LncRNA HOXD-AS1在斑马鱼异种移植模型对肝细胞癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的探讨在斑马鱼异种移植模型(zPDX)长链非编码核糖核酸同源异形基因D簇反义核糖核酸1(lncRNA HOXD-AS1)对肝细胞癌(HCC)细胞的调控作用。方法在HepG2、Hep3B和Huh7细胞,分别敲低HOXD-AS1和微小RNA(miRNA)miR-130a-3p,检测细胞HOXD-AS1水平变化,使用CCK-8检测细胞增殖,使用Transwell法检测细胞迁移能力,建立zPDX模型。结果HepG2、Hep3B和Huh7细胞HOXD-AS1相对水平分别为正常LO2细胞的65.6±5.7(P<0.01)、4.6±0.5(P<0.01)和23.4±1.0(P<0.001)倍;在Hep3B细胞,敲低HOXD-AS1后每视野细胞数为49.6±3.9,显著低于对照组的221.8±63.3(P<0.01);在zPDX,代表增殖的CM-DiI阳性信号为对照组的56.0±12.0%(P<0.01),代表迁移的CM-DiI阳性信号为对照组的49.0±8.9%(P<0.05);在Huh7细胞,敲低HOXD-AS1后Huh7细胞每视野细胞数为54.2±15.2,显著低于对照组的226.8±26.3(P<0.01);在zPDX,代表增殖的CM-DiI阳性信号为对照组的46.5±16.8%(P<0.01),代表迁移的CM-DiI阳性信号为对照组的41.9±10.2%(P<0.01);在Huh7细胞,下调miR-130a-3p后每视野细胞数为39.0±9.2,显著大于对照组的24.4±7.2(P<0.001);在zPDX,代表迁移的CM-DiI阳性细胞显著增加,为对照组的187.8±42.7%(P<0.05);将si1-HOXD-AS1和miR-130a-3p抑制剂共转染Huh7细胞,共转染组、si1-HOXD-AS1组和NC组每视野细胞数分别为78.2±15.3、39.3±9.5和79.4±18.3,差异显著(P<0.01);在zPDX,si1-HOXD-AS1组和共转染组CM-DiI阳性细胞分别为NC组的48.9±13.5%(P<0.05)和109.4±24.9(P>0.05)。结论本研究在体外和体内证明了HOXD-AS1/miR-130a-3p ceRNA网络对HCC细胞的影响,zPDX可用于肿瘤细胞实验研究。