EF延缓HPAT轴衰老的基因表达谱研究

目的:淫羊藿总黄酮(EF)延缓下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺(HPAT)轴衰老的分子机制。方法:利用基因芯片技术,分别检测淫羊藿总黄酮组、右归饮组、桃红四物汤组、老年大鼠对照组及青年大鼠对照组下丘脑、垂体、肾上腺、脾脏淋巴细胞的基因表达谱。结果:老年大鼠和青年大鼠相比,HPAT轴多种神经递质、激素、细胞因子或其受体表达下调;EF组HPAT轴多种神经递质、激素、细胞因子或其受体表达上调;右归饮组及桃红四物汤组未见广泛的调节作用。结论:老年大鼠HPAT轴与生长、发育、衰老相关的基因表达以衰退的表现为主;EF能上调神经递质受体的表达并通过NEI网络的下行通路激活神经内分泌和免疫系统;通过下调促凋亡、抗增殖基因,上调抗凋亡、促增殖基因的表达,重塑淋巴细胞基因表达的平衡,延缓免疫衰老。

择时合用滋阴、益阳方对肾虚衰老模型HPAT轴的影响

目的:比较研究滋阴方六味地黄丸、益阳方金匮肾气丸单用及择时合用对肾虚衰老模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺(HPAT)轴的影响。方法:大鼠随机分为6组,除正常组外,其余组采用5%D-半乳糖100 mg.kg-1颈背部皮下注射联合糖皮质激素地塞米松0.5 mg.kg-1腹腔注射共造模6周,造模两周后,实验第15天开始各给药组分别给予动物ig 1.16 g.kg-1六味地黄丸、金匮肾气丸、六味地黄丸(早服)合金匮肾气丸(晚服)、金匮肾气丸(早服)合六味地黄丸(晚服),给药4周。比较各组血清皮质醇(COR)、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量及外周全血CD4+,CD8+值。结果:与正常对照组相比,肾虚衰老模型组血清COR含量(6.35±1.65)μg.L-1显著降低(P<0.05),血浆ACTH(53.00±11.86)μg.L-1,CRH(7.04±1.37)μg.L-1含量显著升高(均P<0.05),CD8+水平(23.70±3.93)%显著降低(P<0.01),CD4+/CD8+(2.73±0.29)显著升高(P<0.01)。与肾虚衰老模型组相比,滋阴益阳组COR含量(10.76±2.09)μg.L-1显著上调(P<0.01),益阳组、益阳滋阴组ACTH(40.98±8.55),(39.55±14.67)μg.L-1含量显著下调(P<0.05),滋阴组、滋阴益阳组、益阳滋阴组CRH含量(5.39±1.00),(5.27±0.91),(5.61±1.08)μg.L-1均显著下调(P<0.05或P<0.01),各用药组CD8+水平,CD4+/CD8+无显著性差异,各组CD4+水平无显著性差异。结论:滋阴、益阳方单用及择时合用对肾虚衰老模型大鼠HPA轴的影响作用不同,其中以滋阴益阳方的作用较优,但未观察到对免疫功能紊乱的调节作用。

淫羊藿对大鼠下丘脑—垂体—肾上腺—胸腺轴抑制模型的影响

本研究用皮质酮造成大鼠下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺(HPAT)轴抑制模型,观察补肾助阳要药淫羊藿对受抑大鼠的调节作用。结果表明,模型大鼠垂体、肾上腺、胸腺重量明显减轻;下丘脑室旁核小细胞区促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)阳性细胞及正中隆起CRF阳性神经纤维及垂体前叶促肾上腺皮质激素(ACTH)阳性细胞明显减少,胞体变小,染色变淡,肾上腺及胸腺小体明显减少;血浆ACTH、皮质酮以及淋巴细胞增殖反应、自然杀伤细胞活性(NKCC)、γ-干扰素(γ-IFN)诱生能力较正常组明显降低。淫羊藿灌胃能有效改善皮质酮对HPAT轴形态与功能的抑制。提示淫羊藿对神经内分泌免疫的调节起了重要作用。

外源性糖皮质激素对大鼠下丘脑─垂体─肾上腺─胸腺轴的影响

本文观察大鼠每在皮下注射皮质酮（１～５０ｍｇ／ｋｇ，连续１４天）后下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺（ＨＰＡＴ）轴的形态与机能改变，结果表明：实验大鼠垂体，肾上腺，胸腺重量减轻，下丘脑单胺类递质含量升高，下丘脑室旁核促肾上腺皮质素释放因子（ＣＲＦ）分泌细胞及正中隆起ＣＲＦ神经纤维和垂体前叶促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）分泌细胞等数量减少，染色变淡，血浆皮质酮（ＣＯＲＴ）和ＡＣＴＨ浓度降低。

新生期大鼠皮下注射谷氨酸单钠后下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴的改变

目的：观察弓状核（ＡＲＣ）毁坏后下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺轴（ＨＰＡＴ）的改变。方法：大鼠出生后第２、４、６、８、１０ｄ皮下注射谷氨酸单钠（ＭＳＧ）４ｍｇ／ｇ，ｂ．ｗ。成年后检测ＨＰＡＴ轴的形态与功能。结果：ＭＳＧ大鼠体重明显轻于生理盐水组，每１００ｇ体重所含垂体重量高于生理盐水组，肾上腺与胸腺重量未见明显差异；室旁核（ＰＶＮ）促肾上腺皮质激素释放激素阳性细胞、正中隆起（ＭＥ）促肾上腺皮质激素释放激素阳性纤维及垂体前叶促肾上腺皮质激素分泌细胞数量明显多于生理盐水组，染色较深；血浆皮质酮及血浆促肾上腺皮质激素浓度高于生理盐水组。胸腺萎缩，淋巴细胞增殖反应、自然杀伤细胞细胞毒活性及白细胞介素２、γ干扰素的诱生能力明显低于生理盐水组。结论：１ＭＳＧ－大鼠ＨＰＡ轴功能亢进；２ＭＳＧ－大鼠细胞免疫受抑。

中药“天鼓”对卡那霉素中毒性耳聋的预防作用及其机理研究

目的 :观察补肾活血中药“天鼓”对卡那霉素 (AMK)中毒性耳聋的预防作用 ,并从对神经 内分泌 免疫网络调节功能影响的角度探讨其作用机理。方法 :豚鼠每日皮下注射AMK 30 0mg kg× 10d ,同时每日给服天鼓中药饲料 90d ,测听觉脑干诱发电位 (ABR)阈值 ,并进行耳蜗基底膜铺片、外毛细胞计数、琥珀酸脱氢酸 (SDH)活性、扫描电镜等药效学观察 ,以及肾功能 (血清尿素氮 )跟踪测定 ,肾脏、肾上腺病理切片 ,血皮质醇、睾酮、甲状腺素含量等测定 ,通过对豚鼠下丘脑 垂体 肾上腺 甲状腺 胸腺 (HPAT)轴功能的观察 ,评价“天鼓”中药对MAK致耳聋的预防效果 ,并探讨其对耳蜗结构、功能保护的作用机理。结果“天鼓”中药可减轻MAK所致耳蜗外毛细胞损伤率 (P <0 0 5 ) ,降低AMK所致的听阈升高 (P <0 0 5 ) ,提高SDH活性及甲状腺素水平 (P <0 0 0 1) ,增加胸腺、垂体重量 ,改善对肾脏的损伤 ,减轻肾上腺萎缩程度。结论 :“天鼓”中药对卡那霉素中毒性耳聋具有明显的预防作用 ,其机理可能是通过增强HPAT轴神经 内分泌 免疫网络的调节功能 ,减轻肾毒性反应 ,改善全身机能状态 ,提高内耳抗毒能力 。

2-甲酰吡啶缩氨基硫脲合成和分子结构测定

用α-皮考啉,硫磺和氨基硫脉合成的C_7H_5N_4S·2H_2O为橙黄针状晶体,四方晶系,空间群14_I/a.a=1.367 1(1),c=2.217 6(3)nm.V=4.144nm^2,Z=16,D_(cal)=1.360g/cm^3.D_(oba)=1.350g/cm^3.经石墨单色化的Moka辐射,以ω/2θ方式扫描收集1885个独立反射,其中1253个可观察反射参加结构解析和精修.最终残差指数R=0.041,位移/误差=0.09,单位权重观察值最大误差为1.550.晶体结构分析揭示化合物属于E型结构.每一不对称单位统计上包含二个结晶水,而且观察到明显的O…H-N类型的氢键的存在.

老年大鼠下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴基因表达谱的研究

目的 阐明衰老时下丘脑 -垂体 -肾上腺 -胸腺 (HPAT)轴基因表达规律 ,探索神经内分泌和免疫衰老的分子机制。方法 利用基因芯片技术研究老年大鼠与青年大鼠 HPAT轴差异表达的基因。结果 老年大鼠下丘脑多种神经递质或其受体如 GABA- AR、α1 ER、Glu R、多巴胺转运蛋白表达下调 ;垂体多种促性腺激素包括 FSH、LH、Gn RH下调 ;生长激素和生长激素释放因子受体下调 ;脾淋巴细胞促凋亡基因 caspase- 1、caspase- 3、CPP32β、Dnaseγ、PKC delta、Bnip31、p47上调 ,抗凋亡基因 cathepsin B、MTA1下调 ,抗增殖基因 Rb、BTG1表达上调 ,促增殖基因 Jagged1及 c- myc、c- fos、v- jun、Rgc32、Cyclin B1、Cyclin G- associated kinase下调。结论 衰老时 HPAT轴的衰退以下丘脑 -垂体 -性腺轴、下丘脑 -垂体 -生长激素轴、免疫系统受损最为明显 ,神经递质、生长激素、促性腺激素基因低表达及免疫细胞促凋亡基因高表达而抗凋亡基因低表达 ,促增殖基因低表达而抗增殖基因高表达是受损的分子机制。

以药测证对肾虚和肾阳虚大鼠基因表达谱的比较研究

目的在分子水平揭示肾虚和肾阳虚内涵的异同。方法肾虚证采用自然衰老大鼠模型,肾阳虚证采用皮质酮大鼠模型,均用淫羊藿总黄酮(epi mediumflavonids,EF)以药测证,分别取下丘脑、垂体、肾上腺、淋巴细胞(HPAT)组织,采用Affymetrix公司的大鼠全基因组芯片,各两次重复基因表达谱研究。结果老年大鼠和皮质酮大鼠与青年大鼠比较,在HPAT轴上首先是众多的神经递质显著下调,接下来是生长激素类和性激素类都显著下调,其表达下调的模式呈高度一致,EF能逆转上述基因的表达;但EF在皮质酮大鼠显著上调热休克蛋白(HSP)和细胞色素P450以及促甲状腺激素(TSH)大幅度上调。结论两组大鼠均具有肾虚的内涵,但肾阳的主要物质基础是甲状腺激素促进能量代谢的氧化磷酸化过程。

丙烯酸β-羟丙酯与聚氯乙烯膜的紫外光接枝改性

采用液相接枝方法 ,在紫外线辐照下 ,合成了一系列丙烯酸 β-羟丙酯 (β -HPAT) /聚氯乙烯接枝膜。讨论了引发剂浓度、单体浓度、光照时间、光照强度对接枝率的影响。结果表明 ,引发剂浓度为 6 .5 1× 10 -3 mol/L ,单体浓度 2 .0mol/L ,光照时间为 2 .0h ,且光照强度越强时 ,接枝率最大。接枝膜的结构特征通过FT -IR光谱进行了确证 ,最后 ,对接枝膜进行TGA分析 ,结果表明聚氯乙烯经过表面改性后 ,表面极性增大 ,热稳定性大大提高。

肾虚衰老模型的建立及其与D-半乳糖衰老模型的比较研究

目的:建立肾虚衰老模型,从抗氧化能力,HPAT(下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺)轴功能,骨代谢等方面对其进行评价,并与D-半乳糖衰老模型进行比较。方法:皮下注射D-半乳糖溶液模拟大鼠衰老模型,同时腹腔注射地塞米松溶液建立肾虚衰老模型,以血清丙二醛(MDA)含量,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力及肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活力,肾上腺、胸腺及脾脏脏器指数,外周全血CD4+,CD8+,血清皮质醇(COR),骨钙素(BGP)及血浆促肾上腺皮质激素(ACTH),促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量为指标,对模型进行评测。结果:与正常对照组比,衰老模型组、肾虚衰老模型组肝脏SOD活力极显著降低(均P<0.01),血清MDA含量极显著升高(均P<0.01),肾虚衰老模型组血浆ACTH含量显著升高(P<0.05)。与对照组和衰老模型组比,肾虚衰老模型组大鼠体重极显著降低(均P<0.01),血清GSH-Px活力表现为极显著降低和显著降低(P<0.01,P<0.05),肾上腺指数表现为显著降低和极显著降低(P<0.05,P<0.01),血清COR含量显著降低(均P<0.05),血浆CRH含量表现为显著升高和极显著升高(P<0.05,P<0.01),血清BGP含量极显著降低(均P<0.01),CD4+显著降低,CD8+极显著降低(P<0.05,P<0.01),CD4+/CD8+升高,但无显著性差异。结论:肾虚衰老模型抗氧化能力降低,HPAT轴功能紊乱,骨代谢异常。而D-半乳糖衰老模型仅在抗氧化能力方面表现出明显的差异。