胶体金渗滤法检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A抗体

目的 建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌 (HP)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫渗滤法(DIGFA)。方法 采用枸橼酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,将重组的CagA抗原固定于硝酸纤维素膜上。血清中抗CagAIgG与金标记SPA及硝酸纤维素膜上的固相抗原结合后 ,形成肉眼可见的红色斑点。结果 用DIGFA与酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂盒对比检测了 32 6份血清标本中抗CagA抗体 ,两法符合率为 96 .6 %。结论 DIGFA检测血清中的抗CagA抗体特异性强 ,简便快速 ,无需特殊仪器设备 ,有实用价值。

细胞毒素相关基因蛋白A抗体阳性Hp感染对急性心肌梗死患者发病影响的研究

目的探讨细胞毒素相关基因蛋白A(CagA)抗体阳性幽门螺杆菌(Hp)感染对急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)患者发病影响。方法选择2016年2月至2018年2月本院收治的AMI患者134例作为研究对象,根据冠状动脉造影结果将患者分为AMI组(n=82)和非AMI组(n=52)。采集患者血液并检测低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、C反应蛋白(CRP)、同型半胱氨酸(Hcy)等血清项目,收集患者Hp细胞毒素相关基因蛋白A(CagA)抗体、尿素酶A亚单位抗体、尿素酶B亚单位抗体、重组细胞空泡毒素抗原抗体数据,并按照不同分组类别对比各组AMI发病率。有统计学意义的因素进行多因素Logistic回归分析。结果两组患者年龄、糖尿病史、AMI家族史对比差异无统计学意义(P>0.05),男性占比、高血压史、长期吸烟史对比差异有统计学意义(P<0.05)。AMI组和非AMI组LDL-C、Hcy指标水平对比差异无统计学意义(P>0.05),AMI组HDL-C指标水平为(1.10±0.11)mmol/L,低于非AMI组(3.67±0.46)mmol/L,CRP指标水平为(89.16±20.34)mg/L,高于非AMI组(3.24±0.36)mg/L,差异有统计学意义(P<0.05)。本次研究共检测出88例患者发生Hp感染,感染率为65.67%;根据Hp感染分组,Hp阳性组AMI发病率为64.29%,高于Hp阴性组18.75%;Hp阳性患者中CagA抗体阳性组AMI发病率为75.86%,高于CagA抗体阴性组AMI发病率48.15%,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic分析结果显示,CagA抗体阳性、长期吸烟史是造成AMI发病的独立危险因素(P<0.05)。结论 AMI患者HDL-C及CRP水平变化较非AMI患者明显,CagA抗体Hp感染与AMI发病密切相关,且CagA抗体阳性、长期吸烟史是造成AMI发病的独立危险因素,CagA抗体阳性可以作为预测AMI发病的有效指标。

产细胞毒素幽门螺杆菌的毒力检测与相关疾病的意义

目的 探讨在胃炎、消化性溃疡和胃癌患者中 ,检测出H .pylori后是否具有治疗价值。方法 对 88例不同患者进行尿素酶抗体酶标法和产细胞毒素H .pylori抗体酶免疫检测。结果 慢性萎缩性胃炎中CagA HP(IgG) (+ )为 5 2 .4% ,消化性溃疡组中CagA HP(IgG) (+ )为 90 .3 %。结论 慢性萎缩性胃炎和消化性溃疡具有抗H .pylori治疗价值。

幽门螺杆菌相关性胃肠粘膜病患儿血清CagA抗体、VacA抗体检测及其临床意义

为了解幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)相关性胃肠粘膜病患儿血清中细胞毒素相关基因抗原(CagA)、空泡毒素抗原(VacA)的有无及其临床意义,应用免疫印迹法对46例慢性胃炎和25例消化性溃疡患儿血清CagA抗体、VacA抗体进行了检测。结果:①慢性胃炎小儿血清H.Pylori CagA抗体(+)、VacA抗体(+)检出率为28.3％,消化性溃疡患儿为64.0％,两组比较差异有显著性(P<0.05);②对慢性胃炎炎症活动程度进行分组检测,中、重度急性活动性胃炎患儿中H.Pylori CagA抗体(+)、VacA抗体(+)检出率为50.0％,与轻症者比较差异有显著性(P<0.05)。提示 H.pylori菌株存在不同致病能力,CagA、VacA是致小儿 H.Pylori相关性胃肠粘膜病重要的毒力因素;通过检测CagA、VacA抗体,可及时指导临床治疗。

抗-Hp CagA IgG血清对胃癌细胞的增殖作用及对癌基因表达的影响

目的 探讨人抗幽门螺杆菌抗体 (抗 - Hp Cag A Ig G)与胃癌发病的关系及对癌基因 ras P2 1、c- fos和 c- myc表达的影响。方法 收集经胃镜检查诊断为消化性溃疡的患者血清 75例和正常健康人血清 6例 ,用 EL ISA法分别测定血清中抗 - Hp Cag A Ig G水平 ,并观察抗 - Hp Cag A(+) Ig G的患者血清对体外培养的胃癌细胞株HGC80 3的增殖作用 ,以及用流式细胞术检测经不同血清刺激后的 HGC80 3细胞株癌基因 ras P2 1、c- fos和 c- myc表达的情况。结果 消化性溃疡患者中抗 - Hp Cag A(+) Ig G血清对人胃癌细胞 HGC80 3具有明显的促增殖作用 (P<0 .0 1) ,并能增加 ras P2 1的表达 (P<0 .0 1)。结论 受 Hp感染的消化性溃疡患者血清中 ,高滴度的人抗 - Hp Cag A(+) Ig G对胃癌细胞具有促增殖作用 ,提示抗 - Hp lag A(+) Ig G很可能是 Hp Ig G促增殖作用的重要组成部分。

血清H.pylori抗体抗Hp细胞毒素相关基因A及13C-尿素呼气实验结果与湖州地区孕妇妊娠剧吐的相关性分析

目的分析血清H.pylori抗体、抗Hp细胞毒素相关基因A(CagA)及13C-尿素呼气实验结果与湖州地区孕妇妊娠剧吐的相关性。方法选取2019年7月—2020年6月于湖州市妇幼保健院就诊的妊娠剧吐(观察组)与无妊娠呕吐(对照组)的孕妇各100例进行研究,并将观察组按病情严重程度分为重度组与轻度组,入组后检测血清H.pylori抗体、抗Hp细胞毒素相关基因A(CagA)及进行13C-尿素呼气实验,比较各组检测结果、孕前及孕早期体质量、孕妇并发症及围生儿不良妊娠结局。结果观察组孕妇Hp、CagA及13C-尿素呼气阳性率均高于对照组,差异均有统计学意义(χ^(2)=26.299,44.907,28.926,均P<0.05)。将观察组孕妇按病情严重程度分组,重度组孕妇Hp及13C-尿素呼气阳性率均高于轻度组(χ^(2)=4.005,5.654,均P<0.05)。CagA阳性率组间比较差异无统计学意义(χ^(2)=3.287,P>0.05)。孕早期观察组体质量较孕前减轻,对照组较孕前增重,差异有统计学意义(t=0.279,P<0.05)。孕早期观察组体质量较对照组轻,差异有统计学意义(t=3.357,P<0.05)。两组孕妇并发症发生率比较差异无统计学意义(P<0.05)。观察组小于胎龄儿、低出生体质量发生率及不良妊娠结局总发生率高于对照组(P<0.05)。结论Hp感染与妊娠剧吐密切相关,妊娠剧吐可导致孕妇体质量减轻、不良妊娠结局发生率增高。

幽门螺杆菌CagA抗体检测的间接ELISA法建立及评价

目的制备高纯度、具有生物活性的CagA蛋白,建立间接ELISA法检测CagA抗体,并对该方法进行评估。方法构建重组表达质粒CagA-PET28a,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,利用蛋白纯化液相色谱仪进行镍亲和层析纯化后再进行离子交换层析纯化。利用验证后的蛋白建立了间接ELISA法,通过与市售试剂盒进行比对,对间接ELISA法进行评价。结果成功表达并纯化出了高纯度的CagA蛋白,分子量为130 kD,纯度为99.87%。利用该抗原建立了间接ELISA法,并对204例待测血清进行检测。与Mikrogen公司血清学检测试剂盒的结果比较,阳性符合率为86.5%,阴性符合率为91%,总符合率为88.7%。对伯劳特公司提供的参考品进行检测,表明该间接ELISA法具有较好的重复性且最低检测限检测结果符合预期。结论利用重组CagA蛋白建立的检测患者血清中CagA抗体的方法具有较好的检测性能,且重复性较好,最低检测限与市售试剂盒相当。

CagA抗体检测用于鉴定幽门螺杆菌高毒株感染的评价

目的探讨通过检测血清CagA抗体鉴定幽门螺杆菌高毒株感染的可行性。方法采集本地区临床门诊行胃镜检查的胃活检标本,作病理检查和幽门螺杆菌(Hp)培养,同时采集病人的血清。采用PCR法检测分离所得的HpcagA基因,用EIA法测定患者血清CagA抗体,分析cagA基因的检出与消化性疾病的关系,比较cagA基因与CagA抗体的检测结果,评价应用CagA抗体检测Hp高毒株感染的可行性。结果分离获得80株Hp,其中54株检出cagA基因,阳性率为67.50%。各病理类型胃病患者cagA基因阳性率分别为:浅表性胃炎77.42%,萎缩性胃炎62.86%,胃溃疡58.33%,胃癌50.00%,各组间无显著差异(P>0.05);EIA法检测CagA抗体的阳性率为55.00%,敏感度为74.07%,特异度为84.62%,约登指数(Youden's index)58.69%,调整一致性77.68%。结论检测血清CagA抗体用于诊断高毒力Hp感染存在局限性。

Cag A Hp抗体测定与消化性溃疡和慢性胃炎的关系

目的 :探讨幽门螺杆菌细胞毒素相关基因蛋白 (CagA)抗体与消化性溃疡和慢性胃炎的关系。方法 :对132例消化性溃疡和慢性胃炎Hp幽门螺杆菌阳性的 118例病例 ,用ELISA方法进行CagA抗体检测。结果 :10 9例消化性溃疡中 ,CagA抗体阳性 90例 ,阳性率 82 .6 % ;9例慢性胃炎中 ,CagA抗体阳性 5例 ,阳性率 5 5 .6 %。消化性溃疡组CagA阳性率明显高于慢性胃炎组 (P <0 .0 1)。结论

CagA-HP·IgG检测的临床意义初探

为了解产细胞毒素幽门螺杆菌(HP与常见胃十二指肠疾病相关关系，通过检测HP细胞毒素相关基因(CagA)的IgG抗体来探讨，结果正常人和慢性胃炎(CG)与产细胞毒素的HP无相关关系，而胃溃疡(GU)、十二指肠溃疡(DU)和胃癌(GC)与产细胞毒素的HP有相关关系。检测Cag-HP·IgG具有对DU、GU、GC的发病原因和疗效考核的临床意义。

存活素基因表达与膀胱癌细胞增殖活性的关系

目的:探讨存活素基因在膀胱移行细胞癌中的表达,以及存活素基因表达与癌线胞的凋亡和增值活性的关系。方法:应用Western blot定量分析检测存活素蛋白在128例膀胱移行细胞瘤组织中的表达水平,原位DNA片段末端标记法检测肿瘤细胞的凋亡指数(Al),Ki-67单克隆抗体检测肿瘤细胞的增殖活性(Ki-67LI)。结果:Wstern blot分析结果表明在肿瘤组织中可检测到存活素的高表达,而正常膀胱组织中无存活素蛋白的表达。存活素蛋白的表达水平在肿瘤的临床分期和病理分级间差异具有显著性(P<0.05)。Spearman秩和相关检验提示存活素蛋白的表达水平与肿瘤的增值活性呈正相关(P<0.001),而与肿瘤细胞的AI无明显的相关性(P>0.005).结论:存活素蛋白表达在膀胱移行细胞癌的恶性进展中起重要作用,可作为评估膀胱移行细胞癌的恶性程度和预后的指标。

胃癌病人血清CagA抗体检测

目的 :探讨细胞毒素相关基因A(CagA)阳性Hp菌株与胃癌的关系。方法 :幽门螺杆菌 (Hp)阳性胃癌病人 2 4例 ,另以Hp阳性浅表性胃炎 2 6例作为对照。采用ELISA定性测定研究对象血清CagA -HpIgG。结果 :胃癌组血清CagA -HpIgG阳性率明显高于对照组 (P <0 .0 1)。结果提示 :CagA阳性的Hp毒力菌株在胃癌致病过程中起重要作用。

CagA^+ Hp感染对特发性血小板减少性紫癜患者PAIg水平及血小板生成的影响

目的研究幽门螺杆菌毒素相关基因A(CagA)阳性的幽门螺杆菌(Hp)感染对特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)患者血小板相关抗体(PAIg)、血小板和巨核细胞的影响,探讨其在ITP发病中的作用。方法采用13C尿素呼气试验对98例ITP患者进行检测,对Hp阳性患者进一步检测CagA蛋白抗体,按照检测结果分为Hp-、Hp+CagA-和Hp+CagA+3组;采用酶联免疫法检测ITP患者的PAIgG、PAIgM和PAIgA水平,同时分类计数其巨核细胞、产板巨核细胞、血小板数量;比较3组患者PAIg水平,巨核细胞、产板巨核细胞、血小板数量。结果 Hp+CagA+组的PAIgG、PAIgM、PAIgA水平以及PAIgG阳性率较Hp-和Hp+CagA-组显著升高(P<0.05),Hp+CagA+组的PAIgM、PAIgA阳性率与其余两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Hp-和Hp+CagA-两组在PAIg水平和阳性率方面比较差异均无统计学意义(P>0.05)。3组患者巨核细胞数量差异无统计学意义(P>0.05),Hp+CagA+组产板巨核细胞数量和百分比、血小板数量均较其余两组低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CagA蛋白可导致ITP患者PAIg水平增高、巨核细胞成熟障碍和血小板减少,Hp感染可能通过CagA蛋白参与ITP的发病机制。

免疫印迹法测定血清幽门螺旋杆菌抗体及其临床意义

目的研究幽门螺旋杆菌(Hp)抗体在慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌及正常对照组血清中的阳性情况;探讨不同类型Hp感染与胃肠疾病发病的关系及免疫印迹法测定血清HP抗体临床价值。方法应用免疫印迹法检测160例血清标本(包括慢性胃炎组、消化性溃疡组、胃癌组及正常对照组)中细胞毒素相关基因蛋白(CagA)、空泡毒素(VacA)、尿素酶A(UreA)、尿素酶B(UreB)以及鞭毛蛋白抗体的表达情况,计算阳性率,用统计学方法比较各组的差异。结果各患病组CagA抗体阳性率明显高于正常对照组(P<0.01)。鞭毛抗体和VacA抗体,各组无明显差异(P>0.05);而UreA、UreB抗体阳性率正常对照组明显低于患病组(P<0.05)。结论Ⅰ型Hp感染是胃肠疾病发生和发展的关键。免疫印迹法用于HP感染的普查,分型以及治疗后的复查有其独特的优点,值得临床推广。

幽门螺杆菌Ⅰ型与Ⅱ型感染的血清学检测和临床应用

非侵入性检测幽门螺杆菌(Hp)感染的方法中.血清Hp抗体检测已成为临床常用的方法。用于检测血清Hp抗体和CagA-Hp抗体的试剂盒相继问世.对于临床进行Hp诊断及分型具有一定意义,但是尚不能对Ⅱ型Hp进行判定。

幽门螺杆菌vacA基因型和cagA基因及其表达产物与胃十二指肠疾病的关系

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)感染是慢性胃炎(chronic gastritis，CG)和消化性溃疡(peptic ulcer，PU)的病因之一。也是胃癌(gastric cancer，GC)的危险因素。Hp的空泡形成毒素基因(vacuolating toxin gene，vacA)型和细胞毒素相关基因(cytotoxin-associated gene，cagA)