甲状腺激素受体基因调控动物繁殖的研究进展

甲状腺激素(thyroid hormone,TH)及其受体除了参与调控机体正常发育和代谢平衡外,还在动物繁殖活动中发挥重要的生物学作用。甲状腺激素受体α(thyroid hormone receptor alpha,TRα)和甲状腺激素受体β(thy-roid hormone receptor beta,TRβ)属于配体依赖性核受体超家族成员,分别由THRA和THRB两个基因编码,这两个基因的选择性剪接或转录起始位置不同可导致不同组织中存在多种受体亚型。本文首先介绍了TRs的基本特征;然后以下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic-pituitary-gonadal axis,HPGA)为主线,综述了TRs通过参与促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)脉冲释放、促性腺激素水平、促性腺激素受体和性激素受体的表达实现对性腺轴系统的繁殖调控;最后,从TH-GnRH通路、TH/TRs在哺乳动物季节性繁殖中的作用及在鸟类季节性繁殖中的作用3个方面概述了TH/TRs对动物季节性繁殖的调控作用,有助于深入了解动物季节性繁殖的分子机制,为季节性发情的人工调控提供新思路。

标准化六味地黄胶囊药效学研究

目的:开展标准化六味地黄胶囊药效学研究,并与六味地黄胶囊比较其滋补肾阴的作用.方法:利用氢化可的松注射液建立大鼠肾阴虚模型,研究标准化六味地黄胶囊对下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)、性腺(HPGA)轴的作用;观察标准化六味地黄胶囊对肾阴虚小鼠体液、细胞和非特异性免疫的作用.结果:①标准化六味地黄胶囊高剂量组血清中cAMP、ACTH、Cor.、MDA含量降低(P<0.05,P<0.01),cGMP、T、SOD含量升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001);中剂量组血清中cAMP、ACTH、Cor.、MDA含量有所降低(P<0.05,P<0.01),cGMP、T、SOD含量升高(P<0.05,P<0.001);低剂量组血清中cGMP含量升高(P<0.05),Cor.含量降低(P<0.05);杞菊地黄胶囊血清中cAMP、ACTH、Cor.、MDA含量降低(P<0.05,P<0.001),cGMP、T、SOD含量升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001),标准化六味地黄胶囊中剂量组作用优于六味地黄胶囊.②标准化六味地黄胶囊高、中剂量组血清中IgG和IgM含量降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),小鼠廓清指数K、吞噬指数α有所增加(P<0.01,P<0.001);T淋巴细胞刺激指数显著增加,分别为158.2%、126.4%,标准化六味地黄胶囊中剂量组与杞菊地黄胶囊作用相当,优于六味地黄胶囊.结论:标准化六味地黄胶囊能改善肾阴虚证,调节HPA、HPGA轴及免疫功能紊乱,且作用优于六味地黄胶囊.

乙烯利对青春期前SD雌性大鼠性早熟的影响及其机制研究

目的:探讨乙烯利促进青春期前SD雌性大鼠性早熟的作用及相关分子机制。方法:先后两批SD雌性孕鼠自行产子后由亲鼠自养,雌仔鼠在出生15日龄(PND15)时,根据体质量,按窝别随机分为4组,分别为阴性对照组(蒸馏水)和低、中、高剂量(分别为134、269、538 mg/kg)乙烯利染毒组。各组动物均经口灌胃,每天1次,连续5 d。第1批动物用于观察阴道开口时间;第2批动物处死后取血液,下丘脑和垂体组织,后用酶联免疫吸附法(ELASA)检测血清FSH()促卵泡生成素和LH(黄体生成素)水平,实时荧光定量PCR(qPCR)检测下丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)相关基因KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR的mRNA表达水平。结果:与阴性对照组相比,乙烯利中剂量组阴道开口时间提前(P<0.05);高剂量组阴道开口时间明显延长(P<0.05)。在qPCR检测结果中,与对照组相比,乙烯利中剂量组HPGA轴相关基因表达增加,高剂量组降低,且差异均有统计学意义(P<0.05)。而血清中LH、FSH水平的变化无统计学意义(P>0.05)。结论:中剂量时乙烯利具有促进青春期前SD大鼠性早熟的作用,其机制可能与影响HPGA轴相关基因表达有关。

基于混合单亲遗传算法的车辆运输问题求解

本文运用混合单亲遗传算法(Hybrid Partheno Genetic Algorithm,)求解车辆运输问题.我们用罚函数法将约束优化问题转化为无约束优化问题,HPGA采用序号编码的方式进行运算.生成初始种群时,在拟染色体中插入车辆序号,尽可能生成符合约束的子路径,由子路径拼接成完整的运输路径,降低罚函数的计算量;选择操作中内嵌最优保存策略,保证算法全局收敛;取消双亲交叉操作,每条染色体上独立改变基因产生新的个体,避免发生早熟早收敛现象;提出邻域搜索,使得GA能对某些指定区域进行重点搜索,加快算法在最优解附近的寻优速度;以CVRP作为HPGA的测试模型,采用Christofides和Eilon提出的标准VRP测试算例进行数值实验,和其他算法进行对比分析,验证了HPGA计算量少、收敛速度快和不会产生早熟早收敛现象.

黄精不同部位改善“肾精亏虚”雄鼠生殖功能低下的作用研究

研究黄精不同部位对房事不节致肾精亏虚模型雄鼠生殖功能低下的作用与机制。选取性功能良好的雄性ICR小鼠50只,随机分为正常组(NC)、模型组(MC)、黄精正丁醇部位组(0.4 g·kg^(-1), HJCT)、黄精剩余部位组(0.4 g·kg^(-1), HJSY)、黄精超微粉组(1.0 g·kg^(-1), HJCW)。采用Coolidge效应诱导雄性小鼠房事不节,建立肾精亏虚生殖功能低下小鼠模型。造模同时给予相应药物,连续8周。测定小鼠肛温、抓力、自主活动次数、负重游泳时间、性行为(捕捉、骑跨和射精)等肾精亏虚证候指标;采用ELISA法测定血清中睾酮(T)、促黄体生成素(LH)、精子生成素(FSH)、皮质醇(COR)、促性腺激素释放激素(GnRH)、雌二醇(E_(2))等激素水平及精子内精浆果糖含量;采用苏木素-伊红(HE)染色观察睾丸组织病理变化;检测精子质量(精子密度、精子活力、精子存活率以及精子畸形率);采用Western blot法检测睾丸组织增殖及凋亡蛋白表达。黄精正丁醇部位、剩余部位以及超微粉能显著增加模型小鼠抓力、肛温、自主活动次数、负重游泳时间以及性行为(捕捉、骑跨以及射精)次数,升高血清中T、LH、GnRH、E_(2)激素含量,降低COR和FSH水平激素含量;增加睾丸组织的湿重;增加模型小鼠精子密度、精子活力以及精子存活率,降低精子畸形率;升高模型小鼠精囊中的精浆果糖的含量;减轻小鼠睾丸病变,抑制睾丸组织细胞的凋亡。黄精正丁醇部位改善下丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)紊乱,增强性行为以及改善精子质量方面优于黄精剩余部位和黄精超微粉;黄精超微粉抑制睾丸组织细胞凋亡方面优于黄精正丁醇部位和黄精剩余部位。黄精各部位均能够改善“肾精亏虚”雄鼠生殖功能,抑制睾丸组织细胞凋亡情况,其作用机制可能与改善HPGA紊乱有关。

青春期性发育相关调控基因研究进展

青春期（puberty）是从少年到成人的过渡时期,即从第二性征出现至性成熟及体格发育完善的一段时期〔1〕。青春期启动时间、发育速度、发育水平均存在明显个体差异。现已证实,下丘脑-垂体-性腺轴（HPGA）对青春期性发育起决定性作川，其所分泌的各种激素直接影响青春期性发育，而这些激素的分泌量和结构是否发生变化，则受控于各相关基因。本研究对青春期性发育过程中不同层面的基因调控作用进行综述。

穴位埋线及中药对去势肥胖大鼠瘦素与下丘脑-垂体-性腺轴的影响

目的:探讨穴位埋线与中药加味对去势肥胖大鼠瘦素(LP)、神经肽Y(NPY)及下丘脑-垂体-卵巢轴(H-P-O)的调节作用。方法:选用双侧卵巢切除法复制去势肥胖模型,分组治疗后观察去势肥胖大鼠体质量、Lee,s指数、腹腔脂肪湿重、血清雌二醇E2、促卵泡生成素(FSH)、LP、NPY,下丘脑促性腺激素释放素(GnRH)、下丘脑弓状核瘦素受体(OB-R)阳性细胞数及脂肪细胞计数的变化。结果:各治疗组治疗后大鼠肥胖指标不同程度下降。LP、NPY、GnRH、FSH水平下降,E2水平上升,下丘脑弓状核瘦素受体(OB-R)阳性细胞数增加。结论:经过穴位埋线加中药治疗,可改善H-P-O轴平衡失调和瘦素抵抗,达到减肥效果。

绵羊繁殖轴相关组织TPH1和TPH2基因表达分析及TPH2基因多态性与产羔数的关系

为探讨TPH1和TPH2基因在绵羊不同繁殖状态下的表达差异及TPH2基因多态性与小尾寒羊产羔数的关系,利用实时荧光定量PCR技术检测该2个基因在不同繁殖状态下成年苏尼特羊(短光照3只,长光照3只)和小尾寒羊(卵泡期3只,黄体期3只)的大脑、小脑、下丘脑、松果体、垂体、卵巢、输卵管、子宫、肾脏和肾上腺等10种组织中的相对表达量;同时采用Sequenom MassARRAY■SNP技术检测TPH2基因单核苷酸多态位点SNP在常年发情绵羊品种(小尾寒羊、湖羊和策勒黑羊)和季节性发情绵羊品种(滩羊、苏尼特羊和草原型藏羊)的多态性,并将基因多态性与小尾寒羊产羔数进行关联分析。结果表明:该2个基因在2个绵羊品种各组织广泛表达,TPH1基因在苏尼特羊下丘脑和松果体中短光照表达量极显著高于长光照(P<0.01),在苏尼特羊垂体中短光照表达量显著高于长光照(P<0.05),在小尾寒羊垂体和卵巢中卵泡期显著低于黄体期(P<0.05);TPH2基因在苏尼特羊卵巢组织长光照下的表达量显著高于短光照(P<0.05),TPH2基因在小尾寒羊下丘脑组织中卵泡期的表达量极显著高于黄体期(P<0.01)。小尾寒羊中TPH2基因g.107854166C>T和g.1078541669C>T2个SNP位点关联分析表明,该2个位点与季节性发情性状和小尾寒羊第1、2以及第3胎产羔数均无显著关联(P>0.05)。综上,TPH1和TPH2基因在苏尼特羊绵羊下丘脑和松果体中呈季节性光照节律差异表达,暗示其可能参与季节性发情上游基因的调控,而TPH2基因可能参与调控小尾寒羊下丘脑中激素分泌和卵巢发育,但g.107854166C>T和g.1078541669C>T不是调控季节性发情和小尾寒羊产羔数的关键位点。