早产儿颅内出血与血小板参数变化及血小板膜糖蛋白GPIbαHPA-2基因多态性的相关性研究

目的探讨早产儿颅内出血(ICH)与外周血血小板参数变化的关系,分析血小板膜糖蛋白GPIbαHPA-2基因多态性与ICH的相关性。方法选择2005年5月至2007年5月在温州医学院附属育英儿童医院新生儿科住院的胎龄<34周、出生体重<1500g的早产儿为研究对象。按生后2周内头颅B超检查结果,分为ICH组和无ICH组。ICH组根据ICH分度结果分为轻度(Ⅰ和Ⅱ度)和重度ICH(Ⅲ和Ⅳ度)亚组。入选患儿在入院第2天检测血小板各项参数,采用PCR及限制性内切酶分析法检测血小板膜糖蛋白GPIbαHPA-2基因多态性。各组等位基因比例采用Hardy-Weinberg平衡检验。结果ICH组纳入68例,其中轻度ICH亚组53例,重度ICH亚组15例;无ICH组纳入75例。ICH组PLT和平均血小板体积(PCT)显著低于无ICH组,P<0.05;重度ICH亚组较轻度ICH亚组上述指标下降更显著,P<0.05。ICH组58/68例、无ICH组65/75例成功进行了血小板膜糖蛋白GPIbαHPA-2基因多态性检测。ICH组血小板膜糖蛋白GPIbαHPA-2的各基因型比例为:TT77.6%(45/58例),TM17.2%(10/58例),MM5.2%(3/58例);M基因频率为13.8%(16/116频次);无ICH组为TT89.2%(58/65例),TM10.8%(7/65例),MM0;M基因频率为5.4%(7/130频次)。两组M基因频率差异有统计学意义。轻度ICH亚组与重度ICH亚组M基因频率差异无统计学意义(12.5%vs20.0%)。ICH组和无ICH组各基因型比例符合Hardy-Weinberg遗传平衡。含有M等位基因患儿PLT和PCT显著低于无M等位基因患儿。结论①ICH早产儿存在血小板参数异常现象;②血小板膜糖蛋白GPIbαHPA-2基因多态性与早产儿ICH发生的关联性值得更细化的研究;③血小板膜糖蛋白GPIbαHPA-2M等位基因可能与早产儿ICH的严重程度无关。

血小板血型抗原HPA-2在CHO细胞中的表达

目的 在 CHO细胞中表达血小板血型抗原 HPA- 2 a和 2 b。方法 从人巨核细胞系 MO7e中采用 RT- PCR方法扩增出血小板血型抗原 HPA- 2抗原位点所在的血小板糖蛋白 b氨基端 30 2个氨基酸的 c DNA,并将第 4 34位的 C突变为T,使得相应的氨基酸苏氨酸 (Thr)突变为蛋氨酸 (Met)。将 HPA- 2 a和 2 b基因插入真核表达质粒 pc DNA3.1(+) ,将重组质粒 p HPA2 a和 p HPA2 b以脂质体介导的转染方法导入 CHO细胞中 ,以 G4 18筛选获得抗性克隆 ,表达产物用瑞斯托菌素诱导血小板凝集试验的抑制作用测定活性。结果 获得了人血小板血型抗原 HPA- 2 a和 HPA- 2 b的基因 ,并在 CHO细胞中进行了表达。表达产物具有 v WF结合功能。结论 成功地表达了人血小板血型抗原 HPA- 2 a和 HPA- 2 b,对进一步研究血型抗原特定表位及功能。

血小板特异性抗原HPA-2基因分型的研究

血小板表面具有复杂的血型抗原，通常将其分为两类：一类是血小板相关抗原，主要由红细胞的ABO血型系统和HLA决定；另一类是血小板特异性抗原（Human platelet antigen，HPA），由血小板特有的抗原决定簇组成，表现血小板独特的遗传多态性。HPA位于血小板膜糖蛋白上，是血小板本身固有的抗原。同种血小板抗体一般由输血、妊娠或造血干细胞移植等免疫刺激而产生^[1]。

河南汉族动脉硬化性脑梗死人群血小板膜糖蛋白HPA-2基因多态性检测

目的:探讨河南汉族人群中血小板膜糖蛋白Iba(GPIba)基因HPA-2多态性与动脉硬化性脑梗死(ABI)的关系。方法:采用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测436例河南汉族ABI患者和549名正常对照者GPIbaHPA-2位点基因型及等位基因频率。结果:在河南汉族人群中ABI组HPA-2的a/a和a/b基因型频率分别为90.1%和9.9%,未发现b/b基因型;2组间3种基因型和等位基因频率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:GPIbaHPA-2多态性可能与河南汉族人群ABI的发生无关联性。

济南市流动采血点A型与B型血小板捐献者HPA-2基因型频率的比较

目的 探讨血小板糖蛋白HPA-2基因型在A型和B型血小板捐献者中的分布频率.方法 收集血小板捐献者A型44名,B型44名,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)扩增GP HPA-2基因,产物经限制性内切酶Hinl Ⅰ消化后确定其基因型.结果 在A型和B型血小板捐献者中,血小板糖蛋白HPA-2 2a/2a基因型频率分别是0.95、0.91;2a/2b基因型频率分别是0.05、0.07;2b/2b基因型频率分别是0、0.02.结论 血小板糖蛋白HPA-2基因型频率在A型和B型血小板捐献者中的分布无显著性差异.

济南市B型与O型血小板捐献者HPA-2b等位基因频率的分布比较

探讨血小板糖蛋白HPA-2b等位基因频率在济南市B型和O型血小板捐献者中的分布比较。方法:收集济南市45名B型和55名O型血小板捐献者的血液,应用聚合酶链反应(PCR)扩增血小板 HPA-2基因,产物经限制性内切酶消化后确定基因型,计算出等位基因频率。结果:45名B型血小板捐献者中,检出2a纯合子41人、2a/2b杂合子3人、2b纯合子1人;55名O型血小板捐献者中,检出2a纯合子47人、2a/2b杂合子8人。经卡方检验,χ2 0.20 P0.571,P>0.05。结论:HPA-2b等位基因频率在济南市B型和O型血小板捐献者中的分布无统计学意义。

血小板抗原HPA-2基因分型熔解曲线法分析

目的建立熔解曲线分析法进行HPA-2基因分型,并检测大连地区汉族人群HPA-2等位基因频率。方法实时荧光PCR后用熔解曲线分析法进行HPA-2基因分型,与常规PCR-SSP方法进行比较,用熔解曲线分析法对辽宁地区155名汉族血小板捐献者的HPA-2系统进行基因分型,获得HPA-2等位基因分布数据,并与国内部分地区的人群进行比较。结果基因型为HPA-2aa的样本,熔解曲线呈现单一的峰型,Tm值在(85±1)℃;基因型为HPA-2ab的样本熔解曲线呈现双峰型,Tm值在(80±1)℃和(85±1)℃;基因型为HPA-2bb的样本熔解曲线呈现单一的峰型,Tm值在(80±1)℃。熔解曲线分析法基因分型结果与PCR-SSP法完全一致。大连地区汉族人群HPA-2a、HPA-2b等位基因频率分别为0.9161,0.0838。与南京、上海、新疆地区汉族人群以及新疆地区维吾尔族人群均很相似(P>0.05),但与海南黎族人群相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用熔解曲线分析法进行HPA-2基因分型具有简单、快速、准确等优点,优于常规的PCR-SSP方法;HPA-2等位基因频率分布在国内存在种族差异。

HPA-5/O_2脱木素系统的研究

对存在七钼五钒磷酸钠的氧脱木素系统 (HPA 5 /O2 )的工艺条件进行研究 ,发现通过在酸性条件的氧漂系统中添加七钼五钒磷酸钠 (HPA 5 )作为催化剂 ,可以提高氧漂过程中的木素脱除率 ,HPA 5 /O2 脱木素系统残液中的COD含量很低 ,而且残液可以循环使用 。

2型糖尿病患者下丘脑-垂体-肾上腺轴功能变化的临床意义

目的探讨2型糖尿病患者下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能变化的临床意义。方法对127例2型糖尿病患者行口服糖耐量试验,并计算胰岛素敏感指数(ISI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、葡萄糖及胰岛素曲线下面积(AUCG,AUCI),同时检测患者血、尿皮质醇,血促肾上腺皮质激素(ACTH)等,将所得结果与65例健康体检正常者(对照组)进行比较。结果 (1)2型糖尿病患者中HPA轴功能紊乱率为22.8%(29/127),对照组为10.8%(7/65)。2型糖尿病患者多项HPA轴指标,包括8:00和16:00血皮质醇、日平均血皮质醇及尿游离皮质醇均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)伴HPA轴功能紊乱的2型糖尿病患者空腹血糖(FPG)、糖负荷2 h后血糖(2 h PPG)及AUCG均高于不伴HPA轴功能紊乱的患者(P<0.05)。剔除性别、年龄、BMI及腰围的影响,2型糖尿病患者8:00、16:00和24:00血皮质醇、日平均血皮质醇及尿游离皮质醇与FPG、2 h PPG及AUCG均呈正相关(P<0.05);多元逐步回归分析提示AUCG是影响8:00、16:00血皮质醇及日平均血皮质醇的独立相关因素;2 h PPG与24:00血皮质醇及尿游离皮质醇独立相关。结论 2型糖尿病患者HPA轴功能紊乱的患病率升高,2型糖尿病患者血糖升高与HPA轴功能紊乱互为因果。

HP WA/SiO_2催化剂催化合成十二烷基苯

采用溶胶 -凝胶法 ,将不同含量的杂多酸负载在硅基上制得HPWA/SiO2 催化剂 ,并用苯和十二碳烯烷基化反应评价了该催化剂的催化性能 ,考察了催化剂组成、焙烧温度、反应温度、空速对烷基化反应性能的影响 ,得到催化剂的最佳组成 :杂多酸的含量 30 % (ω)。找出最佳操作条件 :焙烧温度4 5 0℃ ,反应温度 2 2 0℃ ,空速 1h 1(WHSV) ,同时对该催化剂的稳定性和再生性进行了研究。试验结果表明 ,该催化剂活性高、稳定性好且易于再生 ,可替代液体强酸用于烷基化反应 。

乙酰肝素酶-2在结肠癌中的表达及其临床意义

目的研究乙酰肝素酶-2(Hpa-2)在结肠癌组织中的表达及其与各临床病理因素的相关性。方法采用免疫组化检测结肠癌组织和癌旁正常结肠组织中Hpa-2蛋白表达情况。结果结肠癌组织中Hpa-2蛋白表达阳性率高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。结肠癌临床分期越高,阳性表达率越高;分化程度越高,阳性表达率越低;Hpa-2表达在有淋巴结转移组中明显高于无淋巴结转移组(P均<0.05)。结论 Hpa-2在结肠癌的进展中起着重要作用,可作为判断大肠癌恶性程度的指标。

米非司酮对2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响

糖皮质激素（glucocorticoids,GC）作为降糖激素的反调激素,它对于维持葡萄糖稳态发挥着巨大的作用,研究表明,GC活性升高与胰岛素抵抗密切相关,GC与其受体结合后,发挥着促进肝糖异生、葡萄糖转运系统异常等多方面作用。

乳腺浸润性导管癌中Hpa和C-erbB-2联合表达与淋巴结转移的关系

目的了解乙酰肝素酶(Hpa)、癌基因(C-erbB-2)在乳腺浸润性导管癌中联合表达与淋巴结转移的关系。方法选用经手术切除乳腺纤维腺瘤标本14例,乳腺浸润性导管癌标本81例,采用免疫组织化学的方法检测Hpa、C-erbB-2在两组标本中的表达,分析两因子不同表达状况与乳腺浸润性导管癌淋巴结转移数目的关系及两因子间的相互关系。结果在乳腺浸润性导管癌组中Hpa、C-erbB-2的阳性表达分别为52例(72.84%)、29例(35.80%),而在乳腺纤维腺瘤组中无表达(P<0.05);C-erbB-2的表达与Hpa的表达有关(P<0.05),且二者表达强度呈正相关(r=0.668,P<0.01);同时表达Hpa与C-erbB-2的肿瘤淋巴结转移高于单一表达Hpa或C-erbB-2者(P均<0.01)。结论Hpa可能促进了C-erbB-2蛋白的表达,二者共同作用可能促进了乳腺浸润性导管癌生长、浸润和转移。

HPWA/SBA-15催化合成2-叔丁基对甲酚

以SBA-15负载磷钨酸(HPWA)为催化剂,甲基叔丁基醚(MTBE)和对甲酚为原料,在小型固定床反应器上进行了合成2-叔丁基对甲酚的试验研究,试验考察了HPWA负载量、反应温度、反应空速及原料配比对反应转化率、选择性的影响。试验结果表明,经HPWA改性后SBA-15的酸性增强,对甲酚转化率增大。适宜的反应条件为,反应温度160℃,HPWA负载量40%,空速3.0 h-1,原料MTBE和甲酚摩尔比为1.5。在适宜的条件下,对甲酚的转化率65.87%,2-叔丁基对甲酚的选择性97.81%。

CXCR4、HPA、MMP-2在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨CXCR4、HPA、MMP-2在食管鳞癌组织中的表达和临床意义。方法应用免疫组化对120例手术切除的食管鳞癌标本和10例癌旁食管黏膜进行染色,检测CXCR4、HPA及MMP-2的表达,并探讨三者之间的相关性。结果 CXCR4、HPA和MMP-2在120例食管鳞癌组织中的阳性表达率分别为74.17%、58.33%、67.50%,明显高于癌旁组织(P<0.05)。CXCR4的表达与肿瘤的浸润深度、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05);HPA的表达与肿瘤的浸润深度、肿瘤分化程度、TNM分期有关(P<0.05);MMP-2的表达与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05),CXCR4与HPA/MMP-2的表达具有显著相关性(r=0.267,P=0.03/r=0.206,P=0.024),HPA与MMP-2的表达无相关性(r=0.153,P=0.093)。结论 CXCR4在食管鳞癌的发展过程中可能起主要作用,通过某些机制使HPA和/或MMP-2的活性增加,促进肿瘤的侵袭、转移。

振腹干预对2型糖尿病大鼠血糖的调节作用与对其HPA轴影响的相关性

目的研究振腹干预对2型糖尿病大鼠血糖的调节与对其HPA轴的影响是否具有相关性。方法将60只大鼠随机分为对照组10只、模型组50只,对模型组以链脲佐菌素(STZ)腹腔注射合并高糖高脂饲料喂养的方式进行造模,后将符合纳入标准的模型组大鼠分为模型组12只,治疗组12只。对治疗组大鼠行振腹干预,干预结束后将大鼠处死,取材并进行相应检测,对所得数据进行整理分析。结果治疗结束后,治疗组与模型组相比,FBG水平明显降低,有统计学意义(P<0.05),肾上腺指数水平明显降低,有统计学意义(P<0.05),肾上腺CORT浓度明显降低,有统计学意义(P<0.05),下丘脑CRH浓度明显降低,有统计学意义(P<0.05)。治疗组与对照组相比,FBG水平及肾上腺指数仍较高(P<0.05)。结论振腹干预能有效降低2型糖尿病大鼠的FBG水平,且其肾上腺皮质分泌功能、HPA轴活性也相应降低,说明振腹法调节2型糖尿病大鼠糖代谢可能与其改善了肾上腺皮质分泌功能及HPA轴功能有关。

黄芪多糖对2型糖尿病大鼠HPA轴及海马糖皮质激素受体水平的调节作用

目的:观察黄芪多糖(APS)对2型糖尿病大鼠HPA轴及海马组织中糖皮质激素受体水平的调节作用。方法:30只SD大鼠随机分为正常对照组、DM模型组、APS干预组组,采用小剂量链脲佐菌素加高脂饮食饲养的方法建立2型糖尿病肥胖大鼠模型。成模4周后,断头处死所有大鼠,检测各组大鼠血CRH、ACTH、CorT的含量,以及海马组织中糖皮质激素受体(GR)mRNA的表达。结果:DM模型组血ACTH、CorT含量较正常组显著升高,与模型组大鼠相比,APS干预组大鼠血ACTH、CorT含量显著降低(P<0.05);DM模型组海马GRmRNA含量较正常组极显著降低,与模型组大鼠相比,APS干预组大鼠海马GR mRNA含量明显上调(P<0.01)。结论:APS保护高糖环境下的海马组织,改善HPA轴功能。

过氧化体增殖物激活型受体γ2基因多态性与2型糖尿病及其早期动脉粥样硬化的相关性

目的探讨过氧化体增殖物激活型受体γ2基因多态性与2型糖尿病及早期动脉粥样硬化的关系。方法应用聚合酶链反应—限制性片长多态性检测大连地区汉族人2型糖尿病患者(包括动脉粥样硬化组和非动脉粥样硬化组)过氧化体增殖物激活型受体γ2基因外显子B的Pro12Ala变异。结果在动脉粥样硬化组、非动脉粥样硬化组及对照组中过氧化体增殖物激活型受体γ2基因Pro/Pro基因型频率分别为0.961、0.896及0.892,Pro/Ala分别为0.039、0.104及0.108,Ala/Ala均为0,过氧化体增殖物激活型受体γ2基因Pro12Ala变异在对照组和糖尿病组间以及非动脉粥样硬化组和动脉粥样硬化组间差异均无显著性(P=0.407,P=0.096)。结论过氧化体增殖物激活型受体γ2基因Pro12Ala变异与2型糖尿病及其早期动脉粥样硬化的发生无明显相关。

青岛地区汉族人群HPA-1—5,15多态性分布研究

目的研究青岛地区汉族人群人类血小板抗原(HPA)1-5,15抗原分布多态性。方法采用PCR-SSP方法对青岛地区918名无血缘关系固定血小板无偿捐献者进行HPA1-5及HPA-15系统的基因分型.结果各被检系统等位基因频率分别是1a=0.9940,1b=0.0060,2a=0.9319,2b=0.0681,3a=0.5822,3b=0.4178,4a=0.9897,4b=0.0104,5a=0.9804,5b=0.0196,15a=0.4913,15b=0.5087;HPA基因频率分布与国内资料比较,HPA-1与北方人群(河南),HPA-2与南方人群(四川)差异有统计学意义;与台湾人群HPA-2,-4,与日本人群HPA-2,-3,-5,与美国黑人HPA-1,-2,-5,与白人HPA-1,-4,-5,-15分别有统计学显著性差异。结论青岛地区汉族人群HPA分布具有本地人群特点。本组HPA数据分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,可以作为北方汉族人群HPA基因分布频率数据库和青岛本地化血小板供者HPA资料库。