HPGPC法检测注射用益气复脉(冻干)中的糖苷类大分子物质

目的建立注射用益气复脉(冻干)(红参、麦冬、五味子)中的大分子物质的HPGPC检测方法。方法采用高效凝胶色谱法,色谱柱为Ultrahydrogel 250(7.8 mm×300 mm);流动相0.1 mol/L氯化钠溶液;体积流量0.3 mL/min;柱温30℃;示差折光检测器,检测器温度40℃;进样量20μL。结果对5批注射用益气复脉(冻干)测定发现均无大分子物质。结论该方法简便、快捷,能用于注射用益气复脉(冻干)中大分子物质的排除性检查。

HPGPC测定麦类中β-葡聚糖含量

采用高效凝胶渗透色谱（HPGPC）测定β-葡聚糖含量,对其测定条件、准确度、重复性和回收率等进行研究,并采用该方法对麦类β-葡聚糖含量进行测定,研究其相对分子质量分布规律。结果表明：该方法具有准确性高、重复性好、简单易行等优点,可用于麦类中β-葡聚糖含量的测定。采用该方法对麦类中β-葡聚糖含量测定结果显示,不同品种小麦、燕麦、荞麦β-葡聚糖含量分别为0.42%~0.61%,2.16%~3.43%,1.17%~1.79%。该研究还表明,麦类中β-葡聚糖的含量及相对分子质量的分布随品种、产地的不同而有所差异。

HPGPC检测固定化肠膜明串珠菌产葡聚糖的研究

葡聚糖是蔗糖经肠膜明串珠菌发酵所得产物,经水解纯化处理后具有一定分子量且均一度较高的小分子葡聚糖(又叫右旋糖酐)是国际公认的优质代用血浆。然而现行右旋糖酐制备工艺较难达到医药临床的相关要求,因此,探索能定向合成特定分子量分布右旋糖酐的新途径,具有十分明显的现实意义和理论价值。通过HPGPC在线检测固定化肠膜明串珠菌发酵产物——葡聚糖的重均分子量,发现可通过固定化技术实现对肠膜明串珠菌发酵产物的分子量控制;并且发现在相同发酵时间内,固定化菌发酵产生的葡聚糖含量比游离菌发酵略多;固定化菌发酵产生的葡聚糖重均分子量比游离菌发酵产生的葡聚糖重均分子量低。

HPGPC法测定羧基麦芽糖铁重均分子质量和分子质量分布

目的:建立测定羧基麦芽糖铁重均分子质量(M_w)和分子质量分布(D)的方法。方法:采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)检测3批羧基麦芽糖铁注射液(进口)和羧基麦芽糖铁原料(自制)的M_w和D。色谱柱为TSK G4000 PWXL,流动相为0.1%叠氮化钠溶液,流速为0.5 ml/min,检测器为示差折光检测器,柱温为35℃,进样量为20μl。采用GPC软件计算结果。结果:精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3.0%(n=6);进口样品中M_w为157 667,D为1.30;自制品的M_w为162 000,D为1.42。结论:该方法精密度、稳定性、重复性、耐用性均较好,且操作简便,可用于羧基麦芽糖铁M_w和D的检测。

HPGPC测定注射用灰树花倍他葡聚糖相对分子质量的影响因素研究

目的 考察高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定注射用灰树花倍他葡聚糖（GFGt）相对分子质量（Mr）的影响因素。方法 采用HPGPC分别以不同的流动相、色谱柱、上样浓度、上样体积、温度和辅料比例测定GFGI的Mr，并对测定结果进行比较。结果 分别以纯水，质量浓度0.2g·L^-1NaN3，0．1mol·L^-1NaNO3和0．1mol·L^-1Na2SO4溶液为流动相进行测定，GFG1的Mr依次为822410,177520，29112和25066；以0．2g·L-NaN3溶液为流动相时，采用TSKG4000PWxl和Shodex OHpak SB-804HQ色谱柱的Mr测定结果相差12．06％；在0．5～10g·L^-1的上样质量浓度内GFGI的Mr测定结果相差8．33％；在上样体积为5，30μL内相差8．65％；在温度为30～45℃范围内相差7．26％；但在不同的辅料比例下们，的测定结果相近.结论 流动相对GFGI的Mr测定结果有很大的影响，色谱柱、上样浓度、上样体积和测定温度对Mr测定结果有明显影响，辅料比例无明显影响。

右旋糖酐铁注射液峰位相对分子质量和重均相对分子质量的HPGPC测定

目的:比较右旋糖酐铁注射液峰位相对分子质量(M_p)和重均相对分子质量(M_w)的测定在质控中的应用。方法:采用凝胶液相色谱法,示差检测器。用 TSKG4000PW(300 mm×7.5 mm)凝胶柱测定右旋糖酐铁的 M_p,流动相是0.1%叠氮钠溶液,流速1.0 mL·min^(-1);用 TSKG3000PW(300 mm×7.5 mm)凝胶柱测定右旋糖酐的 M_w,流动相为0.71%硫酸钠溶液,流速0.5 mL·min^(-1)。采用 GPC 软件计算。结果:进口右旋糖酐铁注射液的 M_p 和 M_w 均符合标准要求,而国产右旋糖酐铁注射液除1个产品的 M_w 符合要求外,其余产品的 M_p 和 M_w 均不符合要求。结论:右旋糖酐铁络合物的 M_p 用于质量控制似乎更合理些。

HPGPC联合HPLC-ELSD测定樟芝子实体中多糖分子量、多糖组成和单糖含量

目的:建立高效凝胶色谱法(HPGPC)测定樟芝子实体中多糖分子量,HPLC-ELSD法测定樟芝子实体多糖组成和单糖含量的分析方法。方法:HPGPC法采用ShodexOHPak SB-803HQ色谱柱(300 mm×8 mm);流动相:0.70%硫酸钠溶液(含0.02%的叠氮钠);柱温:35℃,流速:0.5 mL/min。HPLC-ELSD法采用Zorbax Carbohydrate色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(80∶20);柱温:30℃;流速:0.5 mL/min。联合上述两种方法进行测定。结果:采用上述HPGPC法可以成功计算出樟芝子实体多糖的分子量,采用HPLC-ELSD法可以测定樟芝多糖的组成及单糖的含量。结论:HPGPC联合HPLC-ELSD法可以简单快速的测定樟芝子实体多糖的分子量、多糖的组成和单糖的含量,可以用于樟芝子实体多糖提取纯化后的质量控制。

HPGPC法测定低分子右旋糖酐氨基酸注射液的右旋糖酐40分子质量和分子质量分布

建立低分子右旋糖酐氨基酸注射液中右旋糖酐40的HPGPC测定方法。采用高效凝胶色谱法，色谱柱为TSK-Gel 4000GPWXL（7．8mm×300mm）；流动相为0．7％硫酸钠（含0．02％叠氮钠）溶液；流速0．5ml／min；柱温35℃；示差折光检测器。多糖重均分子质量的线性范围为10000-133800（R^2=1．0000），测定的重均分子质量为35742。本法简便。

HPGPC法对五种中药多糖的分子量分布测定和种类考察

目的:为了对药用多糖种类和分子量的分布情况有一个大致的了解。方法:本实验通过高效凝胶渗透色谱技术,分析了五种多糖分子量的分布情况。结果:五种多糖分子量分布情况很相似,明显分成两部分。结论:多糖小分子量部分是一个纯度很高的多糖,具有一定的开发价值。

HPGPC法测定天花粉免疫活性多糖的相对分子质量

目的测定天花粉多糖的相对分子量及分子量分布。方法采用高效凝胶渗透色谱法,色谱条件：TSK G4000PWXL凝胶色谱柱（7.8×300mm,5μm）;TSK PWXL凝胶色谱预柱（6.0×40mm）;流动相为0.71%硫酸钠溶液;流速0.5m L·min^-1;示差折光检测器。结果天花粉免疫活性多糖的重均分子量在15423-7555之间,分子量分布宽度小于2.0。相对分子量在4.60×10^3-1.34×10^5范围内线性关系良好（R^2=0.9993）。结论该方法简便,重现性和稳定性均较好,可以作为天花粉多糖分子量及其分布测定的有效方法。

HPGPC法测定麦芽糖铁糖浆分子量与分子量分布

目的建立测定麦芽糖铁糖浆的分子量与分子量分布的方法。方法采用高效凝胶色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC),色谱柱为PSS HEMA凝胶色谱柱,检测器为示差折光检测器,流动相为磷酸盐缓冲液(p H6.8),柱温为45℃,流速为0.5 m L/min。结果 3批样品的重均分子量分布在45000~47000 Da之间,精密度、重现性好。结论该方法简单,重现性好,可以作为控制麦芽糖铁糖浆中分子量与分子量分布的方法。

HPGPC测定雪莲口服液中多糖的分子量

目的：建立雪莲口服液中多糖分子量的HPGPC测定方法。方法：TSK-Gel G4000PWXL（7.8mm×30.0cm）色谱柱和TSK-Gel G4000 PWXL（6.0mm×4.0cm）预柱,0.7%硫酸（0.02%叠氮钠）溶液为流动相;流速为0.5mL.min^-1;柱温35℃;示差折光检测器。结果：多糖重均分子量的线性范围10000～133800（r=0.9993）,测得重均分子量为37199。结论：本方法简便,快捷,可用于雪莲口服液多糖分子量的测定。

HPGPC柱串联法测定肠膜明串珠菌发酵产物研究

蔗糖经肠膜明串珠菌发酵可生成不同分子量右旋糖酐,发酵液中除含有蔗糖底物及右旋糖酐产物外,还有一定的果糖、葡萄糖等副产物。对发酵液中蔗糖、果糖的含量以及产物右旋糖酐的分子量同时进行跟踪检测,对于计算底物消耗量、产物生成量以及探讨右旋糖酐的合成过程规律有重要意义。分别采用KS 801单柱、TSK G4000 PW与KS 801双柱串联的高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）,测定不同分子量右旋糖酐标准品,以及肠膜明串珠菌粗酶液发酵蔗糖而得的发酵液。研究表明,TSK G4000 PW与KS 801双柱串联对样品的分离效果更好。蔗糖浓度在0.1×10^-3-0.1×10^-2mol/L范围内与峰面积呈现良好的线性关系,且该方法的RSD值小于3.00%。表明,双柱串联的高效凝胶渗透色谱法准确、可靠,适用于分析样品中同时含有小分子糖类及大分子物质的研究。

HPGPC-CAD和HPGPC-RID测定右旋糖酐40分子量及分子量分布的方法比较

目的:建立凝胶高效液相色谱(HPGPC)-电雾检测器(CAD)法测定右旋糖酐40葡萄糖注射液中右旋糖酐40分子量及分子量分布,与示差检测器(RID)测定结果进行比较。方法:采用HPGPC法,TSK G4000 PWXL色谱柱(300 mm×7.8 mm,10μm),CAD检测器流动相为甲醇-0.02 mol·L^(-1)甲酸铵(30∶70),RIP检测器流动相为0.71%硫酸钠溶液(内含0.02%叠氮化钠),使用WATERS公司GPC软件计算分子量及分子量的分布。结果:2种方法测定右旋糖酐40分子量线性范围均为2700~300600,HPGPC-CAD法线性良好(r=0.9972),精密度、稳定性、重复性试验(n=6)RSD分别为0.32%、0.23%、0.81%;HPGPC-RID法线性良好(r=0.9954),精密度、稳定性、重复性试验(n=6)RSD分别为0.20%、0.15%、0.26%。结论:2种方法稳定、可靠,均可用于右旋糖酐40分子量及分子量分布的测定。

黄精配方颗粒质量标准研究

目的 建立以多糖分子量(molecular weight,Mw)及其分布为质量控制指标的黄精和酒黄精配方颗粒质量标准。方法 通过酶解法考察去除辅料的适用性及其最佳反应条件,选取合适的辅料制备黄精和酒黄精配方颗粒,以多糖MW及其分布情况为指标,采用高效凝胶渗透色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)建立配方颗粒特征图谱。结果高温α-淀粉酶或糖化酶单独使用,均不能将可溶性淀粉和糊精酶解完全,而两种酶协同处理的酶解效果更好。高温α-淀粉酶和糖化酶最佳加酶量分别为辅料:酶用量1:1.5和1:2(g/m L)。黄精和酒黄精多糖的差异主要在MW>10 k Da部分,经酶法协同处理后,可溶性淀粉在MW>10 k Da部分的糖链已完全水解。各批次黄精配方颗粒以及酒黄精配方颗粒间特征图谱的相似度均大于0.9;且黄精与酒黄精配方颗粒之间的相似度均小于0.5。结论 该方法稳定、可靠,重复性好,能很好地区分黄精和酒黄精配方颗粒,可用于黄精和酒黄精配方颗粒的质量控制。

不同云芝菌株及提取工艺所得结合蛋白多糖的分析比较

分别用酚 -硫酸法、L owry- Folin法和高效液相凝胶渗透色谱法 (HPGPC)测定云芝菌丝体提取物云芝糖肽 (1)中糖和蛋白质的含量及分子量。来自 8株菌株的提取物其多糖含量为 41.1%～ 47.4% (P>0 .0 5 ) ;蛋白质含量为2 3.1%～ 36 .6 % (P<0 .0 5 ) ,分子量为 34k D～ 6 8k D。云芝菌丝体经碱提得到的提取物 1- K,多糖含量和分子量分别为 11.0 %和 14k D,均低于其进一步的醇沉物 1- KA(35 .8%和 38k D) ,但两者蛋白质含量为 36 .4%和 38.5 % ,无显著差异。菌丝体水提物 1- U A经纯化后得 1- U C,其多糖含量和分子量分别上升到 71.4%和 5 3k D。

龙牙百合多糖的纯化及其分子量的测定

本研究用DEAE-sepharose Fast Flow柱从百合水提物中分离纯化得到两种多糖LLP1、LLP2,经高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定LLP1为单一组分、LLP2为糖蛋白,将这两种多糖进行气相色谱分析。结果如下:LLP1由甘露糖、葡萄糖和阿拉伯糖组成,分子量为11756D,LLP2由半乳糖、鼠李糖和阿拉伯糖组成,分子量1038773D。

低分子肝素分子量及其分布的测定

目的：建立一种低分子肝素分子量及其分布测定的质量控制方法。方法：采用高效凝胶渗透色谱法（ＨＰＧＰＣ），色谱柱为ＳｈｏｄｅｘＡｓａｈｉｐａｋＧＦ－５１０ＨＱ（７．６ｍｍ×３００ｍｍ）或ＴＳＫＧ３０００ＳＷｘｌ（７．８ｍｍ×３００ｍｍ），理论塔板数以葡萄糖峰计算分别为１５２０６和１５７３１；柱温３５℃；流速０．５ｍｌ·ｍｉｎ－１；示差折光检测器和二极管阵列检测器联用，检测波长为２３４ｎｍ。结果：测得两个低分子肝素样品的重均分子量和分子量分布。结论：ＨＰＧＰＣ具有简便、快速和重现性好等特点，适合于该类药物的质量控制。