中国汉族人群人类血小板抗原HPA-15(Gov)多态性调查

目的研究中国汉族人群人类血小板抗原HPA15(Gov)系统多态性,评估其在血小板配型输注中的作用。方法采用PCRSSP技术对1000名来自不同省份汉族无关献血者进行HPA15系统基因分型。结果HPA15在所调查的7个省份汉族人群中的分布差异无显著性意义,在1000名汉族中HPA15a和15b基因频率分别为0.5320和0.4680,与HardyWeinberg平衡吻合;与其它种族的HPA15分布相比较,也无显著性差异。在随机输血中HPA15a和15b抗原不配合的机会分别为0.1711和0.2029。结论本调查数据表明,随机输血中供受者HPA15抗原不配合比例在中国汉族人群中高达37%,这对研究同种免疫血小板减少症和开展血小板同型输注具有指导意义。

人类血小板抗原HPA-15系统PCR-SSP基因分型技术的建立

本研究目的是采用PCR-SSP技术建立人类血小板抗原HPA-15系统的基因分型方法,并应用于血小板供者库的HPA基因定型。采用第11届国际输血协会(ISBT)血小板血清学与基因分型协作组推荐的序列特异性引物,调节引物浓度、Mg2+离子浓度和探索最佳PCR扩增条件,建立HPA-15系统基因分型技术。该分型技术的准确性和可靠性,采用第11届ISBT血小板协作组提供的质控样本进行验证,同时采用本研究合成的引物及商品化试剂盒,对50名随机的汉族血小板捐献者进行HPA-15系统基因分型,作为平行对照。应用本研究的方法,对第11届ISBT送检的10份考核样本进行基因分型。结果表明:基因分型结果与ISBT公布的结果完全一致。50名随机的血小板志愿捐献者,经本研究的方法及美国G&T公司的试剂检测,基因分型的结果相符合;观察到的基因频率:HPA-15a和-15b分别为0.5100和0.4900。结论:本研究建立的HPA基因分型技术具有简便、快速、准确的特点,适合于常规HPA基因分型,具有广泛的应用前景。

广东地区汉族人群人类血小板特异性抗原HPA-15(Gov)基因多态性分析

目的研究广东地区汉族人群人类血小板特异性抗原HPA-15(Gov)系统多态性。方法用PCR-SSP方法对广州血液中心随机采集的500名汉族无偿献血者进行HPA-15系统基因分型。结果广东地区500名汉族无偿献血者HPA-15aa,HPA-15bb和HPA-15ab的基因型频率分别为25%、21%和54%。研究人群HPA-15的基因型分布与Hardy-Weinberg(HW)平衡法则吻合。与其他4个省份汉族人群中HPA-15基因频率的分布比较无显著性差异(P>0.05);在与其他种族人群HPA-15分布的比较,与南美洲的印地安人和非洲的贝宁人群有显著性差异(P<0.05)。结论HPA-15系统具有多态性,且HPA抗原分布不配合比率较高,这对研究同种免疫血小板减少症和开展血小板同型输注的相关研究提供实验基础。

乌鲁木齐地区哈萨克族献血人群HPA-15基因多态性分析

目的分析乌鲁木齐地区哈萨克族献血人群血小板特异性抗原HPA-15基因多态性,为临床血小板输注提供依据。方法采用聚合酶链-序列特异性引物技术(PCR-SSP)对乌鲁木齐地区100名无血缘关系的哈萨克族献血者的HPA-15系统进行基因分型,计算基因型频率和基因频率。结果哈萨克族献血人群HPA-15a/15a、HPA-15a/15b、HPA-15b/15b基因型频率分别为0.21、0.53、0.26。HPA-15a、HPA-15b的基因频率分别为0.475和0.525。HPA-15a、HPA-15b抗原不配合率分别为0.1997和0.1747。结论乌鲁木齐地区哈萨克族HPA-15抗原不配合概率高,可能导致产生同种免疫性血小板抗体的概率增加,在临床血小板输注中的作用值得重视。

大连地区汉族人群HPA-15基因多态性分析

目的分析大连地区汉族人群血小板特异性抗原HPA-15基因多态性,探讨其在血小板输注中的临床意义。方法采用PCR-SSP法对大连地区100名汉族无血缘关系血小板捐献者的HPA-15系统进行基因分型。结果大连地区汉族人群HPA-15aa、HPA-15ab、HPA-15bb基因型频率分别为0.3600、0.4400、0.2000。HPA-15a、HPA-15b的基因频率分别为0.5800、0.4200。与我国其他地区汉族人群比较,分布差异无统计学意义。在随机输血中,HPA-15抗原不配合概率为0.3685。结论在随机输血中,HPA-15抗原不配合概率高,在血小板输注中应加以重视。

甘肃人群人类血小板抗原HPA-15多态性调查

目的:研究甘肃人群人类血小板抗原HPA-15系统多态性,评估其在血小板配型输注中的作用。方法:采用PCR-SSP技术对201名健康无血缘关系的血小板捐献者进行HPA-15系统基因分型。结果:HPA-15a和15b基因频率分别为0.6194和0.3806;同国内其它9个地区人群的HPA-15分布相比较,与7个地区人群有显著性差异。在随机输血中HPA-15a和15b抗原不配合的机会分别为0.1239和0.2365,a、b抗原不配合率合计为0.3604。结论:本调查数据表明,随机输血中供受者HPA-15抗原不配合比例在甘肃人群中高达36.04%,这对研究血小板同种免疫性疾病和开展相合血小板输注具有指导意义。

青岛地区汉族人群HPA-1—5,15多态性分布研究

目的研究青岛地区汉族人群人类血小板抗原(HPA)1-5,15抗原分布多态性。方法采用PCR-SSP方法对青岛地区918名无血缘关系固定血小板无偿捐献者进行HPA1-5及HPA-15系统的基因分型.结果各被检系统等位基因频率分别是1a=0.9940,1b=0.0060,2a=0.9319,2b=0.0681,3a=0.5822,3b=0.4178,4a=0.9897,4b=0.0104,5a=0.9804,5b=0.0196,15a=0.4913,15b=0.5087;HPA基因频率分布与国内资料比较,HPA-1与北方人群(河南),HPA-2与南方人群(四川)差异有统计学意义;与台湾人群HPA-2,-4,与日本人群HPA-2,-3,-5,与美国黑人HPA-1,-2,-5,与白人HPA-1,-4,-5,-15分别有统计学显著性差异。结论青岛地区汉族人群HPA分布具有本地人群特点。本组HPA数据分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,可以作为北方汉族人群HPA基因分布频率数据库和青岛本地化血小板供者HPA资料库。

人类血小板抗原-15系统PCR-SBT分型技术的建立

目的建立人类血小板抗原(HPA)-15系统的分型方法,并应用于血小板供者库的HPA基因定型。方法采用本研究合成的引物及G&T公司的商品化试剂盒,应用PCR-SBT技术对200名随机的汉族血小板捐献者进行HPA-15系统基因分型,采用第l4届ISBT血小板协作组提供的l0份质控标本以及德国Inno-train公司提供的质控样品作为平行对照,进行验证。结果 200名汉族血小板志愿捐献者HPA基因频率为HPA-15a 0.430、HPA-15b 0.570;基因分型结果与ISBT公布的结果及Inno-train公司提供的质控样品的结果完全一致。结论所建立的HPA基因PCR-SBT分型技术具有高分辨率、高通量、高精确度、能直接发现新的等位基因等特点,具有广泛的应用前景。

中国山东地区汉族人群血小板特异性抗原-15基因多态性分析

目的:分析山东地区汉族人群血小板特异性抗原(HPA)15基因多态性分布特点。方法:采用PCR-序列特异性引物(PCR-SSP)技术对108例无血缘关系汉族人进行HPA-15基因分型,计算等位基因频率、基因型频率并与其他种族、地区人群相关资料比较。结果:等位基因HPA-15a和HPA-15b分布频率分别为0.5139和0.4861;基因型HPA-15a15b、-15a15a、-15b15b频率依次为0.2407、0.2130、0.5463;HPA-15基因分布与越南、德国、奥地利人近似,而与印地安人差异有显著性(P<0.05)。结论:山东地区汉族人HPA-15基因存在多态性,并具有明显的种族和地域性差异。

HPWA/SBA-15催化合成2-叔丁基对甲酚

以SBA-15负载磷钨酸(HPWA)为催化剂,甲基叔丁基醚(MTBE)和对甲酚为原料,在小型固定床反应器上进行了合成2-叔丁基对甲酚的试验研究,试验考察了HPWA负载量、反应温度、反应空速及原料配比对反应转化率、选择性的影响。试验结果表明,经HPWA改性后SBA-15的酸性增强,对甲酚转化率增大。适宜的反应条件为,反应温度160℃,HPWA负载量40%,空速3.0 h-1,原料MTBE和甲酚摩尔比为1.5。在适宜的条件下,对甲酚的转化率65.87%,2-叔丁基对甲酚的选择性97.81%。

贵阳地区汉族人群人类血小板抗原1～5,15基因多态性与2型糖尿病合并周围神经病变的相关性研究

目的探讨人类血小板抗原1～5,15(HPA-1～5,15)基因多态性与贵阳市汉族2型糖尿病合并周围神经病变的发生是否具有相关性。方法 2型糖尿病合并周围神经病变患者75例(DPN组),不合并周围神经病变患者24例(非DPN组),健康体检者100例(对照组)。采用酚/氯仿方法提取DNA,用多聚酶链反应-序列特异性引物方法进行基因组分型。结果 DPN组、非DPN组的HPA-1aa、2aa、3aa型基因频率均明显高于对照组,而DPN组与非DPN组之间差异无显著性;DPN组、非DPN组的HPA-1a、2a、3a等位基因频率明显高于对照组,而DPN组与非DPN组之间差异无显著性。HPA-4、5、15的基因型、等位基因频率在对照组、DPN组与非DPN组之间比较差异均无显著性。结论 HPA-1～5,15基因多态性与贵阳市汉族人群2型糖尿病合并周围神经病变的发生可能无关。

儿童急、慢性特发性血小板减少性紫癜HPA基因多态性分析

目的:探讨广西地区儿童急、慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)的HPA-2和HPA-15等位基因频率分布情况及HPA-2和HPA-15基因多态性与儿童ITP发病的潜在联系。方法:收集2010年1月至2014年12月确诊为急性和慢性ITP的各46例患儿的临床资料,运用聚合酶链反应技术(PCR)结合直接测序方法,对急、慢性ITP两组各46例患儿及对照组48例健康儿童进行HPA-2和HPA-15基因分型。结果:3组之间HPA-2和HPA-15等位基因频率比较均有显著性差异(P<0.05),每2组比较分析显示,HPA-2和HPA-15等位基因频率在慢性ITP组与对照组间差异显著,有统计学意义(P<0.05),而急性ITP组与对照组及慢性ITP组与急性ITP组相比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:HPA-2与HPA-15基因多态性与儿童慢性ITP发病有关,与儿童急性ITP发病无关。

CD109表达量及保存方法的相关性研究

目的分析中国南方人群HPA-15基因型分布频率,研究血小板上HPA-15抗原表达量。寻找较好的血小板保存方法以维持HPA-15的高表达量,为单克隆抗体俘获血小板抗原技术(MAIPA)检测HPA-15同种抗体提供合适的供者血小板。方法 1)随机选取广州血液中心的健康血小板单采献血者109名,留取EDTA抗凝管全血。SSPPCR方法检测HPA-15基因型。流式细胞术检测血小板上HPA-15抗原表达量。2)另随机选取健康献血者的单采血小板67例,将每份血小板分为2份,1份重悬于EDTA-PBS中放于4℃保存作为检测组A,另1份留于血小板辫子中放于血小板振荡仪中作为检测组B,在d 0、1、2、3、7、14检测2组血小板上HPA-15的检测含量,比较2组HPA-15含量的变化。结果 1)109名随机健康献血者HPA-15a和HPA-15b的基因频率是0.495和0.505。流式细胞术检测HPA-15抗原的MFI值的范围2.44-20.4,阳性率3.2%-86.7%。不同HPA-15基因型之间,HPA-15抗原表达量有统计学差异(P<0.05)。2)分析比较AB这2个组,随着测量时间点的推移,2组HPA-15的表达量均有降低,但检测组B中HPA-15的表达含量高于检测组A,且2组的MFI值有统计学差异(P<0.05)。结论 HPA-15a和HPA-15b的基因分布频率相近,HPA-15抗原表达含量整体水平偏低且个体差异性大。体外保存方式下,HPA-15的表达含量随着时间推移逐渐降低,4℃保存方式下HPA-15含量降解尤为明显。血小板振荡仪中保存血小板的方法为MAIPA检测HPA-15抗体提供更合适的血小板抗原。