筛选自人卵巢癌细胞系HO8910的干细胞生物学特性分析

目的探讨筛选自人卵巢癌细胞系HO8910干细胞的生物学特性。方法将前期筛选卵巢癌细胞系HO8910的干细胞在无血清培养基中进行传代培养,以HO8910细胞作为对照。体外观察两种细胞的球体形成能力;将两种细胞接种于含血清培养基,观察其分化能力,并检测干细胞相关标记物;采用药敏试验检测两种细胞对顺铂、多柔比星及米托蒽醌的敏感性;将无血清培养基中进行传代培养的两种细胞接种于NOD/SCID裸鼠,观察其体内成瘤情况。结果 HO8910细胞在无血清培养基中的球体形成能力明显低于卵巢癌细胞(P<0.05)。卵巢癌干细胞分化前CD133、CD117阳性表达率明显高于分化后(P均<0.05)。卵巢癌干细胞分化后ABCG2、Nanog、Oct4、BCRP、E-cadherin表达均低于分化前(P均<0.05),与HO8910细胞分化前后上述指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。0.25、0.5μg/m L顺铂,0.5、1.5μmol/L多柔比星,0.05、0.25μg/m L米托蒽醌作用于卵巢癌干细胞、HO8910细胞48 h时,卵巢癌干细胞的相对活性均高于HO8910细胞(P均<0.05)。裸鼠接种1×103个卵巢癌干细胞即可成瘤;随着干细胞接种数量的增加,成瘤比率逐渐增加,成瘤时间逐渐缩短(P均<0.05)。结论筛选自人卵巢癌细胞系HO8910的卵巢癌干细胞具有自我更新和分化、体内成瘤、高表达干细胞基因以及对化疗耐药等特性,符合肿瘤干细胞的理论标准。

HE4基因表达载体的构建及对卵巢癌细胞HO8910生长侵袭的影响

目的探讨卵巢癌基因HE4对卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响。方法构建针对HE4基因的PcDNA3.1/HE4载体,脂质体法介导PcDNA3.1/HE4载体转染人浆液性卵巢癌细胞系HO8910,WESTERN-BLOT检测转染前后细胞内HE4蛋白的表达效果。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、平板克隆形成实验观察HE4基因对细胞增殖能力的影响,经细胞粘附实验、体外侵袭力实验比较转染前后细胞侵袭能力的变化。结果Western-blot结果显示PcDNA3.1/HE4载体成功转染HO8910细胞并显著提高该细胞HE4基因的表达,细胞增殖能力较前无明显变化,侵袭能力明显下降。结论通过增强HE4基因表达,可降低其侵袭能力,有望成为卵巢癌基因治疗的新的候选基因。