干扰长链非编码RNA AFAP1-AS1抑制人鼻咽癌HNE2细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的研究

目的:探讨短发卡RNA(shRNA)干扰长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(lncRNA AFAP1-AS1)对人鼻咽癌(NPC)细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的影响。方法:将HNE2细胞培养制成细胞悬液后分为空白对照组(Control)、阴性对照组(shRNA-NC)与lncRNA AFAP1-AS1干扰组(sh-AFAP1-AS1),通过试剂盒转入对应目的片段,进行RT-PCR验证;结晶紫染色法检测细胞增殖,FCM检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平,免疫组织化学法检测VEGF表达TUNEL检测肿瘤组凋亡,将转染sh-AFAP1-AS1成功的HNE2细胞及其阴性对照细胞悬浮液分别于右腋下静脉注入裸鼠体内,以成瘤直径超过5 mm为抑制成功。2周后比较2组裸鼠肿瘤重量、AFAP1-AS1表达量、肿瘤组织细胞凋亡、VEGF表达变化。结果:sh-AFAP1-AS1细胞AFAP1-AS1表达水平和细胞增殖率低于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞凋亡率高于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞的侵袭率低于Control组(P<0.05),sh-AFAP1-AS1细胞中VEGF和MMP-9蛋白表达水平较Control组显著降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤质量、AFAP1-AS1表达量均较Control组降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤组织的细胞凋亡率高于Control组(P<0.05),肿瘤组织中VEGF表达量低于Control组(P<0.05)。结论:AFAP1-AS1可能通过调控癌细胞增殖、转移及侵袭相关蛋白表达参与NPC HNE2细胞的增殖、侵袭及转移过程。

6-姜烯酚对鼻咽癌的作用及机制研究

目的:探究6-姜烯酚对人鼻咽癌CNE2和HNE2细胞增殖、凋亡和迁移的影响并初步探究其机制。方法:6-姜烯酚处理组采用6-姜烯酚(25μmol·L^(-1))处理鼻咽癌CNE2和HNE2细胞,对照组加入同体积DMSO,空白组不做处理;48 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡情况,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot检测凋亡、增殖、上皮-间充质转化相关蛋白表达情况。结果:与空白组和对照组比较,6-姜烯酚处理组细胞增殖明显被抑制,凋亡细胞明显增加,PCNA蛋白表达水平明显降低,Caspase-3蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);划痕实验划线48 h后,6-姜烯酚处理组的缝隙间距明显大于空白组和对照组,EMT相关蛋白表达水平显著改变,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:6-姜烯酚可抑制CNE2和HNE2细胞增殖和迁移并促进其凋亡。