HNRNPU在重度少、弱精子症的表达及其对卵泡浆内单精子显微注射治疗临床结局的影响

目的探讨严重少、弱精子症患者精液精子中HNRNPU的表达及其与精子质量参数的相关性,探讨其对卵泡浆内单精子显微注射(ICSI)治疗临床结局的影响。方法选取严重少、弱精子症需行ICSI治疗患者和正常生育男性各500例,收集精液,采用RT-PCR检测精子HNRNPU mRNA;计算机辅助精液分析系统(CASA)分析精液常规参数;Diff-Quik染色法分析精子形态;采用钙离子载体A23187诱导精子发生顶体反应(ARIC);SCD法检测精子DNA碎片化指数(DFI);苯胺蓝染色法检测精子核成熟度;记录ICSI组的治疗结局。结果ICSI组HNRNPU mRNA相对量显著高于正常组精子[(0.38±0.04)vs.(0.14±0.03),P<0.05],ICSI组正常形态精子百分率、ARIC%和核成熟度均低于正常组,差异均有统计学意义(P<0.001);HNRNPU mRNA与前向运动精子总数、正常形态精子百分率、ARIC%和核成熟度呈负相关,与DFI呈正相关(P<0.001);选择研究时间内,女方采用长效长方案促排卵,并行新鲜胚胎移植的104个ICSI治疗周期,男方精子HNRNPU基因mRNA与前向运动精子总数和正常受精(2PN)率呈负相关(P<0.05),但与卵裂率、优胚率和临床妊娠率无显著相关性。结论精子HNRNPU mRNA表达上调可能是严重少、弱精子症发病的原因之一;对ICSI受精率有一定的预测作用。

HNRNPU基因杂合突变致神经发育综合征一例并文献复习

异质核糖核蛋白U(heterogeneousnuclearribonucle oprotein U,hnRNP U)又被称为支架附着因子A(scaffold attachment factor A,SAF-A),属于异质核糖核蛋白亚家族,在胎儿大脑、成人心脏、肾脏、肝脏、大脑和小脑中表达,在哺乳动物的发育中起着至关重要的作用。HNRNPU基因编码异质核蛋白U,该基因定位于染色体1q44区域内,该区域的DNA改变可引起常染色体1q43-q44缺失综合征,出现发育迟缓、智力障碍、小头畸形、癫痫发作、畸形面部特征、胼胝体发育不良、以及心脏、肾脏发育畸形等临床表现。

hnRNPU基因敲减小鼠preB A70细胞株的构建及鉴定

目的构建shRNA-不均一核糖核蛋白U(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein U,hnRNPU)慢病毒表达载体以及hnRNPU基因稳定敲减的小鼠preB A70细胞株。方法将靶向小鼠hnRNPU基因的shRNA干扰序列连接入pLKO.1-EBFP-PURO质粒中,测序检测。将构建成功的pLKO.1-hnRNPU shRNA-EBFP-PURO和慢病毒包装质粒共转染HEK293T细胞,收集病毒上清。将病毒上清感染A70细胞,利用倒置荧光显微镜观察病毒感染情况,利用Western blot检测hnRNPU蛋白的表达。通过有限稀释方法,构建单细胞克隆,并利用Western blot筛选hnRNPU基因稳定敲减的A70细胞株。结果成功构建了shRNA-hnRNPU慢病毒表达载体。表达shRNA-hnRNPU的慢病毒在HEK293T细胞中完成包装。包装好的病毒感染A70细胞72 h后,细胞内可以观察到蓝色荧光。感染后的细胞经过嘌呤霉素筛选后,细胞内的hnRNPU蛋白大约减少一半。通过有限稀释方法,构建了hnRNPU基因稳定敲减的细胞株。结论本研究成功构建了hnRNPU稳定敲减的A70细胞株,为后续研究hnRNPU在早期B细胞发育中的作用奠定了实验基础。

HNRNPU基因变异致神经发育障碍患儿1例并文献回顾

目的探讨1例HNRNPU基因变异导致神经发育障碍(NDDs)患儿的临床表现及基因变异特征,并检索文献进行回顾性分析。方法回顾性分析2020年12月至武汉科技大学附属孝感医院就诊的1例因"间断抽搐1年余"NDDs患儿的临床资料,收集患儿及其父母的外周血样,进行全外显子组测序并进行Sanger测序验证。以"HNRNPU基因""癫痫""癫痫性脑病""遗传性癫痫""神经发育障碍""神经发育综合征"与"epilepsy""epileptic encephalopathy""hereditary epilepsy""neurodevelopmental disorders""neurodevelopmental syndrome""HNRNPU""NDDs"为中英文关键词,检索时间设定为1994年1月1日至2022年2月10日,检索中国知网、万方数据库及PubMed数据库中相关文献并作总结复习。结果患儿为2岁男性,5月龄起病,临床表型主要为外貌异常、反复癫痫发作、Gesell量表评估各能区发育商偏低。给予患儿丙戊酸钠抗癫痫发作治疗及康复训练,随访半年内无癫痫发作,但智能及运动发育无明显改善。基因检测患儿HNRNPU基因存在c.1720_1722delCTT(p.Lys574del)杂合变异,父母未见该变异。根据美国医学遗传学与基因组学学会变异相关指南,c.1720_1722delCTT评级为可能致病性变异(PS2+PM2_Supporting+PM4)。文献检索到13篇文献,HNRNPU基因变异类型有剪接点变异、无义变异、错义变异、框内缺失、基因重复、移码变异、多个外显子缺失。主要临床表现有发育迟缓、癫痫、智力低下、语言发育落后、颅面畸形、精神行为异常等。结论HNRNPU:c.1720_1722delCTT考虑为该NDDs患儿的致病原因。基因检测有助于儿童NDDs的诊断,变异发现丰富了HNRNPU基因变异致神经发育障碍基因变异谱。

HNRNPU基因杂合突变致发育性和癫痫性脑病54型1例报道

目的探讨HNRNPU基因突变所致发育性和癫痫性脑病54型(DEE54)患儿的临床特征和遗传学特点。方法回顾性分析潍坊医学院附属医院2023年6月收治的一例HNRNPU基因突变患儿的临床资料,并进行相关文献复习。结果本例患儿,男,1岁3个月,于7月龄发热后癫痫发作起病,主要临床特征为智力障碍、癫痫发作、全面发育迟缓、颅面畸形、肌张力低下,癫痫发作类型为全面性强直发作。基因检测提示携带HNRNPU基因c.1305_1308del位点杂合变异,根据ACMG指南,建议将该变异评为致病。患儿确诊为DEE54。结论报道了1例HNRNPU基因c.1305_1308del位点变异导致的DEE54患儿,考虑癫痫伴全面发育迟缓、智力障碍的患儿应及早完善基因检测精准诊断。