miR-802靶向Hnf1B抑制胰岛素分泌的作用研究

探究miR-802对于胰岛β细胞分泌胰岛素的影响及其作用机制。利用miR-802类似物及miR-802抑制剂分别在胰岛原代细胞及Min6细胞过表达或敲降miR-802;采用ELISA法检测miR-802对胰岛素分泌的影响;通过miRNA靶基因数据库预测、荧光素酶报告法和Western blot法确证miR-802的靶基因;最后开展功能回复实验阐明miR-802调控胰岛β细胞分泌胰岛素的作用机制。结果表明:在胰岛原代细胞和Min6细胞中过表达miR-802能抑制胰岛β细胞分泌胰岛素;qPCR和Western blot实验证明miR-802通过抑制靶基因肝细胞核因子1B(hepatocyte nuclear factor 1β,Hnf1B)的转录和翻译,从而抑制胰岛素的分泌。

HNF1A和HNF1B基因遗传变异与乳腺癌遗传易感性的关联研究

目的:研究肝细胞核因子(hepatocyte nuclear factor 1,HNF)1A和HNF1B基因遗传变异与乳腺癌遗传易感性之间的相关性。方法:采用病例对照研究,选取1032例经病理组织学确诊的乳腺癌患者以及与之相匹配的1063例健康女性对照,应用Illumina基因分型平台对HNF1A和HNF1B基因多态位点进行基因分型检测;在调整年龄、初潮年龄、绝经状态的基础上,通过Logistic回归计算OR值及95%CI,比较不同基因型与乳腺癌发病风险之间的相关性。结果:位于HNF1A基因上的3个位点与中国人群乳腺癌发病风险显著相关,其中包括HNF1A基因外显子区的rs2464196(OR=0.80,95%CI:0.71~0.91,P=7.45×10^(-4)),HNF1A基因内含子区的rs1183910(OR=0.87,95%CI:0.77~0.99,P=0.039)和rs7310409(OR=0.86,95%CI:0.76~0.98,P=0.023)。进一步FDR校正后,rs2464196位点与乳腺癌易感性仍然存在着显著的相关性(P=4.47×10^(-3))。结论:肝细胞核因子HNF1A基因上的rs2464196多态位点可能是中国人群乳腺癌的易感标志物。

重编程诱导犬脂肪间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化

本研究旨在利用转基因技术诱导脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,AMSCs)分化为胰岛素分泌细胞(insulin producing cells,IPCs),通过干细胞疗法达到临床治疗糖尿病的目的。本试验首先验证了Hnf1b基因在体外诱导犬AMSCs向IPCs分化中的作用,在此基础上联合胰岛细胞发育过程中起关键作用的级联调控因子Pdx1、Ngn3、Pax4、Nkx6.1,组成三种不同的多基因共表达腺病毒感染犬AMSCs,重编程其向IPCs分化,通过检测筛选出最佳诱导组合。结果表明,Hnf1b基因对体外诱导犬AMSCs向IPCs分化具有促进作用。pAdEasy-Hnf1b-Pdx1-Ngn3(A)、pAdEasy-Hnf1b-Pdx1-Ngn3-Pax4(B)、pAdEasy-Hnf1b-Pdx1-Ngn3-Nkx6.1(C)三种组合的多基因共表达腺病毒载体,在感染犬AMSCs 25 d后,A、B、C三组均形成胰岛样细胞团,且B组数量最多,双硫腙染色着色最深;高糖刺激下B组的胰岛素分泌量极显著高于A组和C组。A、B、C三组的胰岛细胞发育相关基因表达量显著升高;B组Pdx1基因的表达量显著高于A组和C组,Pcsk1基因表达量极显著高于C组;Ins基因的表达量显著高于A组。综上所述,Hnf1b基因对体外诱导犬AMSCs向IPCs分化具有促进作用,Hnf1b、Pdx1、Ngn3和Pax4基因联合诱导效率最佳。该研究结果为探究干细胞向IPCs分化的更高效方法提供新参考,也为糖尿病的临床治疗提供新思路。

HNF1B基因相关疾病临床表型分析

目的 了解HNF1B基因相关疾病临床表型.方法 选择2013至2017年在北京大学第一医院儿科和妇产科住院、门诊就诊的不明原因肾功能减退的4例患者（例1、2、4为男性患儿,例3为成年女性患者）,胎儿期肾脏超声异常的胎儿3例,经目标区域捕获二代测序、实时定量PCR或Sanger测序验证检测到HNF1B基因突变.以其为研究对象,回顾性分析其肾脏影像、血生化、尿液常规和其他必要检查结果.结果 4例患者中,例1和例4自胎儿期起病,例2和例3分别于13岁和28岁起病;除例3外,其余3例患者均有不同程度的肾功能减退;例4尚表现有肾病综合征和糖尿,例2尚表现有早发的甲状旁腺功能亢进和肾性骨病,例3尚有糖尿病;仅例3有肾脏病家族史,其余3例患者均无肾脏病家族史;4例患者均有肾脏结构异常,包括双肾多发囊肿、肾脏小和肾脏高回声.3例胎儿均经产前超声检查发现肾脏高回声,伴或不伴肾脏囊肿;仅1例胎儿羊水过多;2例胎儿有肾脏病家族史.结论 HNF1B基因相关疾病临床表型存在异质性,肾脏受累最为常见,多表现为肾脏囊肿,儿童期会出现肾功能减退;胎儿期肾脏超声显示肾脏高回声或肾脏囊肿者应想到HNF1B基因相关疾病的可能.

一例婴儿型多囊肾病胎儿的HNF1B基因新发变异分析

目的对一例婴儿型多囊肾病胎儿的HNF1B基因变异进行分析, 明确其致病原因。方法收集引产胎儿的新鲜组织及其父母外周静脉血样, 提取基因组DNA, 进行全外显子测序分析, 筛查出与临床表型相关的变异位点, 并通过Sanger测序进行位点验证。结果胎儿组织样本中检测到HNF1B基因的一个c.1370C>T(p.P457L) 杂合变异, 其父母为正常。该变异经检索相关数据库及文献均未见报道为新变异。结论 HNF1B基因的c.1370C>T新发杂合变异可能为婴儿型多囊肾的致病原因。本研究结果为该病的遗传咨询和临床产前诊断提供了依据。

HNF1B基因多态性与前列腺癌发病风险相关性的Meta分析

目的系统评价HNF1B基因多态性与前列腺癌发病风险的相关性。方法计算机检索Pub Med、EMbase、The Cochrane Library、CNKI、CBM和Wan Fang Data数据库,搜集有关HNF1B基因多态性与前列腺癌发病风险相关性的病例-对照研究,检索时限均从建库至2017年12月。由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用Stata 14.0软件进行Meta分析。结果共纳入15个病例-对照研究,包括病例组30 532例、对照组38 832例。Meta分析结果显示,HNF1B基因rs4430796多态性[G vs.A:OR=0.802,95%CI(0.784,0.821),P<0.001;GG vs.AA:OR=0.659,95%CI(0.606,0.717),P<0.001;AG vs.AA:OR=0.762,95%CI(0.714,0.814),P<0.001)],rs11649743多态性[A vs.G:OR=0.875,95%CI(0.820,0.941),P<0.001;AA vs.GG:OR=0.669,95%CI(0.564,0.792),P<0.001;AG vs.GG:OR=0.855,95%CI(0.798,0.916),P<0.001)];rs7501939多态性[A vs.G:OR=0.833,95%CI(0.807,0.859),P<0.001],rs3760511多态性[A vs.C:OR=0.834,95%CI(0.803,0.868),P<0.001]均与前列腺癌发病风险存在显著相关性。结论当前证据表明,HNF1B基因多态性与前列腺癌发病风险存在显著相关性。受纳入研究数量和质量的限制,上述结论尚待更多高质量研究予以验证。

肝功能异常的少见原因:肾囊肿和糖尿病综合征1例

报道1例以肝功能异常及血红蛋白升高起病,最终诊断肾囊肿和糖尿病综合征的病例。患者诊治过程曲折,期间经历了多家医院就诊、3次肝穿刺组织学检查,但病因一直未能明确。最终,通过基因检测等检查确诊。