鼻咽癌组织miR-10b与患者临床病理参数及HoxD4 mRNA表达的关系

目的观察鼻咽癌组织中miR-10b的表达变化,并探讨其与患者临床病理参数及相邻基因HoxD4 mRNA表达的关系。方法选择鼻咽癌患者65例作为观察组,术中收集其癌组织65例份;因慢性鼻咽炎进行活检的患者10例作为对照组,收集其鼻咽正常组织10例份。采用实时荧光定量PCR法检测两组鼻咽组织miR-10b及HoxD4 mRNA表达,并分析二者的关系;收集观察组临床资料,分析鼻咽癌组织miR-10b表达与患者临床病理参数的关系。结果观察组与对照组鼻咽组织miR-10b相对表达量分别为3.94±0.21、1.25±0.14,两组比较P<0.05;观察组与对照组鼻咽组织HoxD4 mRNA相对表达量分别为1.48±0.67、0.98±0.30,两组比较P>0.05。鼻咽癌组织中miR-10b与HoxD4 mRNA相对表达量无明显相关性(r=0.038,P>0.05)。患者年龄<30岁、临床TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、T分期为T 3~T 4期的鼻咽癌组织miR-10b表达均高于患者年龄≥30岁、临床TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、T分期为T 1~T 2期的鼻咽癌组织(P均<0.05)。不同性别、组织学类型、N分期、M分期、分化程度的鼻咽癌组织miR-10b表达比较均无统计学差异(P均>0.05)。结论鼻咽癌组织miR-10b表达升高,miR-10b表达与患者的年龄、TNM分期及T分期有关,与HoxD4 mRNA表达无关。

HOXD4基因多态性与老年男女性低骨量的关系

目的同源异形盒(homeobox,HOX)基因在调节软骨分化和成骨细胞中扮演了很重要的角色。本研究目的是探讨HOXD4基因多态性与老年男性和女性低骨量的关系。方法筛选711名(年龄61.8±6.9岁)老年男性(其中419例健康男性、276例骨量减少患者和16例骨质疏松患者)和617名(年龄58.9±6.4岁)绝经后妇女(其中272例健康女性、291例骨量减少患者和54例骨质疏松患者)共1328个研究对象,所有对象均为居住在上海30年以上的汉族人。双能X线吸收仪(GE Lunar Prodigy和Hologic QDR 2000)检测左侧股骨颈BMD(bone mineral density,BMD)。骨量减少和骨质疏松的诊断分别按照股骨颈BMD为同性别正常峰值BMD的-1和-2.5个标准差,同时排除继发性低骨量的存在。使用Taqman荧光探针法检测HOXD4的3个标签位点:rs1867863、rs13418078和rs4972504的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)。结果与其他人群不同,在我们的研究中rs13418078只发现CC基因型。在711例老年男性中,rs1867863的基因型频率依次为AA(40.5%)、AC(45.7%)、CC(13.8%),rs4972504的基因型频率依次为CC(51.6%)、CT(40.5%)、TT(7.9%);在617例老年女性中,rs1867863的基因型频率依次为AA(42.3%)、AC(43.1%)、CC(14.6%),rs4972504的基因型频率依次为CC(53.5%)、CT(38.7%)、TT(7.8%);等位基因频率分布均符合Hardy-Weinberg定律。未发现此两位点SNP在骨质疏松组、骨量减少组和骨量正常组之间频率分布的差异(P均>0.05)。结论本研究第一次提示了HOXD4的rs1867863和rs4972504位点多态性可能不是中国汉族老年男性和女性低骨量的风险因子。

微RNA-224在体外对胆管癌细胞抗凋亡及促进增殖的作用

目的探讨微RNA-224（miR-224）在人胆管癌（CC）细胞凋亡与增殖中的调控机制以及在胆管癌细胞中是否存在miR-224-HOXD10-PAK4传导通路。方法利用实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术测定CC和癌旁正常组织中miR-224的表达量。胆管癌QBC939细胞株病毒转染分为两组：细胞转染阴性对照组（NC组），细胞转染目的基因miR-224-down组（DOWN组）。记录NC组和DOWN组中QBC939细胞凋亡率及细胞克隆形成数。利用RT—PCR和蛋白印迹（Western blotting）检测NC组和DOWN组QBC939细胞中miR-224、AP15、PAK4、HOXD10的表达。结果（1）CC组织中miR-224的表达显著高于癌旁正常组织（P〈0．05）。（2）DOWN组QBC939细胞的miR-224表达显著低于NC组。DOWN组QBC939细胞凋亡率显著高于NC组。DOWN组QBC939细胞的克隆形成率显著低于NC组。（3）RT—PCR和Western blotting实验证实DOWN组QBC939细胞中AP15、HOXD10的表达明显高于NC组。（4）DOWN组QBC939细胞中PAK4的表达显著低于NC组。结论miR-224有体外抗QBC939细胞凋亡及促进QBC939细胞增殖的作用，是细胞增殖的重要调节因子。QBC939细胞中存在miR-224-HOXD10-PAK4信号传导通路。