HP450基因的克隆及其重组载体pMD18-HP450的构建与鉴定

目的构建HP450基因的克隆载体。方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术克隆HP450基因,T-A连接到pMD18-T载体。以菌液为模板做PCR、酶切和测序鉴定pMD18-HP450重组质粒载体。结果菌液PCR扩增出目的条带、重组体的酶切产物合理,测序显示目的基因与基因库中的H1基因100%同源。结论实现了HP450基因的克隆及其重组质粒载体pMD18-HP450的构建。

HP450基因的克隆及质粒载体的构建和鉴定

目的HP450基因的克隆载体构建。方法用RT-PCR技术克隆HP450基因,T-A连接到PMD18-T载体,经菌液PCR,酶切鉴定.构建成PMD18-HP450重组质粒载体。结果测序显示完全正确,实现了HP450基因的克隆和质粒载体的构建。结论可以对重组成功的HP450基因进行体外表达和动物的体内应用.