lncRNA HOXB-AS3靶向miR-379-5p调节类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)同源盒蛋白B8基因反义RNA3(HOXB-AS3)对类风湿性关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响和分子机制。方法实时定量PCR(RT-qPCR)检测HOXB-AS3和miR-379-5p在健康对照者、RA患者滑膜组织中的表达。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR验证HOXB-AS3对miR-379-5p的靶向调控作用。将si-NC、si-HOXB-AS3、miR-NC、miR-379-5p mimics、si-HOXB-AS3+anti-miR-NC、si-HOXB-AS3+anti-miR-379-5p分别转染MH7A细胞。细胞技术试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活力;Transwell实验检测细胞迁移和迁移能力;蛋白质印记(Western blot)检测细胞周期素D1(CyclinD1)、p21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达。结果RA患者滑膜组织中HOXB-AS3呈高表达,miR-379-5p呈低表达。与si-NC组比较,si-HOXB-AS3组MH7A细胞活力、迁移侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达降低,p21蛋白表达增加(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-379-5p组MH7A细胞活力、迁移侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达降低,p21蛋白表达增加(P<0.05)。与si-HOXB-AS3+anti-miR-NC组比较,si-HOXB-AS3+anti-miR-379-5p组MH7A细胞活力、迁移侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达升高,p21蛋白表达降低(P<0.05)。结论RA患者滑膜组织中HOXB-AS3呈高表达。抑制HOXB-AS3通过靶向miR-379-5p可抑制RA滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭。

lncRNA HOXB-AS3通过激活PI3 K-AKT通路加剧急性髓样白血病患者细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭

目的探究lncRNA HOXB-AS3对急性髓样白血病(acutemyeloidleukemia,AML)的增殖、调亡和侵袭的影响和机制。方法RT-qPCR检测AML患者骨髓单核细胞(BMMCs)和细胞系中lncRNA HOXBAS3相对表达量。慢病毒转染建立稳定表达shRNA-HOXB-AS3-01,shRNA-HOXB-AS3-02和shRNA-HOXBAS3-03的THP1和HL60细胞系。CCK-8实验、EdU实验、流式细胞术实验和Transwell实验分别检测THP1和HL60细胞活力、增殖、凋亡和侵袭能力,Western印迹检测蛋白相对表达量。建立裸鼠AML移植瘤模型,体内验证HOXB-AS3低表达对肿瘤生长的影响。结果lncRNA HOXB-AS3在AML患者BMMCs和细胞系中的表达量显著增加。在细胞实验中,HOXB-AS3低表达显著抑制THP1和HL60细胞活力、增殖和侵袭,增加细胞凋亡率,上调cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和E-cadherin蛋白的表达,下调N-cadherin、VECF、PI3Kp85α和p-AKT蛋白的表达。在体内实验中,HOXB-AS3低表达显著抑制肿瘤生长,下调PI3Kp85α和p-AKT蛋白表达。结论lncRNA HOXB-AS3通过激活PI3K-AKT通路加剧AML细胞的增殖、调亡和侵袭。

LncRNA HOXB-AS3在骨髓增生异常综合征中的表达及临床意义

目的检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者血清长链非编码RNA HOXB-AS3(LncRNA HOXB-AS3)水平,并探讨其与MDS的关系。方法选取2017年3月~2019年12月于本院门诊就诊或住院治疗的74例MDS患者作为MDS组,再将74例MDS患者按照国际预后积分系统(IPSS)重新分为低危组、中危Ⅰ组、中危Ⅱ组和高危组,同时按照WHO分级重新分为难治性贫血型(RA)组、难治性血细胞减少伴多系发育异常型(RCMD)组、难治性贫血伴原始细胞增多-Ⅰ型(RAEB-Ⅰ)组和难治性贫血伴原始细胞增多-Ⅱ型(RAEB-Ⅱ)组;同时选取同期68例健康体检人群作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清中LncRNA HOXB-AS3水平;分析血清HOXB-AS3 mRNA表达与IPSS评分的关系;分析血清HOXB-AS3 mRNA表达与WHO分级的关系;分析血清中HOXB-AS3 mRNA水平对MDS的诊断价值。结果MDS组血清中HOXB-AS3 mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05);高危组血清中HOXB-AS3 mRNA表达水平显著高于低危组、中危Ⅰ组和中危Ⅱ组(P<0.05);RAEB-Ⅱ组血清中HOXB-AS3 mRNA表达水平显著高于RA组和RCMD组(P<0.05);HOXB-AS3 mRNA表达水平与IPSS评分、WHO分级均呈正相关(r=0.550、0.597,P均<0.05)。结论血清LncRNA HOXB-AS3表达可能对MDS的发生具有预测作用,对评估病情发展状况有重要意义,可为MDS的早期干预提供一定参考依据。