尖吻蝮蛇毒组分Ⅰ对人口腔鳞状细胞癌HN4细胞凋亡及自噬的影响

目的探索尖吻蝮蛇毒组分I(AAVC-I)在人口腔鳞状细胞癌中促进细胞凋亡的作用及对自噬的影响。方法将所培养的人口腔鳞癌HN4细胞随机分为4组:对照组,AAVC-I低浓度组(2.5μg/mL),AAVC-I中浓度组(5μg/mL),AAVC-I高浓度组(10μg/mL)。将尖吻蝮蛇毒组分I冻干粉溶于培养基中,在肿瘤细胞的对数生长期加入不同浓度AAVC-I,对照组给予相应剂量的溶剂,24 h后取标本,MTT检测肿瘤细胞的抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot及免疫组织化学染色法检测Caspase-3蛋白的表达情况,采用JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,免疫荧光法检测自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白的表达。结果与对照组相比,给予AAVC-I低、中、高不同浓度干预后,肿瘤细胞的增殖受抑制(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.01),肿瘤细胞Caspase-3表达量增加(P<0.05),线粒体膜电位下降(P<0.05),免疫荧光显示LC3的表达量增加(P<0.05),并呈浓度依赖性。结论AAVC-I可以抑制口腔鳞状细胞癌HN4细胞的增殖,可能机制为线粒体膜电位改变及Caspase-3蛋白的表达增加有关,同时AAVC-I增加自噬活性。

SATB2在口腔鳞癌中的表达及对细胞增殖的影响

目的:检测核基质蛋白特异AT序列结合蛋白2(SATB2)在口腔鳞癌组织中的表达,探讨其对口腔鳞癌细胞增殖的影响。方法:采用实时定量RT-PCR和Western blot分别检测口腔鳞癌组织及HN4细胞系中SATB2的基因和蛋白的表达情况;采用免疫荧光染色检测SATB2在HN4细胞系中的分布情况;通过转染慢病毒的方法过表达SATB2后,CCK-8实验检测其对口腔鳞癌细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测细胞周期相关蛋白P63、Cyclin B1及细胞内STAT3磷酸化水平;构建裸鼠荷瘤实验模型,观察其对移植瘤生长的影响。结果:SATB2在口腔鳞癌组织及HN4细胞系中呈高表达,而在癌旁组织和人口腔角质细胞中呈低表达(P<0.05);SATB2基因过表达后显著促进口腔鳞癌细胞的增殖能力,上调细胞周期相关蛋白P63、Cyclin B1,细胞内STAT3磷酸化明显上升,促进体内移植瘤的生长(P<0.05)。结论:SATB2在口腔鳞癌组织及细胞系中表达升高,过表达SATB2能促进肿瘤细胞的增殖能力。