HPLC及LC-MS测定榛子中氯吡苯脲和多菌灵残留

本文采用高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱-质谱法(LC-MS)对干果榛子中氯吡苯脲和多菌灵残留量进行含量测定.HPLC和LC-MS均使用C18色谱柱,含量测定采取等度洗脱,流动相:甲醇-水(55∶45,体积比);体积流量:1.0 mL·min-1;测定波长:260 nm;柱温:30℃.LC-MS采取电喷雾离子源,梯度洗脱,体积流量:0.6 mL·min-1,柱温:30℃.结果表明,榛子中氯吡苯脲与多菌灵存在残留,氯吡苯脲质量浓度在1.00~10.00μg·mL-1范围内线性关系良好,加样回收率在95.58%~100.58%;多菌灵质量浓度在1.005~15.075μg·mL-1范围内具有良好的线性关系,加样回收率在95.61%~104.39%.实验证明,HPLC与LC-MS相结合的方法具有操作简便、灵敏度高、检出限低等优点,能有效地检测到榛子样品中膨大剂氯吡苯脲及杀菌剂多菌灵的残留,并确定其残留量,线性关系和回收率结果均令人满意.根据被检测的8批样品中氯吡苯脲和多菌灵两项农药残留量推断,作为一般干果食用榛子是安全的.

联萘基-芘衍生物结构和ECD光谱性质的理论研究

采用密度泛函理论方法研究s-联萘基-芘分子结构、联萘二面角、能隙、电子的圆二色(electronic circular dichroism, ECD)光谱等性质,系统考察其溶剂效应和取代基效应.研究发现,在苯、四氯化碳、氯仿、环己烷和水五种溶剂中,s-联萘基-芘分子的结构和ECD光谱等性质均相似.然而,在氯基、甲基、羟基、甲氧基和苯基五种取代基中,苯基取代基可以调节s-联萘基-芘分子的结构和ECD光谱等性质.

HPLC法测定1-氟萘中工艺杂质和遗传毒性杂质含量

建立了1-氟萘中的2种工艺杂质和1种遗传毒性杂质含量检测的HPLC方法。采用Phenomenex Gemini色谱柱(C18250×4.6mm,5µm);流动相为10mM碳酸氢钠+6mM三乙胺∶乙腈=55∶45,等度洗脱,采集时间为主峰的2倍保留时间;柱温为40℃;检测波长为220nm;流速为1.0mL/min;进样量为20μL。采用加校正因子的主成分自身对照法对各杂质进行计算,各杂质分离度良好,定量限为0.005~0.008μg/ml,线性关系良好,精密度和高中低三浓度准确度符合要求。实验结果表明该方法专属性强、灵敏度高、操作简便、重复性好、结果准确可靠,可用于1-氟萘中杂质控制。

HPLC测定蜈蚣配方颗粒中3,8-二羟基喹啉的含量

目的建立HPLC法测定蜈蚣配方颗粒中3,8-二羟基喹啉的含量。方法采用Kromasil 100-5 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以10 mmol/L的磷酸二氢钾溶液-甲醇(68∶32)为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长为252 nm。结果HPLC色谱图中阴性对照无干扰;3,8-二羟基喹啉在0.01163~1.395 mg/ml(r=0.9997)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为99.4%(RSD=2.7%)。结论该方法准确、稳定、可行,本文建立的方法经方法学验证可用于评价蜈蚣配方颗粒的质量。

基于HPLC-ECD研究牡荆叶抗氧化的谱-效关系

为研究牡荆叶指纹图谱与抗氧化活性的谱-效关系,该研究首先建立了18批牡荆叶的高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)指纹图谱,对不同来源牡荆叶药材进行聚类分析,鉴定主要酚类化合物且测定其含量,分析牡荆叶的总酚和总黄酮含量,并采用DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、氧自由基吸收能力法及铁离子还原能力法考察其体外抗氧化活性,通过皮尔逊相关分析、灰度关联分析及偏最小二乘回归分析法研究牡荆叶的谱-效关系。结果表明:(1)牡荆叶的指纹图谱标定21个共有峰,共指认出10个峰,其含量顺序为绿原酸>异荭草苷>木犀草苷>异牡荆素>异绿原酸A>异绿原酸C>原儿茶酸>荭草苷>异绿原酸B>新绿原酸;不同产地样品间相似性较高,相似度结果为0.816~0.983。(2)系统聚类分析显示,样品含量对分类有一定影响,不同来源样品被分为3类,其中南北方样品存在一定差异。(3)牡荆叶中总酚和总黄酮的含量分别为15.82~61.83 mg·g^(-1)和27.85~157.65 mg·g^(-1),样品均具不同程度的抗氧化活性。(4)谱-效关系表明,牡荆叶的抗氧化活性是多种化合物协同作用的结果,峰9(异荭草苷)、峰4和峰5(绿原酸)等化合物对牡荆叶药材抗氧化活性的贡献最大。综上表明,牡荆叶具有较好的抗氧化活性,其中主要的活性指标是异荭草苷和绿原酸。该研究结果可为牡荆叶抗氧化活性成分的筛选及其质量控制提供参考依据。

萹蓄HPLC-ECD指纹图谱建立与抗氧化活性评价

目的建立萹蓄HPLC-电化学检测(ECD)指纹图谱,并评价其抗氧化活性。方法萹蓄80%甲醇提取液的分析采用XBridge BEH shield RP18色谱柱(3.0 mm×150 mm,2.5μm);流动相乙腈-9.6 mg/mL柠檬酸溶液(pH 2.74),梯度洗脱;体积流量0.6 mL/min;柱温45℃;检测电压650 mV。采用铁离子还原能力、DPPH自由基清除能力和ABTS自由基清除能力评价抗氧化活性。再对指纹图谱共有峰与抗氧化活性进行灰色关联分析、偏最小二乘回归分析。结果17批样品指纹图谱中共有26个共有峰,通过与对照品比对指认出18种化学成分,相似度在0.944~0.991之间。表儿茶素、原花青素B2、原儿茶醛、儿茶素、洋蓟素、对香豆酸、异荭草苷、杨梅苷、槲皮苷、萹蓄苷等化学成分对抗氧化活性的贡献较大。结论HPLC-ECD指纹图谱结合谱效关系研究能明确萹蓄中不同化合物对抗氧化活性的贡献程度,可为萹蓄的质量控制提供参考依据。

HPLC-ECD法测定大鼠脑微透析液中的多巴胺及其代谢产物

目的：建立应用常规高效液相-电化学法（HPLC-ECD）测定大鼠脑微透析液中多巴胺（DA）及其代谢产物3，4-二羟基苯乙酸（DOPAC）和高香草酸（HVA）的方法。方法：将探针插入大鼠右侧纹状体，在清醒自由活动状态下，用Ringer氏液以1．5μl·min^-1的速度灌流，每20min收集1管透析液，将其注入HPLC-ECD，考察本方法的专属性、线性范围、精密度和准确度等，并对其中所含的DA、DOPAC、HVA进行测定。结果：3种物质在12．5～250μg·L^-1范围内线性关系良好，高、中、低3种浓度的回收率分别为98．33％、102．67％、92．33％．各物质的日内RSD值分别为3．3％、3．4％、2．5％；日间RsD值为4．2％、2．3％、5．6％。大鼠脑微透析液中的DOPAC及DA、HVA的含量分别为1．79±0．07、0．45±0．02、1．67±0．05μg·ml^-1（n=6）。结论：本方法简便、准确、稳定，可用于应用脑微透析技术进行的DA相关疾病的基础研究。

基于HPLC-ECD法与聚类分析的中国白酒品质鉴别

白酒中的活性物质影响人的味觉,是感官品评的重要指标之一,库仑阵列高效液相色谱法能够检测白酒中电化学活性物质。建立了我国白酒的HPLC-ECD检测方法,在最优色谱条件下,8通道能采集固态法白酒中102个信息峰,各物质得到了很好的分离,精密度、稳定性高;样品无需前处理,检测到的物质无需定性、定量分析,简便快捷、成本低。使用该方法对固态法白酒与酒精勾兑白酒进行分析,发现能够检测到白酒中多种活性物质,指纹图谱信息丰富,两种白酒谱图差异明显。同时,运用聚类分析对检测数据处理,能实现准确区分固态法白酒与酒精勾兑白酒。运用该方法进一步分析不同勾兑比例的固液法白酒,聚类结果与实际相符,白酒样品被准确分为4类:固态法白酒体积分数分别为10%、15%、75%和100%。该方法可以有效应用于白酒分类鉴定。

RP-HPLC-ECD测定通脉颗粒中3种化合物

目的:建立测定通脉颗粒中原儿茶醛、阿魏酸和黄芩苷的 RP-HPLC-ECD 分析方法。方法:采用 RP-HPLC-ECD 检测法,以 Zorbax SB—C_(18)(150 mm×4.6 mm,5.0 μm)为色谱柱,甲醇(A)、2%醋酸(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1);电化学检测器的工作电位为0.9 V;柱温为30℃。结果:原儿茶醛、阿魏酸和黄芩苷的线性范围分别为0.138～12.4μg·mL^(-1)(r=0.9999),0.130～11.7μg·mL^(-1)(r=0.9992)和0.192～240μg·mL^(-1)(r=0.9998);平均加样回收率(n=6)分别为97.4%(RSD=0.8%),98.7%(RSD=2.3%)和97.9%(RSD=2.9%)。结论:该法快速、灵敏、准确,可为通脉颗粒的质量控制提供科学依据。

HPLC-ECD检测羟自由基方法的研究

采用高效液相色谱结合库仑阵列多电极检测器体系（HPLC—ECD）建立了一套操作简便、高效、快速测定羟自由基的方法，并探究了检测的灵敏性，浓度和响应因子之间的线性关系，系统的稳定性等。2，3-二羟基苯甲酸（2，3-DHBA）、2，5-二羟基苯甲酸（2，5-DHBA）以及水杨酸（sA）的相关系数分别为0．9999、0．9996、0．9968。2，3-DHBA和2，5-DHBA的检出限都低于0．1ng／mL，SA的检出限均低于10ng／mL。各种物质的方法回收率为100．5％。102．9％。

双黄连注射液中咖啡酸和黄芩苷的HPLC-DAD-ECD法测定

目的:建立一种同时测定双黄连注射液中咖啡酸和黄芩苷含量的 HPLC-DAD-ECD 方法。方法:以 Zorbax SB-C_(18)(150 mm×4.6 mm,5.0μm)为色谱柱,(A)甲醇、(B)水-0.6%醋酸为流动相,采用的梯度洗脱程序为:0 min 时 A-B(25:75),5 min 时 A-B(28:72),10 min 时 A-B(37:63),13 min 时 A-B(55:45);流速为0.8 mL·min^(-1);柱温为25℃;二极管阵列检测器的检测波长为279 nm;电化学检测器的工作电位为0.6 V;采用标准曲线法对2种化合物进行定量。结果:咖啡酸和黄芩苷的线性范围分别为0.35～33.5μg·mL^(-1)(r=0.9997),1.30～1.25×10~3μg·mL^(-1)(r=0.9994);加样回收率分别为108%(RSD=1.2%),99.7%(RSD=1.6%)。结论:该方法快速、准确、重现,可为双黄连注射液的质量控制提供借鉴。

RP-HPLC-ECD检测血浆尿液中儿茶酚胺及其临床应用

目的 建立一种简便、准确、灵敏、易于临床推广的测定血尿中儿茶酚胺 (CAs ,包括NE、E、DA)的检测方法 ,并进行了临床血浆及 2 4小时尿液标本中CAs测定。方法 采用活性氧化铝吸附标本中CAs,酸解吸附后 ,以 3,4-二羟基苄胺 (DHBA)为内标 ,利用离子对反相高效液相色谱及电化学检测器进行测定。结果 显示NE、E、DA在 0 .15 6 - 10 0ng/ml浓度范围内与响应值 (色谱峰面积对内标峰面积之比 )线性关系良好 (r分别为0 .9998、0 .9999、0 .9998) ,其方法回收率分别为 6 3.2 %- 93.4%、6 5 .6 %- 10 3.7%、70 .4%- 111.3%,CV值为1.2 3%- 19.5 2 %,在嗜铬细胞瘤患者中CAs有显著升高。结论 该实验方法简单、准确、灵敏、特异性高 ,不失为一种敏感、可靠的诊断嗜铬细胞瘤的方法。

DA、Salsolinol及N-methyl-salsolinol的HPLC-ECD检测方法研究

采用高效液相色谱结合库仑阵列多电极检测器体系(HPLC-ECD)建立了一套操作简便、高效、快速测定多巴胺(DA)、6,7-二羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉(Salsolinol)和6,7-二羟基-1,2-二甲基-1,2,3,4 -四氢异喹啉(N-methyl-salsolinol)的方法,并研究该检测方法的灵敏性和稳定性,检测物质浓度和响应因子之间的线性关系。DA、Salsolinol及N-methyl-salsolinol的相关系数分别为1、1和0.9997;DA的检测限低于0.1ng/mL,Sal和NMSal的检测限低于0.5ng/mL,各种物质的方法回收率为98.5%-104.7%。

DA、5-HT及其代谢产物HPLC-ECD检测方法的研究

采用高效液相色谱结合库仑阵列多电极检测器体系(HPLC-ECD)建立了一套操作简便、高效、快速测定多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟色胺(5-HT)以及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的方法,并探究了检测的灵敏性,浓度和响应因子之间的线性关系,系统的稳定性等。DA、DOPAC、HVA、5-HT及5-HIAA的相关系数分别为0.9964、0.9999、1、0.9989、0.9999;HVA和5-HIAA的检测限都低于0.5ng/mL,DA、DOPAC及5-HT的检测限均低于0.1ng/mL,各种物质的方法回收率为85.6%-107.4%。

HPLC-ECD法测定川芎中药配方颗粒中原儿茶酸的含量

建立测定川芎中药配方颗粒中原儿茶酸的高效液相色谱电化学分析法,并用该方法测定2种不同批号的川芎中药配方颗粒.采用反相高效液相色谱电化学检测法,以Zorbax SB-C18(150 mm×4.6 mm,5.0μm)为色谱柱;甲醇-4%醋酸为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;检测电压为0.7V,柱温为30℃.结果显示原儿茶酸浓度在0.8-3.6μg/mL(r=0.9994)范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=6)为97.9%(RSD=1.7%).表明该法是一种快速、灵敏、准确的分析方法,可以为川芎中药配方颗粒的质量控制提供科学依据.

HPLC-ECD法测定小鼠脑组织内去甲肾上腺素的含量

目的:建立小鼠脑内去甲肾上腺素含量的高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)测定方法。方法:小鼠脑组织采用70%高氯酸沉淀蛋白后,以HPLC-ECD法进行分析。使用汉邦lichrospher C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为醋酸钾缓冲液-甲醇(95:5,pH 4.5),流速为1.0 ml·min^(-1),温度为25℃;电化学检测器电压为0.6 V,电流为100 nA,频率为0.05 Hz。结果:去甲肾上腺素在0.1～25μmol·L^(-1)范围内线性关系良好,日内、日间RSD分别小于7.81%和3.61%,回收率为75.05%,测得小鼠脑内去甲肾上腺素含量为(8.94±0.71)μg·g^(-1)。结论:该方法快速、准确。

HPLC-ECD法测定盐酸多巴胺预灌装注射液的含量

目的建立测定盐酸多巴胺预灌装注射液含量的HPLC-ECD方法。方法采用Diamonsil-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.11%庚烷磺酸钠溶液(含0.1 mmol/L EDTA-2Na及5%冰醋酸,用1 mol/L NaOH溶液调节pH值至3.4)-甲醇(70∶30,v/v)为流动相,玻碳电极为工作电极,银/氯化银电极为参比电极,工作电位为+0.65 V,流速1.0 ml/min,柱温20℃。结果盐酸多巴胺在0.05～5μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9,n=5),平均加样回收率为(99.19±4.03)%(n=3),日内及日间RSD均小于4%(n=3);3批样品中盐酸多巴胺的平均含量相当于标示量的(102.97±1.11)%。结论该方法准确、快速、灵敏度高,能够用于盐酸多巴胺预灌装注射液的含量测定。

HPLC-ECD检测尿液中儿茶酚胺含量

目的建立一种准确可靠、易于临床推广的测定尿液中儿茶酚胺(CAs,包括NE、E、DA)的检测方法。方法采用活性氧化铝吸附标本中CAs,酸解吸附后,以3,4-二羟基苄胺(DHBA)为内标,利用离子对高相液相色谱及电化学检测器进行测定。结果显示NE、E、DA在0.135～100ng/ml浓度范围内与响应值(色谱峰高对内标峰高之比)线性关系良好(r值分别为0.9999、0.9998、0.9998),其方法回收率分别为63.2%～93.4%、65.6%～103.7%7、0.4%～111.3%,CV值为1.23%～19.52%。结论此法简单、准确、灵敏、特异性高,便于临床和实验室推广应用。

知母-黄柏药对盐炙前后HPLC指纹图谱及多指标成分含量变化

目的建立知母-黄柏药对盐炙前后HPLC指纹图谱,对11种指标性成分进行定量分析,探索药对盐炙前后的质量差异。方法采用HPLC法建立知母-黄柏药对盐炙前后指纹图谱,通过化学计量学方法对知母-黄柏药对盐炙前后指纹图谱进行分析;并采用HPLC法测定知母-黄柏盐炙前后药对中新芒果苷、绿原酸、隐绿原酸、黄柏碱、芒果苷、木兰花碱、药根碱、小檗红碱、小檗碱、柠檬苦素、黄柏酮的含量。结果10批知母-黄柏药对盐炙前后HPLC指纹图谱组内相似度均>0.988,聚类分析、偏最小二乘法-判别分析可明显将生知母-生黄柏、盐知母-盐黄柏分为2类,小檗碱、新芒果苷、芒果苷、小檗红碱、黄柏碱等成分可能是引起两者质量差异的主要标志成分。定量分析显示,知母-黄柏药对盐炙后芒果苷、黄柏碱、药根碱、小檗红碱、小檗碱的含量增加,而新芒果苷、绿原酸、隐绿原酸的含量降低,柠檬苦素的含量亦有降低趋势,木兰花碱、黄柏酮的含量无明显变化。结论所建立的指纹图谱及多指标含量测定方法稳定可靠,从定性与定量评价了知母-黄柏药对盐炙前后的质量差异;为知母-黄柏药对药味炮制研究提供一定的依据。

模拟兔血浆中富马酸福莫特罗的HPLC-ECD测定

采用液液萃取方法,建立了模拟兔血浆中富马酸富莫特罗的高效液相色谱-电化学检测（HPLC-ECD）测定新方法.实验结果表明,富马酸富莫特罗质量分数的线性范围为47～2500 μg/mL（r=0.999 9）,提取回收率为77.8％～80.1％,方法回收率为96.2％～106.0％ （RSD≤1.9％）.该法有望用于动物体内药物代谢分析.