基于HPLC-UV-QDa检测不同剂型中噻唑膦和吡虫啉

建立了高效液相色谱-紫外检测器-质谱(HPLC-UV-QDa)测定5种不同剂型产品中噻唑膦和吡虫啉含量的分析方法。样品以乙腈+水(0.05%甲酸)为流动相,采用C18色谱柱进行梯度洗脱,结合紫外和质谱串联检测器进行定性和定量分析。研究结果显示,在质量浓度0.05~50 mg/L,噻唑膦、吡虫啉的线性关系良好,R2分别为0.9992~0.9999和0.9991~0.9996。在0.5、50、500 mg/kg等3个添加水平下,噻唑膦、吡虫啉的平均回收率分别为90.2%~103.9%和94.7%~104.1%,相对标准偏差(RSD)分别为1.04%~6.69%和1.27%~5.88%。噻唑膦和吡虫啉在5种基质中无明显基质效应,检出限分别为0.005和0.01 mg/L,定量限分别为0.02和0.04 mg/kg。方法灵敏度高、稳定性好、准确度高,适用于不同剂型产品中噻唑膦和吡虫啉的分析。

HPLC-UV法同时测定赤血康脉胶囊中五种成分

本研究旨在建立HPLC-UV法同时测定赤血康脉胶囊中芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、β-蜕皮甾酮、阿魏酸和党参炔苷的含量。采用DiamonsilR C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸(梯度洗脱);流速为1.0 mL/min;柱温为35℃;检测波长为268 nm,进行分析。结果显示,5种化学成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9995);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%,平均加样回收率99.35%~101.59%,RSD 0.95%~2.69%。该含量测定方法简单可靠、重复性好,操作便捷,适用于同时测定赤血康脉胶囊中五种成分的含量。

HPLC-UV法测定舒肝和胃丸中α-香附酮和香附烯酮的含量

目的:建立舒肝和胃丸中α-香附酮和香附烯酮的高效液相色谱(HPLC-UV)含量测定法,为该制剂中醋香附含量的质量控制提供依据。方法:对舒肝和胃丸中α-香附酮和香附烯酮同时进行含量测定。采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇和水(65∶35),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长254 nm,柱温30℃,进样量5μL。结果:采用该方法得到的舒肝和胃丸色谱图中,α-香附酮和香附烯酮色谱峰与相邻色谱峰分离效果较好,满足含量测定的要求;指标性成分α-香附酮、香附烯酮分别在0.08036~0.80360μg、0.2112~2.1120μg范围内线性关系良好,相关系数均为1.000;平均加标回收率分别为102.0%(RSD:1.6%,n=6),102.4%(RSD:2.0%,n=6);稳定性(24 h)、重复性、精密度良好。结论:本研究建立的α-香附酮和香附烯酮HPLC-UV含量测定方法简单、快捷、准确,可为舒肝和胃丸中醋香附含量的控制提供依据。

HPLC-UV法测定甘花漱口液中总黄酮及绿原酸含量

目的:建立甘花漱口液中总黄酮及绿原酸的含量测定方法。方法:以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法,在510 nm处,测定甘花漱口液中总黄酮含量;以绿原酸为对照品,采用HPLC法,以乙腈-0.4%磷酸(11∶89)为流动相,检测波长327 nm,流速1.0 mL/min,柱温35℃,测定甘花漱口液中绿原酸含量。结果:芦丁在0.0101~0.0707 mg/mL范围内,呈现良好的线性关系(R 2=0.9993),平均回收率98.01%(RSD=1.80%);绿原酸在8~40μg/mL内呈良好的线性关系(R 2=0.9999),平均回收率为98.80%(RSD=0.14%)。结论:上述方法稳定、准确,重复性好,可作为甘花漱口液的质量控制方法。

HPLC-UV法检测EV71-CA16二价手足口病灭活疫苗原液相关抗原纯度的方法建立与评价

为建立一种准确可靠的高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)方法,检测EV71-CA16二价手足口病(HFMD)灭活疫苗原液中的相关抗原,肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)的纯度。本文采用Waters体积排阻色谱柱(SEC,UltrahydrogelTM 2507.8×300 mm,6μm),流动相为0.01 mol/L的PBS中再加入0.1 mol/L氯化钠溶液,等度洗脱,流速0.3 mL/min,检测波长280 nm,进样量50μL,柱温21℃,进行EV71与CA16病毒原液的纯度检测,并对该方法的检测限、拖尾因子、专属性、重复性及检测范围进行验证。结果显示,2种抗原的灵敏度溶液的信噪比(S/N)分别为37.053和47.710,均远大于3,各试样的拖尾因子均小于3;CA16原液和EV71原液经HPLC分离纯化后的目标抗原峰馏分经SDS-PAGE和Western-Blot特异性鉴定,结果显示,色谱峰样品组成分别为CA16和EV71的2种病毒衣壳的结构蛋白,表明本检测方法专属性高。不同浓度的EV71与CA16病毒抗原经多次检测后,各浓度条件下的峰面积百分比与保留时间的RSD均小于1%,重复性良好。不同抗原浓度批样品检测结果显示,CA16原液抗原浓度在89 U/mL~26398 U/mL之间,EV71原液抗原浓度在170 U/mL~9074 U/mL之间时,2种抗原溶液经多次检测统计显示峰面积百分比与保留时间的RSD均小于1%,本方法在该抗原浓度范围内准确可靠,适用于EV71-CA16二价手足口病灭活疫苗原液中病毒抗原纯度的检测。

枸杞不同部位UV-Vis和HPLC指纹图谱研究

目的采用多维指纹图谱结合化学计量学方法,比较枸杞果实和根皮中黄酮、香豆素类和苯丙酸类等成分的整体差异,并综合多糖和总黄酮的含量比较,为枸杞不同药用部位的价值评估和质量标准的建立提供理论依据。方法建立HPLC指纹图谱进行相似度评价和共有峰确定。化学计量学方法对药材不同部位进行分类研究,建立分类模型,筛选出重要差异性标志物并进行定量分析;紫外-可见光谱(UV-Vis),反映药材化学组成的整体特征;采用2020年版《中华人民共和国药典》苯酚-硫酸法测定枸杞多糖的含量,亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮含量。结果HPLC指纹图谱共标定9个共有峰,指认了绿原酸、东莨菪内酯、槲皮素、芦丁4个色谱峰。相似度评价表明果实和根皮整体组成差异较大,地骨皮不同产地之间质量缺乏一致性;正交偏最小二乘法-判别分析找出芦丁是对整体差异性贡献比较大的化学成分;UV-Vis呈现明显的指纹特性;枸杞子中枸杞多糖和总黄酮的含量分别为2.74%~3.79%和1.52%~2.24%,均高于地骨皮中1.92%~2.67%和0.46%~0.58%,且含量分布具有产地差异性。结论综合多指标揭示枸杞果实和根皮中化学成分差异,为枸杞药材的质量评价和资源价值的充分利用提供重要的数据参考。

黄连解毒汤各成分的HPLC-UV/MS定性与定量测定方法研究

目的建立可整体定性、多指标定量的黄连解毒汤的分析方法。方法使用HPLC-UV/MS方法,梯度洗脱黄连解毒汤样品及组方各药单煎样品,归属色谱峰来源,并对主要色谱峰进行定性、定量分析。采用Zorbax ExtendC18(150 mm×4.6 mm ID,5μm)色谱柱;流动相A为乙腈,B为水(含0.5%冰醋酸),流速1 mL.m in-1。紫外检测波长254 nm,正、负离子扫描获得质谱数据。结果归属了21个色谱峰的来源,发现两个可区分黄连、黄柏的特征峰,通过HPLC-UV/MS对其中11个主要色谱峰进行了指认,并以HPLC-UV对8种有对照品的成分进行含量评价。结论黄连解毒汤与组方各药单煎样品有较好相关性,建立的方法所测得液相色谱图特征性和专属性强,该方法结合含量测定为黄连解毒汤内在质量控制提供了更全面的信息。

HPLC-UV-ELSD法同时测定青蒿中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量

用HPLC-UV-ELSD法同时测定青蒿药材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。采用Nucleodur C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μmID）；以乙腈-0．1％乙酸水（50：50）为流动相；紫外检测波长209nm，蒸发光散射检测器漂移管温度50℃。结果显示，青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸能够达到很好分离。它们的线性范围分别为0．52．2．6μg，r=0.9994（n=5）；0．022～4．4μg，r=0．9999（n=5）；0．203～8．12μg，r=0．9998（n=5）。平均回收率分别为99．45％（RSD=2．3％，n=6）；102．37％（RSD=1．7％，n=6）；101．10％（RSD=0．79％，n=6）。本法简单、准确、快速，可同时测定青蒿药材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。

HPLC-UV法测定微生物降解体系中3-苯氧基苯甲酸含量

采用高效液相色谱-紫外(high-performance liquid chromatography with ultraviolet,HPLC-UV)法测定微生物降解体系中3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)的含量。以Gemini 100A C18柱(150mm×4.60mm,5.0μm)为色谱柱,乙腈-水(70:30,V/V)为流动相,流速0.7mL/min,用紫外检测器在210nm处检测3-PBA。结果显示:3-PBA对照品的保留时间为4.268min,线性范围为0.5～50.0mg/L,3-PBA平均回收率为98.919%,RSD为2.78%;运用该方法测得4种不同来源的混合菌株发酵液中3-PBA的残留量分别为24.467、86.266、2.633、1.921mg/L。本法简单、快速、准确、分离度好。

HPLC-UV-ELSD联用测定黄花蒿叶片中青蒿素及相关倍半萜的含量

目的HPLC-UV-ELSD联用建立黄花蒿叶片中青蒿素及其生合成相关倍半萜的含量测定方法。方法采用Venusil XBP-C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水梯度洗脱,检测波长:203 nm,流速:1.0 mL.min-1,ELSD载气压力:0.35 MPa,喷嘴温度:35℃,漂移管温度:60℃,检测器:UV-ELSD联用,测定黄花蒿叶片中青蒿素、青蒿素B、3α-羟基-1-去氧青蒿素含量。同一色谱柱条件下流动相改为乙腈-水-甲酸(体积比为60.00∶40.00∶0.08),检测波长:215 nm,流速:1.0 mL.min-1,检测器:UV检测器,测定黄花蒿叶片中青蒿酸含量。结果4种倍半萜在各自的线性范围内线性关系良好(r≥0.9990),RSD<3%,平均加样回收率分别为98.5%(RSD=2.3%)、96.5%(RSD=1.8%)、97.5%(RSD=3.6%)、95.4%(RSD=2.5%)。结论该方法可作为黄花蒿中青蒿素及其生合成相关倍半萜的含量测定方法。

HPLC-UV测定球花石斛中滨蒿内酯和泽兰内酯含量

目的建立高效液相色谱-紫外检测器测定球花石斛中滨蒿内酯和泽兰内酯含量的方法。方法采用ODS C18色谱柱（4．6mm×250mm．5μm，MetaChem），以甲醇-四氢呋喃-1％醋酸水溶液（15：5：80）为流动相，流速为1mL·min^-1，检测波长为342nm，柱温为40℃。结果球花石斛中滨蒿内酯的线性范围为0．00464-0．46400μg（r=0．9999），平均回收率（H=6）为97．66％（RSD=0．27％）；泽兰内酯的线性范围为0．00424-1．06000μg（r=0．9999）．平均回收率（n=6）为97．92％（RSD=0．89％）。结论本方法简便、准确、重复性好，可为评价不同产地的球花石斛质量提供一定依据。

HPLC-MS和HPLC-UV同时测定人血浆中阿斯匹林和水杨酸的浓度

目的 :同时测定人血浆中阿斯匹林和水杨酸的浓度。方法 :用 HPLC-MS法测定人血浆中阿斯匹林 ,同时用 HPLC-UV法测定人血浆中水杨酸的浓度。结果 :阿斯匹林 ,水杨酸的线性范围分别为 2 0～ 1 0 0 0 ng/ml和 0 .1～ 2 0μg/ ml,最低检测浓度分别为 5.0 ng/ ml和 0 .1μg/ ml。方法的绝对回收率均大于 90 % ,高、中、低浓度的日内和日间变异系数均小于 1 0 %。结论 :该方法符合生物样品分析要求 ,可用于人体内药代动力学研究。

HPLC-UV测定水中微量溴酸根的方法

针对水中微量溴酸盐的测定问题,建立了一种用苯酚为衍生试剂、用HPLC-UV检测的柱外衍生测定方法.本方法的检出限为0.82μg·L^-1,在溴酸根浓度为5-50μg·L^-1范围内具有良好的线性关系（R2=0.9986）.测定系列溴酸根浓度的相对偏差（RSD）均小于5%,样品加标平均回收率为99.8%-110.9%.

刺五加叶的HPLC-UV和ESI-MS指纹图谱研究

对12批不同来源的刺五加叶提取物进行指纹图谱研究,并利用ESI-MS指纹图谱鉴别刺五加叶与山楂叶。分别采用高效液相色谱(HPLC-UV)和电喷雾电离质谱(ESI-MS)测定12批不同来源的刺五加叶提取物,利用ESI-MS技术测定刺五加叶与山楂叶提取物,得到了分离度、精密度和重现性均较好的刺五加叶HPLC-UV及ESI-MS指纹图谱;同时,利用刺五加叶与山楂叶ESI-MS指纹图谱的差异,成功鉴别了二者,可为刺五加叶药材的质量控制提供参考。

HPLC-UV法同时测定六味地黄制剂中丹皮酚与熊果酸

目的建立同时检测六味地黄丸制剂中熊果酸和丹皮酚的HPLC-UV方法。方法取市售不同厂家的六味地黄制剂,采取甲醇超声提取,以HPLC-UV法测定其产品中熊果酸和丹皮酚。实验采用kromasil C18(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以50%甲醇/乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,检测波长215 nm。结果熊果酸和丹皮酚分别在2.40～37.5μg/mL和0.22～3.38μg/mL的质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程分别为Y=244.31X-390.32(R=0.990 3)和Y=2 217X-784.42(R=0.998 4)。结论该方法可以使样品中的熊果酸、丹皮酚与其他色谱峰有效分离,方法简便、准确,重复性好,结果可为评价不同厂家生产的六味地黄丸制剂一致性提供依据。

HPLC-UV双波长法同时测定玄参中5种主要成分的含量

目的建立HPLC-UV双波长法同时测定玄参中5种主要成分：哈帕俄苷、哈帕苷、桃叶珊瑚苷、梓醇和肉桂酸的含量。方法采用依利特Hypersil BDS色谱柱（4．6mm×200mm，5μm），流动相A为乙腈，B为0．05％H3PO1水溶液，梯度洗脱（O～7min，98．4％B；7～11min，98．4％～96％B；11～18min，96％B；18～29min，96％～78．4％B；29-60min，78．4％B），流速为0．8mL·min^-1，检测波长为210、278nm，柱温为35℃。结果梓醇、桃叶珊瑚苷、哈帕苷、肉桂酸、哈帕俄苷的线性范围分别为0．0223～0．9000、0．0170～0．6600、0．0440～1．760、0．0106～0．4240、0．0186～0．7440Mg，相关系数分别为0．9999、0．9994、0．9999、0．9999、0．9999。平均加样回收率（n=6）分别为：（99．1％±1．53％）、（98．2％±1．06％）、（99．1％±0．55％）、（98．7％±1．20％）、（99．0％±0．48％）。结论本方法简单、重复性好、结果准确可靠，既可为玄参饮片和玄参药材中环烯醚萜苷动态变化提供监测方法，也可为其质量控制提供参考方法。

HPLC-UV法测定黄芪干燥根中黄芪甲苷的含量

[目的]建立黄芪干根中HPLC-UV法测定黄芪甲苷的方法,同时比较蒙古黄芪、野生黄芪和膜荚黄芪3种不同来源样本的黄芪甲苷含量.[方法]采用HPLC-UV法,色谱柱为Kromasil C18柱（250 mm×4.6mm）,流动相为乙腈∶水（32∶68）,流速1.0 ml/min,检测波长203 nm.[结果]黄芪甲苷在0.05 ～0.50 mg/ml范围内线性关系良好（r=0.999）,平均回收率为98.216％（RSD=2.85％）;不同来源黄芪甲苷含量比较结果为野生＞膜荚≈蒙古.[结论]建立的HPLC-UV法测定黄芪甲苷含量相对稳定,方法简便,为今后黄芪干根中黄芪甲苷含量的测定提供了方法参考.

HPLC-UV-MS法同时测定痹祺胶囊中7个有效成分

目的建立高效液相色谱-紫外-串联质谱法同时测定痹祺胶囊(马钱子、川芎、甘草、丹参、白术、三七、党参等)中7个有效成分的方法。方法采用HPLC法,Zorbax-C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;进样5μL;DAD波长切换模式;柱温40℃。Finnigan电喷雾离子阱多级质谱仪,正/负离子检测模式;ESI喷雾电压±4.5 kV;鞘气(N2)压力为276 kPa;辅助气(N2)体积流量为3.3 L/min;毛细管温度350℃;毛细管电压±19 V;扫描范围m/z 100～850 amu。结果士的宁、马钱子碱、甘草苷、丹酚酸B、甘草酸、隐丹参酮和丹参酮IIA在相应的质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999 6;平均加样回收率(n=6)在90.25%～99.11%之间,RSD均小于2.91%。结论本方法简便快捷、精密度高、重复性好,适用于痹祺胶囊的质量控制。

HPLC-UV法测定益母草和酒炙益母草中丁香酸和芦丁的含量

运用HPLC-UV法,采用依利特Hypersil ODS（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,检测波长254 nm,流速1.0 mL/min,柱温25℃,测定不同产地益母草（Leonurus heterophyllus）和酒炙益母草中芦丁和丁香酸含量.结果显示,芦丁和丁香酸进样量在0~10μg范围内与峰面积呈良好线性关系,河南栾川采收的益母草中芦丁和丁香酸含量最高;益母草经酒炙后,芦丁含量降低,丁香酸含量升高,证明了益母草酒炙后活血祛瘀、调经止痛作用增强的有效成分是丁香酸,而不是芦丁.

HPLC法和UV-VIS法测定灵芝孢子粉中灵芝三萜及灵芝多糖的含量

目的建立测定灵芝孢子粉中的两个有效成分灵芝三萜及灵芝多糖含量的方法,为进一步开发和应用灵芝孢子粉提供依据。方法以灵芝酸C2为标准品,通过HPLC法对灵芝孢子粉中灵芝酸C2的含量进行测定。色谱条件为:检测波长254nm;流动相为甲醇:水=55∶45,各加1%冰醋酸;柱温40℃;流速0.7mL/min。以葡萄糖为标准品,采用硫酸-蒽酮比色法,通过UV-VIS法对灵芝孢子粉中灵芝多糖的含量进行测定。结果HPLC法测得三批灵芝孢子粉中灵芝酸C2含量约为0.129‰,0.108‰和0.094‰,灵芝酸C2在7.35～147μg/mL范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999,回收率为95.9%,95.6%和96.4%。UV-VIS法测得三批灵芝孢子粉中灵芝多糖的含量约为1.152%,1.129%和1.007%,葡萄糖在14.9～119.1μg/mL的范围内,浓度和吸光度呈线性关系,r=0.9991,回收率为95.0%,95.1%和95.2%。结论方法简便、准确,可用于灵芝孢子粉中灵芝三萜和灵芝多糖的含量测定。