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番鸭源禽1型副黏病毒HN基因主要抗原结构域和V基因融合表达载体的构建
1
作者
傅光华
程龙飞
+3 位作者
施少华
陈红梅
彭春香
黄瑜
《吉林农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期84-87,101,共5页
为构建番鸭源禽1型副黏病毒HN主要抗原结构域(HNd)和V基因融合表达载体,经PCR及融合PCR分别从重组质粒pMDHN和pMDP中扩增HN基因主要结构域和V基因cDNA。将HNd经KpnⅠ和BamHⅠ双酶切、V基因用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,分别定向插入真核载体...
为构建番鸭源禽1型副黏病毒HN主要抗原结构域(HNd)和V基因融合表达载体,经PCR及融合PCR分别从重组质粒pMDHN和pMDP中扩增HN基因主要结构域和V基因cDNA。将HNd经KpnⅠ和BamHⅠ双酶切、V基因用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,分别定向插入真核载体pcDNA3的多克隆位点相应的酶切位点中,对2个单表达质粒pcDNAHNd和pcDNAV进行酶切和测序鉴定。利用融合PCR技术扩增出HNd-V基因,定向克隆至pcDNA3的EcoRⅠ和XhoⅠ酶切酶切位点之间,转化感受态细胞后,经PCR反应初筛后,对阳性克隆进行酶切分析及测序鉴定。对单表达重组质粒进行酶切分析及测序鉴定,结果表明:HNd和V基因已被正确定向克隆至真核表达载体pcDNA3,成功构建了2个基因的单表达质粒pcDNAHNd和pcDNAV;对融合重组质粒酶切分析和测序鉴定表明,HNd-V融合基因正确克隆进真核表达质粒pcDNA3中,成功构建了融合表达载体pcDNAHNd-V。
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关键词
番鸭源
禽1型副黏病毒
hn基因主要结构域
V
基因
融合表达载体
下载PDF
职称材料
题名
番鸭源禽1型副黏病毒HN基因主要抗原结构域和V基因融合表达载体的构建
1
作者
傅光华
程龙飞
施少华
陈红梅
彭春香
黄瑜
机构
福建省农业科学院畜牧兽医研究所
出处
《吉林农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期84-87,101,共5页
基金
国家"973"重点基础研究发展计划专项子课题(2005CB523001)
国家自然科学基金项目(30671564)
福建省财政专项--福建省农科院科技创新团队建设基金项目(STIF-Y02)
文摘
为构建番鸭源禽1型副黏病毒HN主要抗原结构域(HNd)和V基因融合表达载体,经PCR及融合PCR分别从重组质粒pMDHN和pMDP中扩增HN基因主要结构域和V基因cDNA。将HNd经KpnⅠ和BamHⅠ双酶切、V基因用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,分别定向插入真核载体pcDNA3的多克隆位点相应的酶切位点中,对2个单表达质粒pcDNAHNd和pcDNAV进行酶切和测序鉴定。利用融合PCR技术扩增出HNd-V基因,定向克隆至pcDNA3的EcoRⅠ和XhoⅠ酶切酶切位点之间,转化感受态细胞后,经PCR反应初筛后,对阳性克隆进行酶切分析及测序鉴定。对单表达重组质粒进行酶切分析及测序鉴定,结果表明:HNd和V基因已被正确定向克隆至真核表达载体pcDNA3,成功构建了2个基因的单表达质粒pcDNAHNd和pcDNAV;对融合重组质粒酶切分析和测序鉴定表明,HNd-V融合基因正确克隆进真核表达质粒pcDNA3中,成功构建了融合表达载体pcDNAHNd-V。
关键词
番鸭源
禽1型副黏病毒
hn基因主要结构域
V
基因
融合表达载体
Keywords
muscovy duck original
avian paramyxovirus type 1
major antigenic domains of
hn
gene
V gene
fusion gene expression vector
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
番鸭源禽1型副黏病毒HN基因主要抗原结构域和V基因融合表达载体的构建
傅光华
程龙飞
施少华
陈红梅
彭春香
黄瑜
《吉林农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
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