注射用氨苄西林钠舒巴坦钠中有关物质HPLC检测方法的改进

目的建立有效的注射用氨苄西林钠舒巴坦钠有关物质检测方法。方法采用HPLC梯度洗脱法,色谱柱为Phenomenex C18(2)型Luna色谱柱,以0.02mol/L磷酸二氢钠溶液pH(4.0±0.1)为流动相A、乙腈为流动相B;流速为1.0ml/min;检测波长为230nm和254nm,采用双波长检测分区域计算。对舒巴坦主峰前的杂质峰,采用230nm的峰面积值按舒巴坦计算其含量;对舒巴坦主峰后的杂质峰,采用254nm的峰面积值按氨苄西林计算其含量。结果采用梯度洗脱方式能有效检测出氨苄西林二聚物、舒巴坦青霉胺等杂质;不同来源的杂质具有明显分区,与氨苄西林有关的杂质主要集中在舒巴坦主峰后,而与舒巴坦有关的杂质则集中在舒巴坦主峰前;采用双波长分区域检测杂质含量,可以将复方制剂中的有关物质含量同其原料氨苄西林钠和舒巴坦钠中的有关物质含量相联系。各杂质在不同波长下响应值不同。结论改进后的方法可较好的分离氨苄西林钠和舒巴坦钠来源的各主要杂质,真实反映药品质量,有助于发现目前产品中的质量问题,进而促使产品质量的提高。

斑蝥HPLC数字化指纹图谱研究

目的:建立斑蝥 HPLC 数字化指纹图谱控制方法。方法:采用 Centurysil C_(18)BDS 色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),以1%醋酸水溶液(A)-1%醋酸乙腈溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0～5 min,0% B;5～11 min,0%→3%B;11～22 min,3%→6% B;22～30 min,6%→12% B;30～45 min,12%→25% B;45～60 min,25%→40% B),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长265 nm,柱温为(30.0±0.15)℃,进样量10μL。用"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0"软件计算10批斑蝥 HPLC 指纹图谱的色谱指纹图谱指数 F 和双定性双定量相似度等46个参数进行数字化评价。以双参照物体系标定指纹峰的表观相对分子质量、峰位、洗脱动量数(δ)、折合相对积分(φ)。结果:以脲苷峰为参照物峰,确定了15个共有指纹峰,建立了斑螫及其不同部位的 HPLC 数字化指纹图谱。获得了判别斑蝥质量的重要数字化判据。以双定性双定量相似度法评价斑蝥批间质量的稳定性。结论:所建立的 HPLC 数字化指纹图谱方法具有较好的稳定性和重现性,适用于斑蝥质量控制。数字化指纹图谱是中药信息质量控制的核心技术,双定性双定量相似度法是宏观定性定量评价中药质量的理想技术。

RP-HPLC法测定乌梅不同炮制品及不同部位中枸橼酸含量

目的:采用RP-HPLC法同时测定乌梅不同炮制品及不同部位中枸橼酸(Citric Acid,CA)含量。方法:采用Phenomenex C18 (4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.2%磷酸(B)作为流动相,梯度洗脱,流速:0.6 mL·min-1,柱温:25℃,检测波长:215 nm。结果:枸橼酸的线性方程为Y=1 995.40X+53.49 (r=0.999 7)。质量浓度在0.639~6.39 mg·mL-1范围内线性关系良好。平均加样回收率为99.13%(n=9)。乌梅不同炮制品及不同部位中,乌梅肉所含枸橼酸的含量最高,乌梅炭中枸橼酸的含量最低。结论:该方法准确、快速、可靠,能有效测定乌梅不同炮制品及不同部位中枸橼酸的含量。

培美曲塞二钠中有关物质HPLC检测方法的改进

目的建立测定培美曲塞二钠中有关物质的高效液相色谱法。方法采用HPLC梯度洗脱法,采用Shim-Pack VP-ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.02 mol.L-1磷酸铵溶液(用磷酸调pH值至4.0)为流动相A,乙腈为流动相B;流速为1.0 mL.min-1;检测波长为240 nm;进样体积:20μL。结果样品中有关物质应小于1.0%,单个杂质应小于0.5%。结论改进后的方法可较好的分离培美曲塞二钠的各主要杂质,真实反映药品质量,有助于发现产品中的质量问题,进而促使产品质量的提高。

HPLC法测定利奈唑胺的有关物质

目的:建立高效液相色谱法测定利奈唑胺原料药的有关物质。方法:采用InertSustain十八烷基硅烷键合硅胶(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以0.1%三氟乙酸溶液-0.1%三氟乙酸乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃,检测波长251 nm。结果:利奈唑胺与10个已知杂质A~K色谱峰之间的分离度良好;各成分检测限0.25~1.27 ng,定量限0.79~2.54 ng,在0.25~1.0μg·mL-1范围内浓度与峰面积线性关系良好(r>0.9990),各杂质平均回收率87.8%~102.9%(n=9)。3批利奈唑胺样品测定结果显示,已知杂质及其他最大单个杂质均小于0.1%,杂质总含量小于0.15%。结论:经方法学验证,本方法灵敏、快速、专属性强、准确度高,可用于利奈唑胺原料药有关物质的测定。

梯度洗脱HPLC-ELSD法测定蛋黄卵磷脂有关物质

目的:提升蛋黄卵磷脂有关物质的检测方法。方法:采用高效液相法,色谱柱:Grace Alltima Silica(4.6mm*250mm*5μm)色谱柱;流动相:以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(85∶15∶0.45∶0.05)为流动相A,以正己烷-异丙醇-流动相A(20:48:32)为流动相B,梯度洗脱;检测器为蒸发光检测器(气体流速:2.5ml/min,增益:16,漂移管温度:50℃);流速:1.0 mL·min-1,柱温:40℃。结果:蛋黄卵磷脂各杂质之间均达到良好分离;溶液稳定性良好;各杂质加样回收率良好。结论:该法快速、简便、准确、重复性好,适用于蛋黄卵磷脂的质量控制。

照山白浸膏片TLC鉴别和HPLC特征图谱研究

目的建立照山白浸膏片的TLC鉴别方法和HPLC特征图谱,为科学评价和有效控制其质量提供可靠方法。方法采用2种展开系统建立照山白浸膏片中金丝桃苷、槲皮素和山柰素的薄层色谱鉴别方法。采用HPLC法建立液相特征图谱:以金丝桃苷为参照峰,采用C18色谱柱(250×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相,进行梯度洗脱(0-13 min,8%A;13-28 min,8%A→21%A;28-46 min,21%A;46-60 min,21%A→40%A;60-77 min,40%A;77-80 min,8%A);流速:1 ml·min-1;检测波长为366 nm;进样量:10μl;柱温:30℃。结果鉴别分离良好。特征图谱有12个共有峰,在HPLC条件下均分离良好。结论所建方法可实现全面和整体的评价,为有效提高照山白浸膏片质量控制水平提供依据。

HPLC分析庆大霉素发酵液C组份条件的探讨

系统考察了HPLC分析庆大霉素发酵液C组份中各种因素的影响．如不同型号的ODS柱，不同的流动相配比，用甲酸代替冰醋酸以及不同的发酵液前处理方法等。在上述研究基础上建立的在Waters－Nova－PakC184μm3．9×150mm柱上，以庚烷磺酸钠浓度（5．0g／L）甲醇：水：甲酸＝74：21：5为流动相系统，在20min内即可完成样品分析，且C1峰与相邻杂质峰获得了良好分离。本法首次采用甲酸取代药典规定的流动相中的冰醋酸，使庆大霉素发酵液组份C1峰与相邻杂质峰的分离效果显著，为今后庆大霉素发酵液的质量控制及其质量标准的改进，提供了新的有效途径。

RP-HPLC梯度洗脱法测定盐酸金霉素有关物质方法研究

目的 建立准确可靠的RP-HPLC梯度洗脱法用于测定盐酸金霉素原料药有关物质。方法 采用Ultimate XB-C8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以高氯酸-水-二甲基亚砜(16∶934∶525)(pH<2.0)、乙腈、甲醇分别作为流动相A、B、C,进行梯度洗脱;柱温为45℃;检测波长为280 nm;流速为0.8 mL/min。结果 与《中国药典》2020年版相比,检出杂质多2个,盐酸金霉素与11个已知杂质分离度良好。13批样品均检出6个已知杂质,除盐酸四环素、4-差向金霉素外,还检出杂质B、E、J、L,其中杂质B、E为主要其他杂质。结论 该方法适用性好、专属性强,可真实反映盐酸金霉素有关物质状况,为其质量控制提供方法支撑。

HPLC法测定甲磺酸左氧氟沙星氯化钠注射液中有关物质

目的:建立高效液相色谱法测定甲磺酸左氧氟沙星氯化钠注射液中有关物质。方法:采用十八烷基硅烷键合硅胶(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以醋酸铵高氯酸钠溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温40℃,检测波长为294 nm和238 nm。结果:在该色谱条件下,左氧氟沙星与各杂质均能有效分离,左氧氟沙星、杂质A的定量限分别为0.120 0μg·mL^(-1)、0.371 2μg·mL^(-1),左氧氟沙星和杂质A分别在0.600 1~4.801μg·mL^(-1)和0.742 5~5.940μg·mL^(-1)范围内与其峰面积呈良好线性关系(r=1.000),左氧氟沙星、杂质A回收率(n=9)分别在97.86%~101.22%和99.65%~101.82%之间,重复性、精密度、稳定性等均符合规定。5批甲磺酸左氧氟沙星氯化钠注射液样品测定结果显示,杂质A均未检出,其他最大杂质含量在0.02%~0.08%,杂质总量在0.02%~0.15%。结论:经方法学验证,本方法灵敏、快速、专属性强、准确度高,可用于甲磺酸左氧氟沙星氯化钠注射液有关物质的测定。

高效液相色谱法同时测定维胺酯维E乳膏中维胺酯和维生素E的含量

目的:建立一种采用梯度洗脱的高效液相色谱法,同时分析维胺酯维E乳膏中维胺酯和维生素E的含量。方法:采用色谱柱:C18柱,Agilent Eclipse XDB(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇(A)与水(B)为流动相,梯度洗脱,1.0 mL/min流速,25℃柱温,20μL进样体积,285 nm检测波长。结果:维胺酯与光降解杂质、维生素E与相邻杂质均能有效分离,维胺酯与维生素E的浓度在相应的范围内与峰面积呈良好线性关系(r均>0.9999);维胺酯与维生素E的平均加样回收率分别为99.65%、RSD=0.62%与99.63%、RSD=0.60%,精密度、稳定性良好。维胺酯维E乳膏(3个企业共5批次样品)中维胺酯与维生素E的含量均在标示量92.5%~103.6%之间。结论:该方法专属性好,简便快捷准确,可用于维胺酯维E乳膏的质量控制。

血塞通泡腾片的制备及质量控制

目的制备血塞通泡腾片并建立相应的质量控制方法。方法以乳糖、甜菊素、酒石酸、碳酸氢钠、聚乙二醇-6000（PEG6000）等为辅料研制该泡腾片，高效液相色谱梯度洗脱法测定该片中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1的含量。结果崩解时限试验表明该泡腾片在5min内崩解。人参皂苷Rbl在3．4～27．21μg、人参皂苷Rg1在3．65-29．2μg、三七皂苷R1在0．85～6．8μg与峰面积具有良好的线性关系，r值分别为0．9999、0．9998、0．9999。其平均回收率分别为100．02％、99．85％、99．63％，RSD分别为1.48％、1．12％、1．51％（n=6）。结论血塞通泡腾片制备方法可行，质量控制方法可靠。

红景天软胶囊质量标准研究

本实验采用TLC法鉴别方中红景天苷及其苷元酪醇，采用甲醇：0．1％磷酸水为流动相的HPLC梯度洗脱法测定红景天软胶囊中红景天苷的含量，建立了红景天软胶囊的质量标准。该方法准确可靠、专属性强，能简便有效的控制该制剂的质量，可以在同-TIE色谱条件下同时检出红景天苷、酪醇的特征斑点。红景天苷在1．6～5．8峭范围内与峰面积有良好的线性关系，r=0．9996（n=5），平均加样回收率为99．27％，RSD为0．7％。

高效液相色谱法测定葛根指纹图谱及葛根素、大豆苷

[目的]观察高效液相色谱法测定葛根指纹图谱及葛根素、大豆苷效果。[方法]采用高效液相色谱法,HypersilC18色谱柱(250mm×4.6mm,5.0μm),流动相:甲醇:水进行梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长:247nm,柱温:25℃,建立葛根指纹图谱,测定葛根素、大豆苷含量。[结果]运用梯度洗脱法得到色谱图各个化学成分色谱峰分离度均较好,达到指纹图谱要求。[结论]HPLC指纹图谱鉴别葛根及有效成分,重复性好、特征性强、检测方法简便,为葛根指纹图谱鉴别及质量控制提供方法学依据。

抵挡汤早期干预对2型糖尿病大鼠肿瘤坏死因子-α与血管细胞黏附分子-1表达的影响

目的观察抵挡汤早期干预对2型糖尿病大鼠血管病变中大血管的保护作用,探讨其机制。方法采用高脂饲料喂养及链脲佐菌素诱导方法制成大鼠糖尿病模型,抵挡汤早期干预组、抵挡汤中期干预组和抵挡汤晚期干预组分别于实验成模前4周、成模和成模后4周给予抵挡汤灌胃,辛伐他汀组和罗格列酮组大鼠于成模时分别给予辛伐他汀和罗格列酮灌胃,至实验24周时结束。酶联免疫吸附法检测大鼠血清血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平,实时荧光定量PCR法检测主动脉肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清VCAM-1水平明显升高(P<0.05),主动脉TNF-αmRNA表达明显升高(P<0.05);与模型对照组比较,抵挡汤早期干预组和辛伐他汀组大鼠血清VCAM-1水平明显降低(P<0.05),并且抵挡汤早期干预组、抵挡汤中期干预组和罗格列酮组大鼠主动脉TNF-αmRNA的表达明显降低(P<0.05)。结论抵挡汤早期干预能抑制大鼠主动脉TNF-αmRNA表达升高,抑制大血管病变的炎性损伤,延缓糖尿病大血管病变的发展,发挥其保护大血管的作用。

高效液相色谱法测定质控盲样中的合成色素

目的探讨盲槲饮料）中合成色素测定的有效途径。方法采用高效液相色谱法（HPLC）直接测定质控盲样中的未知合成色素。结果色素分离效果理想，线性关系良好，相关系数均大于0．9999，回收率在95—101％之间，相对标准差小于3％。结论HPLC法简单、快速，灵敏度高，分离度好，适用于盲样中合成色素的同时测定。

骨愈灵制剂质量标准统一的研究

目的统一骨愈灵胶囊、片剂的质量标准。方法增加乳香、当归、川芎显微特征及没药薄层鉴别,建立梯度洗脱HPLC法测定三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量。结果显微特征、薄层鉴别、含量测定方法专属性好。结论骨愈灵制剂质量标准的统一,能有效地控制该产品的质量。

高效液相色谱法同时测定盐酸瑞芬太尼原料药六种有关物质

建立高效液相色谱梯度洗脱法同时测定盐酸瑞芬太尼原料药中的六种有关物质。YMC Hydrosphere C18(4.6 mm×0.1 mm 3μm)色谱柱,流动相A为5 g/L碳酸铵水溶液,溶剂为四氢呋喃-水(10︰90),流动相B为乙腈,梯度洗脱,检测波长220 nm,流速1.5 m L/min,柱温35℃,进样量10μL。原料药及六种有关物质峰之间分离度均≥1.5,精密度、稳定性的RSD均<4.2%。结论:该方法准确,简单,能够快速测定出各有关物质的含量,适于盐酸瑞芬太尼原料药的质量控制。

通脉降脂片质量标准研究

目的通脉降脂片的质量标准研究。方法采用薄层色谱法鉴别川芎、三七,用HPLC法测定人参皂苷Rgl的含量。色谱柱:Angilent ZORBAX SB-C_(18)(4．6×150mm,5μm),流动相为:乙腈-水二元梯度洗脱,检测波长:203nm;流速1．0mLml·min^(-1);进样量5μL。结果能准确对川芎、三七进行定性鉴别;人参皂苷Rgl在0．434～3．906μg范围内呈良好的线性关系(r=1．0000);平均回收率为97．62%(n=9,RSD= 2．19%)。结论本法快速、简便、准确、重现性好,可作为控制通脉降脂片质量的方法。

HPLC法测定替米沙坦中的有关物质

目的:建立高效液相色谱法测定替米沙坦原料药中的有关物质。方法:采用Waters Symmetry Shield RP8(150 mm×4.6 mm, 3.5μm)色谱柱,以0.1%磷酸溶液(用三乙胺调pH至3.0)-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL·min^(-1),柱温25℃,检测波长230 nm。结果:替米沙坦与9种已知杂质色谱峰之间的分离度均>1.5,定量限均<40 ng·mL^(-1),检测限均<10 ng·mL^(-1)。替米沙坦及各杂质质量浓度在30~600 ng·mL^(-1)范围内线性关系良好(r>0.999 5)。杂质Ⅰ~杂质Ⅸ的平均回收率分别为93.8%、99.8%、97.5%、99.2%、99.8%、98.3%、98.4%、99.2%、99.7%,RSD均<2.0%。改变流速、柱温、波长、流动相比例及pH后,对有关物质的检测结果无影响。3批替米沙坦中最大单杂含量均为0.02%,杂质总量<0.10%。结论:经方法学验证,本方法专属性强,灵敏、精密,准确度高,可用于替米沙坦原料药有关物质的测定。