HPLC-ELSD测定脂肪烷基三甲基氯化铵平均相对分子质量

建立了高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)结合面积归一化法测定脂肪烷基三甲基氯化铵平均相对分子质量的方法。采用氰基色谱柱,以V(乙腈)∶V(0.1%三氟乙酸溶液)=60∶40为流动相,对脂肪烷基三甲基氯化铵进行色谱分离,并用蒸发光散射检测器进行测定,依据碳链分布,采用面积归一化法对样品的平均相对分子质量进行计算,同时采用QB/T 1914—2013规定的气相色谱法对样品进行测定。对两种测定方法的测定结果采用F检验结合t检验进行统计分析,结果表明HPLC-ELSD测定方法与气相色谱法测定结果无显著性差异。

HPLC-ELSD法测定黄芪桂枝五物汤中黄芪甲苷的含量

目的建立黄芪桂枝五物汤中的黄芪甲苷的含量测定方法。方法采用HPLC-ELSD法测定黄芪桂枝五物汤中黄芪甲苷的含量,色谱条件为：Welchrom-C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,以乙腈-水（32∶68）为流动相,流速为1mL·min-1,柱温25℃;ELSD参数：漂移管温度75℃,喷雾管温度40℃,气体流量1.5L·min-1,输出压力0.5 MPa。结果黄芪甲苷在0.03~1.22mg·mL-1范围内呈良好的线性关系（r=0.999 5）,平均回收率为99.8%,方法精密度的RSD为2.1%（n=6）。结论该方法简单、准确、重复性好,可用于黄芪桂枝五物汤的质量控制。

基于HPLC-ELSD法的中药复方制剂中黄芪甲苷含量测定

[目的]利用高效液相-蒸发光散射检测法测定中药复方制剂中黄芪甲苷的含量。[方法]采用Phenomenex公司C18(250.0 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(37∶63),流速为0.85 ml/min,检测器为ELSD 2000。[结果]黄芪甲苷在0.396～3.564μg范围内呈线性,回收率为97.94%(RSD=0.68%)。样品含量为0.288 3～0.299 5 mg/片,RSD为0.36%～1.20%。[结论]该法具有良好的精密度和重现性,结果准确可靠,可作为中药复方制剂的质量控制方法。

HPLC-ELSD法测定不同炮制方法雪莲果中低聚果糖的含量

本文建立了雪莲果低聚果糖的HPLC-ELSD测定方法,分析不同炮制方法雪莲果中低聚果糖的含量。用不同方法处理新鲜雪莲果,然后超声提取雪莲果粉末中低聚果糖,采用HPLC-ELSD测定,色谱柱：华谱XAmide（4.6×250 mm,5μm）,流动相：乙腈∶水=75∶25,流速：1 m L/min,柱温：30℃,检测器：ELSD,漂移管温度70℃。方法学考察结果表明,蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖在0.406～2.030 mg/m L、0.420～2.100 mg/m L、0.456～2.280 mg/m L范围内呈良好线性关系,平均回收率分别为101.4%、99.7%、98.6%,RSD分别为1.53%、1.29%、2.81%。该方法稳定、可靠、精密度高、重复性好,不同处理方法所得雪莲果粉末中3种低聚果糖的含量差别较大,其中用清水漂洗0.5 h,然后冷冻干燥所得雪莲果粉末中的低聚果糖含量最高。

HPLC—ELSD法同时测定马铃薯中α-茄碱和α-卡茄碱含量

建立高效液相色谱—蒸发光散射检测（HPLC—ELSD）同时测定马铃薯中α-茄碱和α-卡茄碱的方法,并对不同样品含量进行测定。结果表明：当ELSD漂移管温度98℃,雾化管温度30℃,载气压力6.90kPa时,以0.1%三氟乙酸水—乙腈为流动相,经梯度洗脱程度,α-茄碱和α-卡茄碱可获得良好分离,色谱峰柱效高。样品用质量100倍的1%甲酸甲醇为提取溶剂在70℃下提取90min,提取液直接注入色谱仪进行检测。α-茄碱标准品在0.196-9.800μg线性关系良好（R2=0.999 5）,平均回收率为99.4%,并以该标准曲线同时计算样品中的α-茄碱和α-卡茄碱的含量。马铃薯植物的不同部位均含有生物碱,α-茄碱的含量为0.13-1.59mg/g,α-卡茄碱的含量为0.39-8.28 mg/g;两种生物碱总量为0.52-9.37mg/g,同一部位中α-卡茄碱的含量为α-茄碱的1.2-7.6倍。

HPLC-ELSD/DAD测定阿卡波糖工作参照品的含量

目的研究HPLC测定阿卡波糖工作参照品的含量。方法对国外参考品传递测定和新建的两种检测器测定方法进行对比;通过C18色谱柱反相分离,用DAD检测器、ELSD检测器分别测定阿卡波糖及其相关物质的含量。结果国外参考品传递测定结果为98.9%,DAD检测为99.0%,RSD=0.4%;ELSD检测为98.6%,RSD=1.2%。结论所建方法符合参照品定值要求,结果准确可靠。

HPLC-ELSD指纹谱法研究甘遂炮制前后成分差异

目的:比较甘遂炮制前后成分的变化。方法:以3-O-(2,3-二甲基丁酰基)-13-O-十二烷酰基巨大戟二萜醇为对照,建立生、制甘遂的HPLC-ELSD特征指纹谱,比较两者的特征指纹谱及图谱。结果:在选定的色谱条件下,生、制甘遂的特征色谱峰分别为31、19个,甘遂炮制后,大部分成分含量下降,保留时间为89min左右的成分含量升高,不同成分间的含量比例发生了变化,成分的种类没有变化。结论:甘遂炮制解毒的原理得以初步解释。

UV-分光光度计法和HPLC-ELSD法同时测定健脾止泻胶囊中多糖含量

目的 建立健脾止泻胶囊多糖的含量测定方法。方法以无水葡萄糖为对照品,采用苯酚-硫酸法测定总糖含量;采用1.5 mol/L硫酸溶液水解多糖,通过碱中和、乙醇沉淀的方法得到单糖,用HPLC-ELSD方法测定其含量;色谱条件:色谱柱为Xbridge Amide column(4.6 mm×150 mm,3.5μm);流动相为乙腈∶0.1%三乙胺(75∶25);柱温:30℃;流速为1.0 m L/min;ELSD漂移管温度为95℃;气体流速为3.0 L/min。结果苯酚-硫酸法中,葡萄糖在6.8~68.0μg/m L范围内与吸光度呈良好的线性关系(r2=0.9995),平均回收率为96.1%。HPLC-ELSD法中,无水葡萄糖在0.0507~0.8110 mg/m L范围内呈现良好的线性关系(r2=0.9998),平均回收率为97.1%,RSD为1.4%。两种测定方法测定多糖的平均含量分别为22.3%、15.2%。结论该方法稳定可行,重复性好,可以作为健脾止泻胶囊多糖的含量测定方法。

HPLC-ELSD测定穿心莲超分子提取物中三种穿心莲内酯的含量

目的建立穿心莲超分子提取物中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯和14-去氧穿心莲内酯的含量测定方法。方法HPLC—ELSD；色谱柱：Agilent ZORBAX Extent—C18（4．6mm×250mm，5μm）；检测器：蒸发光散射检测器（ELSD）；流动相：乙腈-水，线性梯度洗脱，流速0．8mL·min^-1，柱温：40℃。结果穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯和14-去氧穿心莲内酯线性范围分别为0．920～9．200μg（r=0．9996），0．397～3．952μg（r=0．9993）和0．395～3．936μg（r=0．9993）；三者的回收率分别为98．9％、97．8％和98．4％，RSD分别为1．1％、2．2％和2．1％（n=6）。结论本法简便，快捷，结果真实可靠，可用于穿心莲超分子提取物穿心莲内酯等有效成分的含量测定。

HPLC-ELSD测定桑叶中1-脱氧野尻霉素的含量

目的:采用高效液相色谱法测定了桑叶中1-脱氧野尻霉素的含量。方法:应用EISD,SUPELCOSIL LC-NH_2(25cm×4.6mm,5μm)色谱柱,乙腈-水(80∶20)为流动相,流速0.8mL·min^(-1)。结果:1-脱氧野尻霉素在2.28-13.68μg范围内呈线性,平均回收率为96.1%(n=6),RSD为2.2%。结论:本法简便,快捷,结果可靠,可用于桑叶中生物碱的质量控制。

HPLC-ELSD同时测定铁破锣中3种三萜皂苷含量及体外抗氧化性研究

目的 建立同时测定铁破锣中3种三萜皂苷BeesiosideⅠ、Ⅱ、Ⅲ含量的方法,并研究铁破锣中三萜皂苷的体外抗氧化性。方法 运用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)对铁破锣中三萜皂苷进行含量测定,并对所用含量测定方法进行方法学考察;同时,对铁破锣中三萜皂苷清除自由基的能力和总的抗氧化能力进行体外试验。结果 HPLC-ELSD方法可同时测定BeesiosideⅠ、Ⅱ、Ⅲ的含量,且该方法线性关系良好、精密度、重复性、稳定性均好,回收率高;铁破锣中三萜皂苷能够有效清除ABTS +、DPPH·和羟基自由基,并且具有很好的抗氧化能力。结论 HPLC-ELSD方法简便、快速、准确、重现性好,可作为铁破锣中三萜皂苷(BeesiosideⅠ、Ⅱ、Ⅲ)的含量测定及质量控制标准方法,体外试验表明铁破锣中三萜皂苷具有良好的自由基清除和抗氧化能力。

基于HPLC-DAD-ELSD串联法同时测定麝香保心丸中8种成分的含量

目的:建立麝香保心丸中苯甲酸苄酯、胆酸、蟾毒他灵、蟾毒灵、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、华蟾酥毒基和酯蟾毒配基8种成分的含量测定方法,为麝香保心丸的质量评价提供实验参考。方法:采用HPLC-DADELSD串联法同时测定麝香保心丸中苯甲酸苄酯、胆酸、蟾毒他灵、蟾毒灵、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、华蟾酥毒基和酯蟾毒配基8种化学成分的含量,色谱柱为Waters XBridgeTMC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液,梯度洗脱;检测波长为280 nm,柱温为30℃;蒸发光散射检测器(ELSD)漂移管温度为40℃;载气流量1.5 L/min。结果:苯甲酸苄酯、胆酸、蟾毒他灵、蟾毒灵、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基分离度良好,分别在2.769~55.370μg/mL(r=0.9998)、2.285~45.700μg/mL(r=0.9999)、2.251~45.021μg/mL(r=0.9997)、2.445~48.902μg/mL(r=0.9998)、1.912~38.230μg/mL(r=0.9999)、2.350~46.990μg/mL(r=0.9998)、2.275~45.500μg/mL(r=0.9999)、2.335~46.700μg/mL(r=0.9998)的范围内线性关系良好;平均回收率分别为99.98%(RSD=0.86%)、100.09%(RSD=0.65%)、99.98%(RSD=0.66%)、101.95%(RSD=0.92%)、99.50%(RSD=0.40%)、100.09%(RSD=0.69%)、99.89%(RSD=0.66%)、99.99%(RSD=0.62%)。结论:该法操作方便、准确、重复性好,可客观、全面地对麝香保心丸的内在质量进行有效评价。

基于HPLC-DAD-ELSD指纹谱的系统指纹定量法评价清热解毒注射液质量

目的建立自制清热解毒注射液HPLC-DAD-ELSD指纹图谱,以系统指纹定量法评价其质量。方法采用DAD-ELSD串联技术,以1%HAc溶液和1%HAc乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,柱温(30±0.5)℃,进样量5μL;漂移管温度110℃,雾化室温度40℃,载气压力50 psi。结果以黄芩苷为参照物峰,确定DAD图谱中有60个共有峰;以绿原酸为参照物峰,确定ELSD图谱中有37个共有峰。采用"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0"软件,按平均值法计算,生成对照指纹图谱(RFP),以此RFP为标准,采用系统指纹定量法表征其质量,并与市售制剂和混合药材模拟样进行比较,初步确定了市售制剂含量低的原因为药材投料量不足或制剂被稀释。结论采用DAD-ELSD联用可以获得中药复方制剂真实质量重要信息,结合系统指纹定量法从整体定性分析和整体定量分析出发实现了对中药质量有效评价。

基于HPLC-UV-ELSD指纹图谱法同时测定绞股蓝中4种成分及不同产地药材质量评价

目的:建立绞股蓝药材高效液相色谱-紫外-蒸发光散射器(HPLC-UV-ELSD)串联指纹图谱方法,并同时测定槲皮素、芦丁、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷XLIX的含量,对其质量优劣进行全面综合评价。方法:采用HPLC-UV-ELSD串联法和相似度评价软件,对15批不同产地绞股蓝药材进行指纹图谱研究,并对绞股蓝中槲皮素、芦丁、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷XLIX 4种指标性成分中的含量进行测定与分析。结果:建立了绞股蓝药材HPLCUV-ELSD串联指纹图谱法,标定了11个共有峰,指认了其中4个色谱峰;不同产地绞股蓝药材中槲皮素、芦丁、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷XLIX 4种成分的含量高低不一,质量存在差异。结论:建立了绞股蓝药材HPLC-UVELSD指纹图谱法,并结合相似度评价和4种成分的定量分析结果,较全面地反映该药材的质量,该法可用于不同产地绞股蓝药材质量的有效评价。

HPLC—ELSD法测定玉米须中β-谷甾醇

玉米须最早药用记载见于<滇南本草>,为禾本科植物玉蜀黍Zea mays L.的干燥花柱和柱头.为<中国药典>1977年版收载品种[1].能够利尿消肿,降血压.临床用于肾炎水肿,小便不利,湿热黄疸,高血压症.β-谷甾醇为玉米须的主要有效成分之一[2～4],实验证明β-谷甾醇具有明显的降胆固醇、止咳、抗癌、抗炎等药理作用.

HPLC-ELSD法测定川牛膝中两种三萜皂苷的含量

目的:建立川牛膝中2种主要三萜皂苷——川牛膝皂苷A、B的含量测定方法。方法:采用HPLC-ELSD法,Shim-pack VP-ODS C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.1%甲酸水(37:63);体积流量为1.0 mL·min^(-1);ELSD漂移管温度为105℃;载气流速2.8 L·min^(-1)。结果:3-O-{β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖-(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基}齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(川牛膝皂苷A)和3-O-[α-L-吡喃鼠李糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基]齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(川牛膝皂苷B)的含量分别为0.47%~1.37%和0.46%~1.32%;线性范围分别为1.0~20.0μg与0.8~16.0μg;平均回收率分别为99.72%和97.72%。结论:HPLC-ELSD含量测定方法准确、简便、专属性好,适用于川牛膝的质量评价。

HPLC-ELSD法测定栀子金花丸中知母皂苷BⅡ的含量

目的 建立高效液相色谱-蒸发光闪射检测器法测定栀子金花丸中知母皂苷BⅡ的含量。方法 采用Diamonsil-C8色谱柱，柱温为30 ℃；以乙腈-水（体积比21∶79）为流动相，流速为1.0 mL？min？1；蒸发光闪射检测器检测，漂移管温度为80 ℃，载气压力30 psi。结果 知母皂苷BⅡ质量浓度在8.2～82.0 ？g？mL -1范围内，其对数值与峰面积对数值呈良好的线性关系（r=0.999 7），平均回收率为99.1%，RSD为2.63%（n=6）。结论 该方法简便、快捷、重复性好，可用于栀子金花丸中知母皂苷BⅡ的含量测定。

水产品中5种磷脂含量的HPLC-ELSD检测分析

本研究建立了水产品中5种磷脂的高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)方法并测定了几种水产品及水产品性腺组织中5种磷脂的含量。采用氯仿-甲醇(2∶1,V/V)进行磷脂的提取,氨基固相萃取柱净化富集,HPLC-ELSD对牡蛎(Ostrea gigas tnunb)、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)、刺参(Apostichopus japonicas)、磷虾(Euphausia)以及海胆(Echinoidea)黄、大闸蟹(Eriocheir sinensis)蟹黄、鲟鱼(Acipenser sinensis)子酱、刺参性腺中的磷脂组成和含量进行分析,该方法加标回收率为77%~102%,相对标准偏差为0.75%~9.78%,具有较好的回收率和良好的精密度。结果显示,上述样品中含量最高的磷脂均为磷脂酰胆碱,其中磷虾粉中磷脂酰胆碱含量最高为29.71~35.30 mg/g。磷脂酰乙醇胺除鲟鱼子酱样品外均有检出,其中刺参和牡蛎冻干粉样品中磷脂酰乙醇胺含量较高,含量范围分别为2.90~3.69 mg/g和2.49~4.40 mg/g,磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰胆碱和鞘磷脂3种磷脂仅有少数品种有检出,且含量较低。综上,HPLC-ELSD法可以实现对鱼、贝、虾等水产品中5种磷脂组分的快速准确分析及定量,为水产品营养品质评价提供参考。

不同配比补肾活血方HPLC-UV-ELSD指纹图谱研究

目的:建立不同配比补肾活血方HPLC-UV-ELSD指纹图谱,并对各峰来源进行归属。方法:采用HPLC法,色谱柱为Inertsil OSD-SP C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.05%甲酸水溶液(梯度洗脱),紫外检测器:检测波长为250 nm,蒸发光散射检测器:漂移管温度为105℃,空气体积流量为3.2 L/min;进样量20μL;流速为1 mL/min。运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2008版)》对12批不同配比补肾活血方指纹图谱进行相似度计算,并对各共有峰进行药材来源归属及成分指认。结果:建立了不同配比补肾活血方指纹图谱;在其HPLC-UV指纹图谱中标定了23个共有峰,其中1～15、17、21号峰来源于葛根,18～20、22、23号峰来源于丹参,16号峰为丹参和葛根共有。在其HPLC-ELSD指纹图谱中标定了7个共有峰,其中1’～4’号峰来源于葛根,5’号峰来源于丹参,6’、7’号峰来源于人参。通过与对照品对照指认出复方中4个成分,分别是6/3’号峰为葛根素,22/5’号峰为丹酚酸B,10号峰为大豆苷,6’号峰为人参皂苷Rb1。结论:建立了不同配比补肾活血方HPLC-UV-ELSD指纹图谱,为筛选补肾活血方最佳配比、确定其防治DR药效物质奠定基础。

知母HPLC-UVD-ELSD指纹图谱的建立与多特征成分含量测定的质控方法研究

目的建立知母指纹图谱结合多特征成分含量测定的HPLC-UVD-ELSD分析方法,并应用于多批次市售药材的质量控制。方法采用UltimateTMXB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,4.5μm),检测波长258 nm,ELSD漂移管温度65℃,载气流速1.0 L/min,建立知母指纹图谱与主含黄酮及皂苷类成分含量测定的HPLC-UVD-ELSD分析方法,运用相似度软件结合化学计量学分析对多批次药材进行质量评价并同时完成多特征成分的含量测定。结果建立了高效、快捷的知母HPLC-UVD-ELSD指纹图谱与多特征成分含量测定的方法;18批市售药材的指纹图谱相似度在0.786~0.999,并指认了10个色谱峰。化学计量学结果表明造成18批药材差异较大的成分为新芒果苷、知母皂苷BⅡ和知母皂苷BⅢ;进而建立了同时测定新芒果苷、芒果苷、知母皂苷N、知母皂苷BⅡ和知母皂苷BⅢ5个成分含量的方法,结果表明知母中主含知母皂苷BⅡ。结论建立的指纹图谱结合多特征成分含量测定的HPLC-UVD-ELSD分析方法,更全面而准确地描述了知母药材化学成分整体轮廓与各类特征成分含量贡献,为提升市售知母药材的质量控制方法奠定了基础。