HOTAIR基因多态性与结直肠癌发病风险

目的探讨HOTAIR基因rs920778、rs4759314、rs1899663多态性位点与结直肠癌(colorectal cancer,CRC)易感性的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法对200例CRC患者和200例健康人对照组HOTAIR基因rs920778、rs4759314和rs1899663多态性位点进行基因分型,并通过SHEsis在线软件构建单倍型。结果 rs1899663基因型频率在病例组和健康人对照组间差异有统计学意义(P=0.009)。与GG基因型相比,该位点TT基因型携带者与CRC发病风险降低相关(OR=0.36,95%CI:0.15~0.84,P=0.019),而GT/TT基因型携带者与CRC的风险降低亦存在相关性(OR=0.56,95%CI:0.37~0.85,P=0.006)。结论 HOTAIR基因rs1899663位点的T等位基因与CRC的发生率降低相关,rs920778和rs4759314位点的多态性与CRC的遗传易感性无关。

干涉lncRNAs HOTAIR对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的影响

目的:探讨利用RNA干涉沉默HOTAIR基因对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的影响。方法:利用脂质体转染MDA-MB-231细胞;qPCR检测HOTAIR基因的表达;检测EMT相关的Snail蛋白水平的表达;流式细胞术检测凋亡率;MTT法检测细胞增殖。结果:干涉HOTAIR基因后细胞中Snail蛋白表达水平下降,细胞凋亡增加。结论:靶向HO-TAIR的序列特异性siRNA可显著抑制HOTAIR基因的表达;干涉HOTAIR基因表达可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。

长链非编码RNA HOTAIR在急性髓系白血病患者外周血中的表达变化及意义

目的观察长链非编码RNA HOTAIR(lncRNA HOTAIR)在急性髓系白血病(AML)患者外周血中的表达变化,并探讨其临床意义。方法选择96例初诊AML患者(诱导化疗86例、完全缓解56例)、30例健康志愿者,采用qRT-PCR法检测AML患者及健康志愿者外周血单核细胞中lncRNA HOTAIR表达;分析HOTAIR表达与AML患者临床病理参数的关系;对完全缓解期56例患者进行随访,采用Kaplan-Meier生存曲线分析lncRNA HOTAIR表达与患者预后的关系。结果初诊AML患者外周血lncRNA HOTAIR相对表达量高于健康志愿者(P<0.05);完全缓解期患者化疗后外周血lncRNA HOTAIR相对表达量低于化疗前(P<0.05)。LncRNA HOTAIR高表达与AML患者年龄、性别、FAB亚型、是否完全缓解及AML危险度分层无关(P均>0.05),与AML患者白细胞计数、血小板、血红蛋白水平有关(P均<0.05)。lncRNA HOTAIR高表达患者化疗完全缓解率低于低表达患者(P=0.000);lncRNA HOTAIR高表达完全缓解患者的总生存时间短于lncRNA HOTAIR低表达完全缓解患者(P=0.000)。结论 AML患者外周血中lncRNA HOTAIR呈高表达,其表达变化可反映AML发生、发展、化疗效果及预后。

贝伐单抗结合培美曲塞与顺铂化疗对非小细胞肺癌患者血清lncRNA H19及lncRNA HOTAIR表达的影响

目的探讨贝伐单抗结合培美曲塞与顺铂化疗对非小细胞肺癌患者血清lncRNA H19及lncRNA HOTAIR表达的影响。方法选择非小细胞肺癌患者150例,根据患者的治疗方案分为观察组和对照组各75例。对照组基于培美曲塞联合顺铂治疗,观察组给予贝伐单抗联合培美曲塞与顺铂治疗,两组均治疗4个疗程后观察治疗效果、免疫功能、细胞因子及lncRNA H19、lncRNA HOTAIR水平。结果治疗后观察组治疗效果显著高于对照组(P<0.05);治疗后两组血管内皮生长因子(VEGF)-A、VEGF-B、VEGF-C水平均显著下降,且观察组下降更显著(P<0.05);治疗后两组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平明显提高,Treg、CD8^(+)细胞水平明显下降,且观察组改善更显著(P<0.05);治疗后两组干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平显著升高,转化生长因子(TGF)-β水平均显著下降,且观察组改善更显著(P<0.05);治疗后两组印迹基因H19长链非编码RNA(lncRNA H19)、同源盒基因转录长链非编码RNA(lncRNA HOTAIR)水平均显著下降,且观察组下降更显著(P<0.05);两组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05);结论贝伐单抗结合培美曲塞与顺铂治疗非小细胞肺癌患者的治疗效果较好,并且可改善机体免疫功能,改善细胞因子水平,降低lncRNA H19、lncRNA HOTAIR水平,在临床上可广泛使用。

HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA在肾细胞癌组织中的表达情况

目的探讨HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA在肾细胞癌组织中的表达情况。方法选取行手术切除的经病理学检查确诊的肾细胞癌患者的肾细胞癌组织标本61例,同时选取对应的癌旁正常肾组织标本61例为对照;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肾细胞癌组织和癌旁正常肾组织中HOTAIR mRNA和EZH2mRNA的表达水平。结果肾细胞癌组织中HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA的相对表达量均明显高于癌旁正常肾组织(P﹤0.01);不同临床分期、淋巴结转移情况肾细胞癌患者的肾细胞癌组织中HOTAIR mRNA和EZH2mRNA的相对表达量比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01);肾细胞癌组织中HOTAIR mRNA的相对表达量为(0.76±0.20),EZH2 mRNA的相对表达量为(2.04±0.51),两者呈正相关(r=0.683,P﹤0.01)。结论 HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA在肾细胞癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常肾组织,检测肾细胞癌患者的HOTAIR、EZH2水平对其肿瘤的恶性程度判断具有一定参考价值。

lncRNA HOTAIR 和H19 SNPs与胃癌及EB病毒相关胃癌遗传易感性的关系

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)H19及HOTAIR基因多态性与胃癌和EB病毒相关胃癌(EBVaGC)易感性的关系。方法:研究对象选择EB病毒阴性胃癌(EBVnGC)组织65例、EBVaGC组织50例及115例健康人外周血标本,并从中提取其DNA备用。选择H19 rs3024270和rs3741219,以及HOTAIR rs4759314和rs874945共4个基因多态性位点,利用Taq-Man MGB等位基因分型试剂盒对各单核苷酸多态性(SNP)位点基因进行分型,统计分析实验结果。结果:H19及HOTAIR的SNPs在全部标本中均符合Hardy-Weinberg平衡。(1)H19 rs3024270位点的SNP在胃癌组与对照组中的差异有统计学意义(P<0.05);其中G等位基因为保护基因,个体携带G等位基因可显著降低罹患胃癌的风险(P<0.01);(2)HOTAIR rs4759314位点在胃癌组与对照组中基因型和等位基因分布频率均有显著差异(P<0.05);基因型为GG的人群,胃癌的发病风险显著增加(P<0.05);且胃癌的风险基因可能是G等位基因,携带G等位基因人群罹患胃癌的风险显著增加(P<0.05);(3)H19 rs3741219及HOTAIR rs874945位点的各基因型及等位基因频率在两组间无显著差异(P>0.05);(4)HOTAIR rs4759314位点G等位基因在EBVaGC组的分布高于EBVnGC组,而EBVaGC和EBVnGC组间其他SNPs的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:H19 rs3024270和HOTAIR rs4759314位点的SNPs与胃癌的发病风险有关,但与EBVaGC的发病风险之间未观察到明确的关联性。

长链非编码RNA HOTAIR在乳腺癌患者中表达及其临床意义

目的采用生物信息方法探讨长链非编码RNA同源异型框基因翻译基因间RNA(HOTAIR)在乳腺癌患者中的表达及其与患者预后关系。方法检索Oncomie数据库中乳腺癌患者HOTAIR基因表达的相关芯片数据。根据HOTAIR表达水平分为高低表达组,并用Kaplan-Meier Plotter数据库中生存数据构建生存曲线,比较高低表达组总生存期(OS)。采用TCGA数据分析乳腺癌患者HOTAIR基因变异情况。同时选取72例乳腺癌患者,q-PCR检测肿瘤组织中HOTAIR表达情况并与患者预后做相关分析。结果Oncomine数据库分析显示,HOTAIR在乳腺癌组织中表达水平明显高于正常乳腺组织(P<0.05);高低表达组239153_at(HR=1.29,95%CI:0.94~1.76,P>0.05)和1557051_s_at(HR=0.92,95%CI:0.67~1.29,P>0.05)两个数据集OS差异无统计学意义(P>0.05),但数据集239153_at呈现出高表达患者生存期较短的趋势。TCGA数据中HOTAIR在乳腺癌中拷贝数异常率为0.1%,HOTAIR表达水平在各种突变情况下差异无统计学意义(P>0.05)。且癌组织显著高于癌旁组织(P<0.05),高表达组生存期显著低于低表达组(HR=1.45,9%CI:1.08~2.32,P<0.05)。结论HOTAIR在乳腺癌中高表达,且可能与患者预后相关,可作为乳腺癌患者预后潜在的分子标志物。

lncRNA-HOTAIR通过靶向负调控miR-1-3p抑制脂多糖诱导的H9c2大鼠心肌细胞增殖并促进炎症反应

目的探讨长链非编码RNA-HOX转录本反义基因间RNA(lncRNA-HOTAIR)是否通过靶向微小RNA miR-1-3p调控脓毒症的炎症反应。方法利用0.5μg/mL脂多糖(LPS)诱导H9c2大鼠心肌细胞,建立脓毒症心肌细胞损伤模型,将H9c2细胞分为对照组、LPS组、LPS联合HOTAIR小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、LPS联合HOTAIR小干扰RNA(si-HOTAIR)组、LPS联合miR-1-3p阴性对照(miR-NC)组、LPS联合miR-1-3p组、LPS联合si-HOTAIR和miR-1-3p拮抗剂阴性(anti-miR-NC)组、LPS联合siHOTAIR和anti-miR-1-3p组。实时定量PCR检测HOTAIR和miR-1-3p表达,CCK-8法检测细胞增殖,Western blot法分析KI-67抗原(ki67)、P21、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)的蛋白表达,流式细胞术评估细胞凋亡,ELISA测定炎性因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。双荧光素酶报告实验分析HOTAIR和miR-1-3p的靶向关系。结果LPS组H9c2细胞中HOTAIR表达量高于对照组,miR-1-3p表达量低于对照组。与LPS联合si-NC组比较,LPS联合si-HOTAIR组LPS处理H9c2细胞增殖活性、ki67、Bcl2表达量增多,P21表达量、凋亡率、BAX表达量、IL-6和TNF-α水平降低。HOTAIR靶向调控miR-1-3p的表达。LPS联合miR-1-3p组较LPS联合miR-NC组的H9c2细胞增殖活性、ki67、Bcl2表达量升高,P21表达量、凋亡率、BAX表达量、IL-6、TNF-α水平降低。与LPS联合si-HOTAIR和anti-miR-NC组比较,LPS联合si-HOTAIR和anti-miR-1-3p组H9c2细胞增殖活性降低、ki67、Bcl2表达减少,P21、BAX表达,细胞凋亡、IL-6、TNF-α水平增加。结论HOTAIR通过靶向负调控miR-1-3p的表达,抑制LPS诱导的H9c2心肌细胞增殖,并诱导细胞凋亡和炎症反应。

长链非编码RNA在肾细胞癌发生、发展中的作用研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸、无蛋白质编码功能的RNA分子,是基因表达与细胞生长、增殖、分化等生理过程相互作用的重要调节因子,在表观遗传学、转录等水平发挥调控作用。肾细胞癌(RCC)是常见的泌尿系统恶性肿瘤,其发病率高,且预后不良。lncRNA的异常表达与RCC的发生、发展有密切关系,其中HOTAIR、MALAT1、SNHGs、ATB、GAS5、MEG3、H19等基因通过相关分子海绵机制介导不同的miRNA,通过激活不同信号传导途径和调节关键标志物表达调控RCC的发生、发展,其中HOTAIR、MALAT1、SNHGs、ATB基因起到促癌作用,GAS5、MEG3基因起到抑癌作用,H19基因则具有抑癌与致癌双重作用。

肿瘤转移新靶点HOTAIR的研究进展

HOX转录反义RNA(HOX transcript antisenseRNA,HOTAIR)是第一个被发现具有反式转录调控作用的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),它能同时结合多梳抑制复合体2(polycomb repressive complex2,PRC2)和组蛋白去甲基化酶复合体[赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1(lysine specific demethylase1,LSD1)/RE1-沉默转录因子(RE1-silencing transcription factor,REST)共阻抑蛋白(Co-repressor of REST,CoREST)/REST],并介导这2种复合体结合到特异性的基因组位点,分别使染色体组蛋白H3第27位赖氨酸三甲基化(histone H3 tri-methyl at edatlysine27,H3K27me3)和组蛋白H3第4位赖氨酸二甲基化(histone H3 dimethyl Lys4,H3K4me2),继而导致基因沉默。临床研究表明,乳腺癌、结肠癌和肝癌等肿瘤组织中HOTAIR的表达水平与肿瘤的转移、复发以及预后紧密相关。肿瘤细胞中高表达HOTAIR能够抑制相关肿瘤转移抑制基因的表达,促进肿瘤恶变;反之,沉默HOTAIR的表达可使肿瘤细胞丧失转移能力。

长链非编码RNA HOTAIR在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA HOX转录反义RNA(HOX transcript antisense RNA,HOTAIR)在宫颈癌中的表达及对宫颈癌He La细胞增殖和凋亡的影响。方法:实时荧光定量PCR法检测36例宫颈癌组织及其相应癌旁组织中HOTAIR mRNA的表达,分析其与宫颈癌患者临床病理特征之间的关系;将靶向HOTAIR基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒液感染人宫颈癌HeLa细胞后,应用CCK-8(cell counting kit-8)法和FCM法分别检测细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的情况。结果:宫颈癌组织中HOTAIR mRNA的表达水平明显高于其相应的癌旁组织(P<0.001);HOTAIR的表达与患者的临床分期、肿瘤大小和淋巴结转移有关(P值均<0.05),而与患者的年龄、组织学类型、分化水平、鳞状细胞癌相关抗原和宫体转移无关(P值均>0.05)。干扰HOTAIR的表达后,HeLa细胞的增殖受到抑制(P<0.05),G0/G1期细胞比率和细胞凋亡率增加(P<0.05,P<0.01)。结论:HOTAIR在宫颈癌组织中表达上调;干扰HOTAIR的表达可抑制HeLa细胞的增殖,并促进其凋亡。

LncRNA HOTAIR/miR-126在喉癌中的表达及相关性

目的探讨喉鳞状细胞癌(LSCC)中长链非编码RNA(LncRNAs)HOX基因座转录反义RNA(HOTAIR)和微小核糖核酸(miR)-126的表达及相关性。方法选取46例LSCC患者的喉癌组织及癌旁正常组织,实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-126和LncRNA HOTAIR表达,分析与肿瘤分化程度的相关性。结果与癌旁正常组织相比,喉癌组织中miR-126表达水平显著降低(P<0.01);生物信息学预测LncRNA HOTAIR的作用靶点是miR-126;喉癌组织中LncRNA HOTAIR表达水平显著升高(P<0.05),且随肿瘤分化程度而增加。结论LncRNA HOTAIR靶向miR-126参与介导LSCC的发生和肿瘤细胞分化。