长链非编码RNA HOXA远端转录本在口腔鳞状细胞癌中的表达及生物学意义

目的:探讨长链非编码RNA HOXA远端转录本(HOXA transcript at the distal tip,HOTTIP)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及对OSCC细胞生物学功能的影响。方法:收集2020年1月至2021年6月在郑州大学第一附属医院接受手术治疗的52例OSCC患者,采用RT-qPCR检测HOTTIP在OSCC组织和癌旁组织以及人OSCC细胞株HSC-4、SCC-9和CAL-27和人正常口腔角质细胞株HOK中的表达水平,并分析其与OSCC患者临床病理资料及总生存期(overall survival,OS)的关系。采用CCK-8、流式细胞术、Transwell和Western blot分析下调HOTTIP或共下调HOTTIP和miR-637对CAL-27细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)能力的影响。采用双荧光素酶报告基因实验分析HOTTIP和miR-637的靶向关系。结果:与癌旁组织相比,OSCC组织中HOTTIP的表达水平明显升高(P<0.05),且与肿瘤大小、TNM分期、分化程度、淋巴结转移及OS相关(P<0.05)。与人正常口腔角质HOK细胞相比,HSC-4、SCC-9和CAL-27细胞中HOTTIP的表达明显升高(P<0.05)。下调HOTTIP后,CAL-27细胞的增殖、迁移、侵袭及EMT能力明显减弱,细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。HOTTIP与miR-637具有靶向关系,且下调HOTTIP后,CAL-27细胞中miR-637表达明显升高(P<0.05)。同时下调HOTTIP和miR-637后,CAL-27细胞的增殖、迁移、侵袭与EMT能力明显增强,细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。结论:HOTTIP在OSCC组织和细胞中高表达,可靶向miR-637调控OSCC细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭和EMT能力。

长链非编码RNAHOTTIP在子宫内膜癌患者组织中的表达及其临床意义

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HOTTIP在子宫内膜癌患者组织中的表达及其临床意义。方法:选取2012年4月至2014年4月在河南省新乡市中心医院接受手术治疗的109例子宫内膜癌患者的癌组织及其相应癌旁组织(距离癌缘5 cm以上)标本,用qPCR法检测子宫内膜癌和癌旁组织中HOTTIP的表达,所有患者于术后第1天开始随访,随访截止日期2019年4月30日,随访终点事件为死亡,记录患者生存时间。结果:HOTTIP在子宫内膜癌组织中相对表达量为(2.55±0.21),高于癌旁组织中的(1.03±0.16)(t=60.631,P<0.01);HOTTIP在不同FIGO分期、组织学分级、肌层浸润深度、是否发生淋巴血管间隙浸润及淋巴结转移间表达量存在差异(均P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,低表达组患者5年生存率和生存时间均高于高表达组[78.57%vs 37.04%,(70.67±4.94)vs(42.14±3.65)个月](χ^2=12.839,P<0.01)。Cox比例风险回归模型分析结果显示,FIGO分期[HR=2.248(95%CI:1.034~4.887)]、肌层浸润深度[HR=3.055(95%CI:1.668~5.592)]、淋巴结转移[HR=3.811(95%CI:1.786~8.131)]和HOTTIP表达[HR=2.649(95%CI:1.026~6.842)]均是子宫内膜癌患者预后的独立影响因素。结论:lncRNA HOTTIP在子宫内膜癌组织中高表达,与患者恶性进展有关,是患者预后的独立影响因素。

长链非编码RNA在喉癌中的研究进展

喉癌是较常见的恶性肿瘤之一,目前的治疗手段大多会影响患者的生存质量,如何尽早发现并治疗该疾病是当前面对的重要难题。如长链非编码RNA(LncRNA),广泛存在于细胞间质与细胞器中,其长度为200~1 000 bp,可以在特定的生理状态和生物过程中表达,参与遗传修饰的调控,LncRNA在转录和转录后水平参与了细胞的发生、发展过程,部分LncRNA也可作为喉癌早期诊断指标或评价喉癌预后的标志物。因此,LncRNA可作为肿瘤治疗新的靶点,并有助于为患者预后做出准确判断。

血清lncRNA HOTAIR和miR-206表达水平与急性呼吸窘迫综合征患者病情严重程度及预后的关系

目的探讨血清长链非编码RNA(lncRNA)HOX转录反义基因间RNA(HOTAIR)、miR-206表达水平与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者病情严重程度及预后的关系。方法选取110例ARDS患者,依据其入院时的氧合指数[PaO_(2)/吸入氧比例(FiO_(2))]分为ARDS轻度组37例、ARDS中度组41例、ARDS重度组32例,并根据入院28 d内的临床结局将其分为生存组74例和死亡组36例。比较不同病情严重程度及不同临床结局ARDS患者的一般资料及临床资料,血清HOTAIR、miR-206表达水平,采用COX回归模型分析ARDS患者入院28 d内死亡的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HOTAIR和miR-206表达水平对ARDS患者入院28 d内死亡的预测效能,采用Pearson法对血清HOTAIR与miR-206表达水平进行相关性分析。结果ARDS轻度组、ARDS中度组、ARDS重度组患者的呼气末正压通气(PEEP)、急性生理与慢性健康评价Ⅱ(APACHEⅡ)评分及血清HOTAIR表达水平均依次升高,而血清miR-206表达水平依次降低(均P<0.05)。与生存组相比,死亡组患者的APACHEⅡ评分、PEEP及血清HOTAIR表达水平均更高,而PaO_(2)/FiO_(2)及血清miR-206表达水平均更低(均P<0.05)。COX回归分析结果显示,APACHEⅡ评分、PaO_(2)/FiO_(2)及血清HOTAIR表达水平、血清miR-206表达水平均是ARDS患者入院28 d内死亡的影响因素(均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清HOTAIR表达水平、血清miR-206表达水平及两者联合预测ARDS患者入院28 d内死亡的曲线下面积分别为0.845、0.837、0.943,特异度分别为87.80%、71.60%、89.20%,敏感度分别为75.00%、83.30%、91.70%。Pearson相关性分析结果显示,ARDS患者血清HOTAIR的表达水平与血清miR-206的表达水平呈负相关(P<0.05)。结论血清HOTAIR、miR-206的表达水平与ARDS患者的病情严重程度及预后密切相关,血清HOTAIR表达水平升高及血清miR-206表达水平降低均是ARDS患者入院28 d内死亡的危险因素,且ARDS患者血清HOTAIR表达水平与血清miR-206表达水平呈负相关,二者联合检测对ARDS患者的预后具有较好的预测价值。

长链非编码RNA与鼻咽癌发生发展的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),即长度大于200nt的RNA分子,被发现在转录及转录后水平参与调控基因表达,参与遗传修饰的调控,部分lncRNA在鼻咽癌的发生发展中起到一定调控作用,并可能成为鼻咽癌预后的标志物。本文就肿瘤相关lncRNA在鼻咽癌中的作用进行简单综述。

血浆CA19-9、lncRNA HOTTIP水平对胰腺癌的诊断价值

目的探讨血浆糖类抗原19-9(CA19-9)、长链非编码RNA(lncRNA)HOXA末端转录本反义RNA(HOT⁃TIP)水平对胰腺癌的诊断价值。方法选择胰腺癌患者79例(胰腺癌组)、胰腺炎患者63例(胰腺炎组)、体检健康的志愿者50例(对照组),采集各组清晨空腹肘静脉血,离心留取血浆,采用ELISA法检测血浆CA19-9,采用RTRCR法检测血浆lncRNA HOTTIP。比较三组血浆CA19-9、lncRNA HOTTIP水平,分析血浆CA19-9、lncRNA HOTTIP水平与胰腺癌患者临床病理特征的关系以及二者之间的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血浆CA19-9、lncRNA HOTTIP水平对胰腺癌的诊断价值。结果胰腺癌组血浆CA19-9、lncRNA HOTTIP水平均明显高于胰腺炎组和对照组(P均<0.05),而胰腺炎组与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。血浆CA19-9、lncRNA HOTTIP水平与胰腺癌肿瘤直径、TNM分期有关(P均<0.05),与性别、年龄、BMI、吸烟史、饮酒史、淋巴结转移无关(P均>0.05)。Pearson相关分析显示,胰腺癌患者血浆CA19-9水平与血浆lncRNA HOTTIP水平呈正相关关系(r=0.570,P<0.05)。ROC曲线分析显示,血浆CA19-9、lncRNA HOTTIP水平联合时诊断胰腺癌的曲线下面积明显高于血浆CA19-9、lncRNA HOTTIP水平单独时(Z分别为3.010、2.174,P均<0.05)。结论胰腺癌患者血浆CA19-9、lncRNA HOTTIP水平升高,二者水平升高与胰腺癌病情进展密切相关;血浆CA19-9、lncRNA HOTTIP水平对胰腺癌的诊断均具有一定价值,二者联合时诊断价值更高。

血清长链非编码RNA及HOTTIP在乳腺癌中的表达及新辅助化疗疗效的相关性研究

目的探讨乳腺癌新辅助化疗患者血清长链非编码RNA(LncRNA HOTAIR)及同源异型基因簇A远端转录本(HOTTIP)的表达以及在化疗疗效预测中的价值。方法前瞻性选取在苏州大学附属张家港医院行新辅助化疗的46例乳腺癌患者作为研究组,另外收集40例同院健康体检的正常人群作为对照组。采用反转录-实时定量聚合酶链式反应检测2组研究对象血清中LncRNA HOTAIR及HOTTIP的表达,并分析研究组中LncRNA HOTAIR及HOTTIP的表达与年龄、肿瘤大小、淋巴结情况、TMN分期,激素受体表达、HER-2表达的关系,并在3~4个化疗周期后评估其化疗疗效,采用受试者工作特征(ROC)曲线对LncRNA HOTAIR及HOTTIP的疗效预测效能进行评价。结果研究组血清LncRNA HOTAIR、HOTTIP的表达水平(2.58±1.32、3.52±1.50)较对照组表达水平(1.59±0.89、1.91±1.33)均显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。高表达的外周血清乳腺癌的HOTAIR与肿瘤大小相关(P<0.05),与年龄、淋巴结是否转移、TNM分期、激素受体表达、HER-2表达无明显相关性(P>0.05);血清高表达HOTTIP与肿瘤分期有关(P<0.05),与年龄、肿瘤大小、淋巴结是否转移、激素受体表达、HER-2表达无明显相关性(P>0.05)。乳腺癌患者新辅助化疗后,化疗有效组22例,无效组24例,有效率47.8%。化疗有效组患者血清HOTAIR表达水平(2.18±1.32)明显低于化疗无效组(2.94±1.23),差异有统计学意义(P<0.05),而化疗有效组(3.10±1.46)与化疗无效组(3.90±1.47)患者的血清HOTTIP表达差异无统计学意义(P>0.05)。血清LncRNA HOTAIR单独预测化疗疗效的AUC、敏感度和特异度分别为0.688、59.1%、79.2%,血清LncRNA HOTTIP单独预测化疗疗效的AUC、敏感度和特异度分别为0.641、72.7%、70.8%,2者联合后的AUC、敏感度和特异度分别为0.708、60.5%、87.5%。结论血清LncRNA HOTAIR和HOTTIP在乳腺癌患者中高表达,2者联合可以作为乳腺癌新辅助化疗疗效的潜在循环预测因子。

长链非编码RNA HOTAIR在肝细胞癌中表达研究

目的观察HOTAIR在肝细胞癌组织、癌旁正常组织和肝硬化组织中的表达情况,并探究HOTAIR的表达与肝细胞癌患者的临床病理特征的相关性。方法利用qRT-PCR方法检测31例肝细胞癌组织、17例癌旁正常组织和11例肝硬化组织中的HOTAIR的表达量,并利用受试者工作曲线(receiver operating characteristic,ROC)统计学分析HOTAIR在肝细胞癌中的诊断效能。结果肝细胞癌组织中的HOTAIR表达明显高于癌旁正常组织和肝硬化组织,ROC曲线下面积为0.8235,对肝细胞癌的诊断有统计学意义(P=0.0002),且HOTAIR的表达与肿瘤大小、血管浸润和TNM分期有统计学意义。结论HOTAIR在肝细胞癌组织中表达明显高于正常组织,具有诊断意义,且其含量与肿瘤侵袭性相关。

长链非编码RNA HOXA末端转录本反义RNA对胰腺癌诊断的临床价值

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)HOXA末端转录本反义RNA(HOTTIP)对胰腺癌诊断的临床价值。方法收集2017年6月至2018年12月间徐州市中心医院18例行手术切除并经病理证实的胰腺癌组织及癌旁正常胰腺组织(距癌组织>1 cm);收集78例临床确诊的胰腺癌患者血浆,选取78例健康体检者作为健康对照组,同时收集原发性肝癌、结直肠癌及胃癌各50例作为疾病对照组。实时荧光定量PCR法检测胰腺癌组组织及血浆、健康对照组和疾病对照组血浆HOTTIP的表达水平,化学发光法检测胰腺癌患者血浆CA19-9水平。分析胰腺癌患者血浆HOTTIP与癌组织HOTTIP及血浆CA19-9相关性,分析血浆HOTTIP水平与肿瘤临床病理特征之间的关系。绘制高表达HOTTIP组和低表达HOTTIP组患者的生存曲线,log-rank检验比较两组间的生存率差异。绘制受试者工作特征曲线(ROC),计算曲线下面积(AUC),评估血浆HOTTIP水平对胰腺癌的诊断效能。结果胰腺癌患者癌组织HOTTIP表达量显著高于癌旁正常胰腺组织(2.24±0.25比0.62±0.11,P<0.001);胰腺癌、肝癌、结直肠癌、胃癌患者及健康对照者血浆HOTTIP水平分别为1.33±0.32、0.57±0.17、0.51±0.10、0.41±0.09、0.54±0.05,胰腺癌组显著高于肝癌、结直肠癌、胃癌患者及健康对照者,差异均有统计学意义(P值均<0.05),但肝癌、结直肠癌、胃癌患者血浆HOTTIP水平与健康对照者的差异均无统计学意义。胰腺癌患者血浆HOTTIP表达与CA19-9及癌组织中HOTTIP表达均呈正相关(P值均<0.001),且血浆HOTTIP表达水平与TNM分期有关(P=0.029),而与患者性别、年龄及淋巴结转移、肿瘤大小无关。HOTTIP高表达患者生存率明显低于HOTTIP低表达患者(15.9个月比30.6个月,P<0.05)。血浆HOTTIP水平诊断胰腺癌的AUC值为0.81(95%CI 0.74~0.87),诊断临界值为1.14,灵敏度为62%,特异度为94%,准确性为74%。血浆HOTTIP联合CA19-9诊断胰腺癌的灵敏度提高到81%,特异度提高到97%,准确性提高到84%。结论胰腺癌患者血浆HOTTIP水平对胰腺癌的诊断具有一定的临床价值。

长链非编码RNAHOTTIP在消化系统肿瘤中的调控作用

长链非编码RNA是非编码RNA家族中的重要成员，其在机体诸多生理病理过程中所发挥的重要调控作用正日益凸显。长链非编码RNAHoTrIP定位于HOXA基因5’末端的长链非编码RNA，目前已发现其在多种消化系统恶性肿瘤中呈异常上调表达并调控肿瘤的发生、发展。本文就消化系统肿瘤中长链非编码RNAHOTVIP调控作用的研究现状进行综述。

蓝氏贾第鞭毛虫表面变异抗原反义mRNA的鉴定

目的鉴定编码蓝氏贾第鞭毛虫（简称贾第虫）表面变异抗原（VSP）的正义和反义mRNA。方法采用Trizol法抽提贾第虫单克隆滋养体总RNA,SMART法逆转录合成cDNA。设计合成针对VSPs基因3′端保守区域的特异性引物（内、外引物各1条）,结合SMART引物采用巢式PCR分别扩增得到来源于正义和反义mRNA的cDNA片段。将PCR产物与pGEM-T载体连接并测序,测序结果与GenBank库中的已知序列进行比对。根据测序结果设计特异性引物,以巢式PCR产物为模板,进行正义和反义cDNA的检测。结果巢式PCR显示,VSP正义mRNA和反义mRNA的cDNA均被成功扩增,电泳鉴定扩到产物分别位于0.1~4kb和0.2~2kb。经克隆、测序和序列比对,共获得34个贾第虫VSP编码序列,其中5个来源于正义mRNA的扩增产物,29个来源于反义mRNA的扩增产物,所得VSP编码基因均含有贾第虫VSP mRNA N端变异区和C端特异性保守区。根据5个正义mRNA序列设计的特异性引物在正义mRNA均得到扩增产物,而在反义mRNA仅有4个得到扩增产物。从29个反义mRNA序列中挑选3个设计特异性引物进行PCR,正义mRNA和反义mRNA均得到扩增产物。结论贾第虫VSP基因转录的多个正义mRNA和反义mRNA序列同时存在,该基因存在转录后基因沉默调节机制。