeLa细胞,经G418筛选,扩大培养.凝胶阻滞实验证实转染有pREP9-hMSH2重组质粒的HeLa-MSH2-细胞抽提物中G·T和A·C错配结合蛋白质表达明显降低。
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关键词
hmshz
CDNA
质粒
构建
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职称材料
DNA错配修复基因与大肠癌发生关系探讨
2
作者
任舒月
陈春生
+2 位作者
隋承光
陈红
任常山
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第2期146-148,共3页
目的:检测散发大肠癌患者的hMSH2基因突变及基因组DNA不稳定,以探讨与其发生的关系。方法:PCR、SSCP和DNA序列分析用于检测35例大肠癌患者hMSH2突变和微卫星不稳定。结果:5例患者发现生殖系细胞hMSH...
目的:检测散发大肠癌患者的hMSH2基因突变及基因组DNA不稳定,以探讨与其发生的关系。方法:PCR、SSCP和DNA序列分析用于检测35例大肠癌患者hMSH2突变和微卫星不稳定。结果:5例患者发现生殖系细胞hMSH2突变(外显子72例,82例,151例),2例肿瘤细胞hMSH2突变(外显子7和8各1例),3例DNA序列分析有2例为错义突变,1例为同义突变。微卫星不稳定在9例患者存在。结论:大肠癌中存在hMSH2基因突变和微卫星不稳定,与大肠癌的发生密切相关。
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关键词
大肠肿瘤
DNA错配修复
hmshz
基因突变
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职称材料
hMSH2基因在散发卵巢癌中突变研究
3
作者
任舒月
杨滨
+2 位作者
任常山
隋承光
陈红
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第3期247-249,共3页
目的:研究卵巢癌患者DNA错配修复基因hMSH2(HumanmutShomolog)基因突变,同时检测其基因组微卫星D2S123序列变化。方法:应用PCR、PCR-SSCP和DNA序列分析方法检测了15例卵巢癌患者正...
目的:研究卵巢癌患者DNA错配修复基因hMSH2(HumanmutShomolog)基因突变,同时检测其基因组微卫星D2S123序列变化。方法:应用PCR、PCR-SSCP和DNA序列分析方法检测了15例卵巢癌患者正常细胞和肿瘤细胞中的hMSH2基因突变。结果:3例患者存在hMSH2基因生殖细胞或体细胞突变,序列分析表明有碱基置换的同义突变,有碱基丢失产生的无义突变。有3例患者基因组表现D2S123变化,其中1例检测到hMSH2突变。结论:hMSH2基因突变和卵巢癌发生有关。机理可能为其突变引起基因组不稳定,而引起一系列基因变化。
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关键词
卵巢肿瘤
hmshz
基因
基因突变
DNA修复基因
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职称材料
题名
hMSH2反义核糖核酸表达质粒的构建
1
作者
钱瑛
余应年
陈星若
罗建红
谢海洋
机构
浙江医科大学病理生理学教研室
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第2期139-143,共5页
基金
国家自然科学基金
文摘
利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),特异地扩增HeLa细胞中hMSH2cDNA的最保守区域,并将其克隆到TA载体,从重组质粒两端进行序列分析,证实为目的片段.将该目的片段反向克隆到哺乳动物表达载体pREP9的BamHⅠ和KpnⅠ位点之间,筛选后得pREP9-hMSH2反义表达重组质粒.用磷酸钙-DNA共沉淀法将重组质粒DNA及载体DNA分别导入HeLa细胞,经G418筛选,扩大培养.凝胶阻滞实验证实转染有pREP9-hMSH2重组质粒的HeLa-MSH2-细胞抽提物中G·T和A·C错配结合蛋白质表达明显降低。
关键词
hmshz
CDNA
质粒
构建
Keywords
genes, mismatch repair
hMSH2
RNA, antisense
mismatch binding protein
分类号
Q522 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
DNA错配修复基因与大肠癌发生关系探讨
2
作者
任舒月
陈春生
隋承光
陈红
任常山
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第2期146-148,共3页
文摘
目的:检测散发大肠癌患者的hMSH2基因突变及基因组DNA不稳定,以探讨与其发生的关系。方法:PCR、SSCP和DNA序列分析用于检测35例大肠癌患者hMSH2突变和微卫星不稳定。结果:5例患者发现生殖系细胞hMSH2突变(外显子72例,82例,151例),2例肿瘤细胞hMSH2突变(外显子7和8各1例),3例DNA序列分析有2例为错义突变,1例为同义突变。微卫星不稳定在9例患者存在。结论:大肠癌中存在hMSH2基因突变和微卫星不稳定,与大肠癌的发生密切相关。
关键词
大肠肿瘤
DNA错配修复
hmshz
基因突变
Keywords
colorectal cancer
DNA mismatch repair
分类号
R735.34 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
hMSH2基因在散发卵巢癌中突变研究
3
作者
任舒月
杨滨
任常山
隋承光
陈红
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第3期247-249,共3页
文摘
目的:研究卵巢癌患者DNA错配修复基因hMSH2(HumanmutShomolog)基因突变,同时检测其基因组微卫星D2S123序列变化。方法:应用PCR、PCR-SSCP和DNA序列分析方法检测了15例卵巢癌患者正常细胞和肿瘤细胞中的hMSH2基因突变。结果:3例患者存在hMSH2基因生殖细胞或体细胞突变,序列分析表明有碱基置换的同义突变,有碱基丢失产生的无义突变。有3例患者基因组表现D2S123变化,其中1例检测到hMSH2突变。结论:hMSH2基因突变和卵巢癌发生有关。机理可能为其突变引起基因组不稳定,而引起一系列基因变化。
关键词
卵巢肿瘤
hmshz
基因
基因突变
DNA修复基因
Keywords
ovarian cancer
DNA repair gene
分类号
R737.31 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
hMSH2反义核糖核酸表达质粒的构建
钱瑛
余应年
陈星若
罗建红
谢海洋
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998
0
下载PDF
职称材料
2
DNA错配修复基因与大肠癌发生关系探讨
任舒月
陈春生
隋承光
陈红
任常山
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1998
0
下载PDF
职称材料
3
hMSH2基因在散发卵巢癌中突变研究
任舒月
杨滨
任常山
隋承光
陈红
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1998
0
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职称材料
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