HOX反义基因间RNA在唾液腺腺样囊性癌组织中的表达及对预后的影响

目的探讨HOX反义基因间RNA(HOTAIR)在唾液腺腺样囊性癌(SACC)患者组织中的表达及对预后的影响。方法选取2007年3月至2014年3月行手术切除治疗的SACC患者86例,同期留取45例正常唾液腺组织,实时荧光定量聚合酶链式反应检测HOTAIR水平,术后随访至2019年3月31日,记录患者死亡情况及生存时间,以SACC患者组织中HOTAIR相对表达量的四分位数为标准,将患者分为低表达组和高表达组,采用Kaplan-Meier法和Log-Rank检验对两组生存时间进行比较;以年龄、性别、肿瘤部位、病理学类型、肿瘤直径、TNM分期、神经侵犯和淋巴结转移为自变量,采用Cox比例风险回归模型对影响生存时间的多因素进行分析。结果SACC组织中HOTAIR相对表达量为2.48±0.22,高于正常唾液腺组织的1.03±0.13,差异有统计学意义(t=39.812,P<0.001);与TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、未发生神经侵犯及淋巴结转移患者相比,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、发生神经侵犯及淋巴结转移SACC患者组织中HOTAIR相对表达量升高(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析结果显示,低表达组患者平均生存时间和累积生存率[(113.32±10.77)个月、72.73%]均高于高表达组[(59.75±6.50)个月、39.06%](P=0.004);Cox比例风险回归模型分析结果显示,神经侵犯、淋巴结转移和HOTAIR高表达是影响SACC患者预后的独立风险因素(HR=3.274、2.971、2.911,P<0.05)。结论HOTAIR在SACC患者组织中呈高表达,与患者不良预后有关,是影响预后的风险因素,有望成为SACC患者预后评估的潜在标志物。

长链非编码RNA HOX转录反义RNA对成骨分化及骨性疾病影响的研究进展

干细胞的成骨分化需要转录因子、信号通路和生物学信号的紧密协调。这种交互网络的失调会影响干细胞和成骨细胞的增殖和凋亡,从而破坏骨代谢和稳态。lncRNAs广泛参与干细胞的成骨分化过程,从而在骨关节炎、骨肿瘤等骨疾病的发生、发展和进展中发挥重要作用。长链非编码RNA HOX转录反义RNA(HOX transcript antisense RNA,HOTAIR)调节干细胞的成骨分化,并在骨形成和相关疾病的发展中起重要的中介作用。现就lncRNA HOTAIR在成骨分化及骨病中的具体作用和机制的相关研究作一综述,以期为未来骨与关节疾病的防治提供新的思路。

血清lncRNA HOTAIR、miR-197-3p水平与精神分裂症患者精神症状及认知功能的相关性

目的探讨血清长链非编码RNA-HOX转录本反义基因间RNA(lncRNA HOTAIR)、微小RNA-197-3p(miR-197-3p)水平与精神分裂症(SCZ)患者精神症状及认知功能的相关性。方法选取2021年4月—2023年3月广州医科大学附属脑科医院精神科诊治SCZ患者118例为研究对象(SCZ组),并选取同期健康体检者110例作为健康对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清lncRNA HOTAIR、miR-197-3p水平,对参与者进行阳性与阴性症状量表(PANSS)评分和认知功能评价;Pearson、Spearman相关系数分析血清lncRNA HOTAIR与miR-197-3p水平及二者与精神症状、认知功能的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA HOTAIR、miR-197-3p水平对SCZ的评估价值。结果与健康对照组比较,SCZ组血清lncRNA HOTAIR表达水平升高,miR-197-3p水平降低(t/P=9.859/<0.001、19.191/<0.001)。生物信息学预测,lncRNA HOTAIR与miR-197-3p存在结合位点。Pearson相关性分析结果显示,SCZ患者血清中lncRNA HOTAIR表达与miR-197-3p表达呈负相关(r=-0.543,P<0.001)。与健康对照组比较,SCZ组阳性症状、阴性症状、一般病理症状及总分均显著升高(t/P=31.623/<0.001、28.219/<0.001、48.918/<0.001、39.574/<0.001),TMT、BACS、WMS-III-SS、BVMT、HVLT、CPT以及SCWT中单次测验、颜色测验评分显著降低(t/P=6.520/<0.001、7.666/<0.001、4.114/<0.001、8.191/<0.001、5.902/<0.001、4.985/<0.001、13.060/<0.001、8.938/<0.001)。SCZ患者lncRNA HOTAIR水平与阴性症状、总分呈正相关(r/P=0.498/<0.001、0.507/<0.001),与TMT、CPT呈负相关(r/P=-0.476/<0.001、-0.485/<0.001);miR-197-3p与阴性症状、总分呈负相关(r/P=-0.408/<0.001、-0.453/0.009),与TMT、CPT呈正相关(r/P=0.449/0.001、0.517/<0.001)。血清lncRNA HOTAIR、miR-197-3p及二者联合预测SCZ发生的AUC分别为0.819、0.885、0.927,二者联合预测AUC显著高于各自单独预测(Z/P=4.580/<0.001、2.953/0.003)。结论SCZ患者体内血清lncRNA HOTAIR上调,miR-197-3p下调,与精神症状及认知功能相关。

长链非编码RNA在急性肺损伤中的作用及分子调控机制研究进展

急性肺损伤(ALI)是临床上常见的危重症之一。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的非蛋白质编码RNA,在染色质形成、转录和转录后翻译等基因表达水平直接或间接参与ALI的发生发展。lncRNA核富集丰富转录物1、lncRNA HOX转录反义基因间RNA及lncRNA牛磺酸上调1等lncRNA可作为竞争性内源RNA,与miR-26a-5p、miR-17-5p及miR-34b-5p等微小RNA结合,调节Wnt1诱导的信号通路蛋白1、Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1蛋白及自噬相关蛋白等下游相关蛋白的表达,参与ALI的发生发展。LncRNA可能通过调控DNA甲基化、组蛋白修饰,在表观遗传水平参与ALI的发生发展;L通过组装转录激活因子和抑制因子,调节白细胞介素6(IL-6)、IL-17、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3/9等蛋白质的转录,在转录水平参与ALI的发生发展;与多种RNA结合蛋白相互作用,在转录后水平调控ALI的发生发展。

长链非编码RNA-HOTAIR对前列腺癌细胞周期和侵袭影响的实验研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)——Hox基因的反义基因间RNA(HOTAIR)在前列腺癌细胞的表达情况并明确其对前列腺癌细胞生长及转移的影响。方法:采用定量RT-PCR(qRT-PCR)检测HOTAIR在人正常前列腺上皮细胞株RWPE-1和前列腺癌细胞株PC3和DU145中的表达水平;采用RNA干扰技术、流式细胞术和Transwell小室实验检测HOTAIR对前列腺癌细胞生长周期及侵袭能力的影响。结果:与人正常前列腺上皮细胞相比,前列腺癌细胞株PC3和DU145中HOTAIR表达分别增高3.2及5.7倍;在si-HOTAIR下调HOTAIR的表达水平后,前列腺癌细胞株均出现了G2期阻滞,同时伴有G1期下调;且前列腺癌细胞株的侵袭能力受到了明显的抑制,si-HOTAIR1和si-HOTAIR2处理后,PC3侵袭能力分别被抑制32%和44%,DU145被抑制43%和34%。结论:lncRNA-HOTAIR在前列腺癌中呈相对高表达,并且与前列腺癌细胞的生长及侵袭能力有关。HOTAIR有潜力成为诊断前列腺癌和判断其预后的新指标。

血清lncRNA HOTAIR和miR-206表达水平与急性呼吸窘迫综合征患者病情严重程度及预后的关系

目的探讨血清长链非编码RNA(lncRNA)HOX转录反义基因间RNA(HOTAIR)、miR-206表达水平与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者病情严重程度及预后的关系。方法选取110例ARDS患者,依据其入院时的氧合指数[PaO_(2)/吸入氧比例(FiO_(2))]分为ARDS轻度组37例、ARDS中度组41例、ARDS重度组32例,并根据入院28 d内的临床结局将其分为生存组74例和死亡组36例。比较不同病情严重程度及不同临床结局ARDS患者的一般资料及临床资料,血清HOTAIR、miR-206表达水平,采用COX回归模型分析ARDS患者入院28 d内死亡的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HOTAIR和miR-206表达水平对ARDS患者入院28 d内死亡的预测效能,采用Pearson法对血清HOTAIR与miR-206表达水平进行相关性分析。结果ARDS轻度组、ARDS中度组、ARDS重度组患者的呼气末正压通气(PEEP)、急性生理与慢性健康评价Ⅱ(APACHEⅡ)评分及血清HOTAIR表达水平均依次升高,而血清miR-206表达水平依次降低(均P<0.05)。与生存组相比,死亡组患者的APACHEⅡ评分、PEEP及血清HOTAIR表达水平均更高,而PaO_(2)/FiO_(2)及血清miR-206表达水平均更低(均P<0.05)。COX回归分析结果显示,APACHEⅡ评分、PaO_(2)/FiO_(2)及血清HOTAIR表达水平、血清miR-206表达水平均是ARDS患者入院28 d内死亡的影响因素(均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清HOTAIR表达水平、血清miR-206表达水平及两者联合预测ARDS患者入院28 d内死亡的曲线下面积分别为0.845、0.837、0.943,特异度分别为87.80%、71.60%、89.20%,敏感度分别为75.00%、83.30%、91.70%。Pearson相关性分析结果显示,ARDS患者血清HOTAIR的表达水平与血清miR-206的表达水平呈负相关(P<0.05)。结论血清HOTAIR、miR-206的表达水平与ARDS患者的病情严重程度及预后密切相关,血清HOTAIR表达水平升高及血清miR-206表达水平降低均是ARDS患者入院28 d内死亡的危险因素,且ARDS患者血清HOTAIR表达水平与血清miR-206表达水平呈负相关,二者联合检测对ARDS患者的预后具有较好的预测价值。

长链非编码RNA-HOTAIR对乳腺癌细胞MCF-7侵袭转移能力的影响

目的检测乳腺癌肿瘤组织中HOX转录反义RNA(HOTAIR)的表达,并观察HOTAIR对乳腺癌细胞系MCF-7侵袭转移能力的影响。方法应用荧光定量PCR检测32对乳腺癌患者的肿瘤组织和癌旁正常组织中HOTAIR的表达差异;通过慢病毒转染构建稳定高表达HOTAIR的MCF-7细胞株,Transwell检测高表达HOTAIR对细胞侵袭能力的影响,光学显微镜下观察细胞的形态学变化,Western blot法检测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的变化。裸鼠尾静脉注射HOTAIR高表达的MCF-7细胞,观察肝脏转移瘤的形成。结果在32对乳腺癌临床标本中,有24例肿瘤组织中HOTAIR的表达高于癌旁正常组织;MCF-7高表达HOTAIR后,细胞的侵袭能力增强,细胞发生EMT为特征的形态学变化,EMT相关的E-cadherin表达降低,而Vimentin及Slug的表达升高。高表达HOTAIR的MCF-7细胞肝脏转移瘤成瘤能力更强。结论乳腺癌临床标本中HOTAIR的表达增高,乳腺癌细胞系MCF-7中高表达HOTAIR可诱使其发生EMT,并促进其侵袭转移。

lncRNA HOTAIR在纤维化疾病中的研究进展

纤维化疾病的形成是失调的组织损伤修复反应的结果。在纤维化过程中,上皮细胞向成纤维细胞转化,即发生上皮-间充质转化(EMT)。而长链非编码RNA(lncRNA)在纤维化疾病的EMT过程中既可发挥促纤维化作用,又可发挥抗纤维化作用,其中lncRNA HOX转录反义RNA(HOTAIR)是目前探究的热点lncRNA之一。lncRNA HOTAIR在多种纤维化疾病中高表达,其可通过竞争性结合微RNA或调控纤维化信号通路促进EMT过程,从而促进纤维化疾病的发生发展。未来敲减lncRNA HOTAIR基因可能为纤维化疾病的防治提供新靶点。

HOTAIR lncRNA对垂体生长激素腺瘤侵袭及激素分泌的影响

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)中的HOX基因的反义基因间RNA(HOX transcript anti-sense intergenic RNA,HOTAIR)即HOTAIR lncRNA对垂体生长激素腺瘤侵袭和激素分泌的影响。方法采用qRT-PCR技术检测非侵袭性和侵袭性垂体生长激素腺瘤及正常垂体组织中的HOTAIR lncRNA,分析其差异表达。将对数生长期垂体瘤细胞株GH3随机分为对照组、阴性对照组和HOTAIR lncRNA siRNA组:对照组不作特殊处理,阴性对照组转染对照siRNA质粒,HOTAIR lncRNA siRNA组转染HOTAIR lncRNA siRNA质粒,培养72 h,采用ELISA检测细胞培养液中的生长激素,采用Transwell技术观测细胞侵袭力。结果非侵袭性和侵袭性垂体生长激素腺瘤及正常垂体前叶组织中的HOTAIR lncRNA相对表达量分别为1.60±0.25、3.27±0.57、1.00±0.00;非侵袭性和侵袭性垂体生长激素腺瘤组织中的HOTAIR lncRNA相对表达量与正常垂体组织相比,P均<0.05;侵袭性垂体生长激素腺瘤组织中的HOTAIR lncRNA相对表达量与非侵袭性生长激素腺瘤相比,P<0.01。阴性对照组、HOTAIR lncRNA siRNA组的HOTAIR lncRNA mRNA相对表达量分别为1.00±0.00、0.50±0.20,两组相比,P<0.01;阴性对照组、HOTAIR lncRNA siRNA组的生长激素表达量分别为(1.00±0.00)ng/m L、(0.64±0.15)ng/m L,两组相比,P<0.05;阴性对照组、HOTAIR lncRNA siRNA组的穿膜细胞数分别为(177±11)、(57±9)个/视野,两组相比,P<0.05。结论垂体生长激素腺瘤组织中HOTAIR lncRNA mRNA表达量升高,侵袭性垂体生长激素腺瘤组织中的HOTAIR lncRNA相对表达量高于非侵袭性生长激素腺瘤。HOTAIR lncRNA mRNA的高表达可能导致垂体生长激素腺瘤的侵袭行为和生长激素过量分泌。

LncRNA HOTAIR在肿瘤中转录调控及作用机制的研究进展

长链非编码RNA(lncRNAs)在表观遗传学、转录水平及转录后水平等多方面广泛参与基因组的调控过程。其中,同源异型盒基因转录反义基因间RNA(HOTAIR)是目前探究的热点lncRNAs之一。HOTAIR在多种肿瘤中高表达,并可促进肿瘤恶性生物学行为的进展。但HOTAIR的转录调控机制异常复杂,受雌激素、雌激素内分泌干扰物、原癌基因c-Myc等许多因素的调控,还可通过与多梳蛋白抑制复合体2和赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1复合物结合、作为竞争性内源RNA、激活信号通路等方式发挥作用。HOTAIR在肿瘤中的具体转录调控及作用机制的深入研究可为靶向阻断HOTAIR表达及作用途径提供理论基础,从而实现肿瘤的精准治疗。

长链非编码RNA在急性髓系白血病发病中作用机制的研究进展

急性髓系白血病(AML)是多种因素引起的造血系统恶性疾病,常伴随重现性遗传学异常或突变。由于AML发病率及病死率逐年增高,长链非编码RNA(lncRNA)作为其发病机制中的重要一环也得到了重视。lncRNA是目前发现的一种不具有编码蛋白质能力的RNA,参与了染色体失活、染色体修饰、基因印记、细胞分化调控及细胞周期调控等生物过程,其来源多种多样,包括癌症易感性候选者15、长链非编码RNA HOXB簇反义RNA3、人H19基因、homeobox反义基因RNA、INK位点反义非编码RNA、SBF2的反义RNA、长基因间非编码RNA 00662等,其通过不同的作用机制在AML发病中发挥重要的作用,与AML的发生、发展、预后、复发密切相关。

lncRNA HOTAIR在卵巢癌发生发展中的作用机制及其临床应用研究进展

长链非编码RNA同源异型盒基因转录反义基因间RNA(HOTAIR)在卵巢癌组织和循环中表达上调,能够增加卵巢癌的易感性,促进肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭,抑制细胞凋亡,干扰细胞周期进展,促进细胞自噬以及诱导上皮-间充质转化,从而介导卵巢癌的发生发展过程。循环HOTAIR检测可应用于卵巢癌的诊断。多项研究表明,HOTAIR高表达常预示卵巢癌患者预后不良,靶向HOTAIR可逆转卵巢癌化疗耐药性及抑制卵巢癌进展。HOTAIR有望作为卵巢癌生物诊断、预后评估的标志物以及潜在的治疗靶点。

长链非编码RNA与鼻咽癌发生发展的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),即长度大于200nt的RNA分子,被发现在转录及转录后水平参与调控基因表达,参与遗传修饰的调控,部分lncRNA在鼻咽癌的发生发展中起到一定调控作用,并可能成为鼻咽癌预后的标志物。本文就肿瘤相关lncRNA在鼻咽癌中的作用进行简单综述。

lncRNA-HOTAIR通过靶向负调控miR-1-3p抑制脂多糖诱导的H9c2大鼠心肌细胞增殖并促进炎症反应

目的探讨长链非编码RNA-HOX转录本反义基因间RNA(lncRNA-HOTAIR)是否通过靶向微小RNA miR-1-3p调控脓毒症的炎症反应。方法利用0.5μg/mL脂多糖(LPS)诱导H9c2大鼠心肌细胞,建立脓毒症心肌细胞损伤模型,将H9c2细胞分为对照组、LPS组、LPS联合HOTAIR小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、LPS联合HOTAIR小干扰RNA(si-HOTAIR)组、LPS联合miR-1-3p阴性对照(miR-NC)组、LPS联合miR-1-3p组、LPS联合si-HOTAIR和miR-1-3p拮抗剂阴性(anti-miR-NC)组、LPS联合siHOTAIR和anti-miR-1-3p组。实时定量PCR检测HOTAIR和miR-1-3p表达,CCK-8法检测细胞增殖,Western blot法分析KI-67抗原(ki67)、P21、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)的蛋白表达,流式细胞术评估细胞凋亡,ELISA测定炎性因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。双荧光素酶报告实验分析HOTAIR和miR-1-3p的靶向关系。结果LPS组H9c2细胞中HOTAIR表达量高于对照组,miR-1-3p表达量低于对照组。与LPS联合si-NC组比较,LPS联合si-HOTAIR组LPS处理H9c2细胞增殖活性、ki67、Bcl2表达量增多,P21表达量、凋亡率、BAX表达量、IL-6和TNF-α水平降低。HOTAIR靶向调控miR-1-3p的表达。LPS联合miR-1-3p组较LPS联合miR-NC组的H9c2细胞增殖活性、ki67、Bcl2表达量升高,P21表达量、凋亡率、BAX表达量、IL-6、TNF-α水平降低。与LPS联合si-HOTAIR和anti-miR-NC组比较,LPS联合si-HOTAIR和anti-miR-1-3p组H9c2细胞增殖活性降低、ki67、Bcl2表达减少,P21、BAX表达,细胞凋亡、IL-6、TNF-α水平增加。结论HOTAIR通过靶向负调控miR-1-3p的表达,抑制LPS诱导的H9c2心肌细胞增殖,并诱导细胞凋亡和炎症反应。

良恶性肾上腺嗜铬细胞瘤VEGF、melanA、LncRNA HOTAIR表达差异及与患者预后的关系

目的探讨良恶性肾上腺嗜铬细胞瘤(PCC)组织血管内皮生长因子(VEGF)、黑色素A(melanA)、长链非编码RNA(lncRNA)HOX基因的反义基因间RNA(LncRNA HOTAIR)表达差异及与患者预后的关系。方法选取肥城查庄矿医院肾内科收治的69例恶性PCC为恶性组,33例良性PCC为良性组。采集手术切除的良恶性PCC组织标本,比较两组VEGF、melanA、LncRNA HOTAIR表达,分析上述指标表达与恶性组临床病理特征的相关性,评价上述指标对良恶性肾上腺PCC的鉴别效能及与1年生存率的关系。结果恶性组VEGF、LncRNA HOTAIR阳性表达率高于良性组,melanA阳性表达率低于良性组,差异有统计学意义(P<0.05);VEGF、melanA、LncRNA HOTAIR表达与恶性组临床分期、浸润程度、淋巴结转移、分化程度存在一定相关性(P<0.05);VEGF、melanA、LncRNA HOTAIR联合鉴别恶性肾上腺PCC的曲线下面积(AUC)最大,为0.919(P<0.05)。VEGF、LncRNA HOTAIR阳性表达患者1年生存率低于阴性表达患者,melanA阳性表达患者1年生存率高于阴性表达患者(P<0.05)。结论恶性PCC患者VEGF、LncRNA HOTAIR表达升高,melanA表达下降,三者联合检测可作为PCC良性与恶性鉴别及预后预测的潜在指标。

MALAT1、HOTAIR、NEAT1调控结直肠癌的研究进展

结直肠癌作为一种遗传性疾病,其发病机制涉及多个基因。长链非编码RNA(lncRNA)在肿瘤发生过程中起着重要的调节作用,对肿瘤的发展有重要影响。该文概述了lncRNA在结直肠癌中作为竞争性内源性RNA如何发挥其功能以及它们的表达是如何被调节,并重点介绍了以下lncRNA:HOTAIR、MALAT1、NEAT1在结直肠癌预后与肿瘤进展、侵袭、转移、细胞凋亡、放射抵抗等方面的作用机制,并阐明其作为治疗靶点的潜在作用。

LncRNA HOTAIR基因多态性与人乳头瘤病毒感染女性宫颈癌易感性的关联

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)HOX转录反义基因间RNA(HOTAIR)基因多态性与人乳头瘤病毒(HPV)感染女性宫颈癌易感性及临床病理参数的关系。方法 选择武汉市第一医院妇科2019年12月-2020年12月收治的HPV感染宫颈癌患者120例设为研究组,选择同期医院体检宫颈癌筛查结果HPV结果阴性女性80名为对照组,通过电子病历及问卷调查的方式收集研究对象基本资料,包括年龄、初次生育年龄、体质量指数、孕次、产次、绝经状态。采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应检测LncRNA HOTAIR基因rs920778位点基因多态性,分析其与宫颈癌患者HPV感染的易感性及临床病理参数的关系。结果 两组研究对象分布情况在预期值与实际值之间比较差异无统计学意义,证明该研究群体具有群体代表性;研究组LncRNA HOTAIR基因rs920778位点TT基因型、T等位基因频率高于对照组,CC基因型、C等位基因低于对照组(P<0.05);Logistic回归分析结果显示携带TT基因型、T等位基因为高危型HPV感染宫颈癌发生的影响因素(P<0.05)。结论 LncRNA HOTAIR基因rs920778位点TT基因型增加本地区女性对HPV宫颈癌的易感性,但与其病情进展无关。

^(99)Tc^(m)标记lncRNA HOTAIR反义寡核苷酸探针的制备及其对人脑胶质瘤U87细胞活性的影响

目的制备新型的靶向长链非编码RNA(lncRNA)同源异型盒基因转录的反义基因间RNA(HOTAIR)的反义寡核苷酸(ASON)探针^(99)Tc^(m)-HYNIC-ASON(HYNIC为联肼尼克酰胺),探讨其对人脑胶质瘤U87细胞增殖和迁移能力的影响。方法设计并通过化学修饰合成HOTAIR的ASON,使用双功能螯合剂HYNIC偶联^(99)Tc^(m)并进行纯化。采用快速薄层层析(ITLC)法和琼脂糖凝胶电泳分别检测探针的标记率、放射化学纯度、体外稳定性及完整性。细胞摄取实验分为2组:Lipo-^(99)Tc^(m)-HYNIC-ASON组(转染组)和^(99)Tc^(m)-HYNIC-ASON组(未转染组),通过脂质体转染探针,测定人脑胶质瘤U87细胞对探针的摄取率;细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验和细胞划痕实验分为3组:Lipo-^(99)Tc^(m)-HYNIC-ASON组(转染组)、^(99)Tc^(m)-HYNIC-ASON组(未转染组)、^(99)Tc^(m)-Control组(对照组),分别检测转染探针后细胞增殖和迁移能力的变化。2组间比较采用Student t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果^(99)Tc^(m)-HYNIC-ASON的标记率为(90.0±5.6)%。琼脂糖凝胶电泳结果显示,^(99)Tc^(m)与探针成功标记并且没有明显的降解,探针孵育12 h的放射化学纯度>80%。细胞摄取实验结果显示,转染后5 h,探针Lipo-^(99)Tc^(m)-HYNIC-ASON在人脑胶质瘤U87细胞中的摄取率最大(0.70%),与未转染组(0.16%)相比,差异有统计学意义(t=17.81,P<0.01)。CCK-8实验结果显示,转染探针Lipo-^(99)Tc^(m)-HYNIC-ASON能抑制人脑胶质瘤U87细胞的增殖能力,与未转染组相比,在各个时间点(1、2、3、4、5 d)的差异均有统计学意义(t=2.336~30.230,均P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,转染探针Lipo-^(99)Tc^(m)-HYNIC-ASON能抑制人脑胶质瘤U87细胞的迁移,3组细胞间隙融合率的差异有统计学意义(F=331.8,P<0.01),与未转染组相比,转染组细胞间隙融合率明显降低,且差异有统计学意义(60.0%对23.6%,t=51.54,P<0.01)。结论成功合成了靶向人脑胶质瘤lncRNA HOTAIR的探针^(99)Tc^(m)-HYNIC-ASON,该探针具有良好的体外稳定性和靶向结合能力,能够抑制人脑胶质瘤U87细胞的增殖和迁移。

健脾消癌方通过lncRNA HOTAIR/JAK2/STAT3信号通路抑制结肠癌细胞株HCT116转移的机制

目的:观察健脾消癌方对Hox转录本反义基因间RNA(lncRNA HOTAIR)/酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号传导及转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响,探讨健脾消癌方抑制结肠癌转移的可能作用机制。方法:分析不同细胞株lncRNA HOTAIR的表达情况,采用10%,15%,20%健脾消癌方含药血清作用于HCT116细胞,transwell实验检测健脾消癌方对HCT116细胞的侵袭能力影响,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测lncRNA HOTAIR,JAK2,STAT3 mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JAK2,磷酸化STAT3(p-STAT3),STAT3蛋白表达情况。结果:结肠癌细胞株HCT116中lncRNA HOTAIR的表达水平最高,采用此细胞作为观察对象。与空白组比较,健脾消癌方各组的侵袭细胞数均降低(P<0.05,P<0.01);健脾消癌方中剂量组JAK2 mRNA相对表达水平降低(P<0.05);健脾消癌方中、高剂量组的lncRNA HOTAIR,健脾消癌方高剂量组的JAK2 mRNA相对表达水平显著降低(P<0.01)。与空白组比较,健脾消癌方中剂量组的p-STAT3蛋白相对表达水平均降低(P<0.05);健脾消癌方中、高剂量组的JAK2蛋白,健脾消癌方高剂量组的p-STAT3蛋白相对表达水平均明显降低(P<0.01)。结论:健脾消癌方可有效抑制结肠癌细胞转移,其机制可能与抑制lncRNA HOTAIR/JAK2/STAT3信号通路的表达相关。

lncRNA HOTAIR在肾上腺嗜铬细胞瘤中的表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)HOX基因的反义基因间RNA(HOTAIR)在肾上腺嗜铬细胞瘤组织中的表达及其临床意义。方法采取实时定量荧光PCR(qRT-PCR)法对2009年9月至2012年3月85例肾上腺嗜铬细胞瘤及20例正常肾上腺髓质组织中lncRNA HOTAIR表达水平进行检测,分析lncRNA HOTAIR表达与肾上腺嗜铬细胞瘤患者临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线法分析lncRNA HOTAIR表达与患者预后的关系。结果 qRT-PCR结果显示,lncRNA HOTAIR在肾上腺嗜铬细胞瘤组织中表达水平显著高于正常肾上腺组织中[(5.01±1.30)vs(0.92±0.50),P<0.01]。在肾上腺嗜铬细胞瘤组织中,lncRNA HOTAIR表达水平在良恶性、肿瘤直径、是否远处转移方面有统计学差异(P均<0.01)。Log Rank检验结果显示,lncRNA HOTAIR高表达患者的生存时间较低表达者显著减少(χ~2=22.384,P<0.01)。结论 lncRNA HOTAIR在肾上腺嗜铬细胞瘤组织中高表达,其表达水平与肿瘤的良恶性、直径、远处转移有关,可作为肾上腺嗜铬细胞瘤的良性与恶性鉴定的指标,以及预后预测的潜在靶点。