Validated gradient stability indicating HPLC method for determining Diltiazem Hydrochloride and related substances in bulk drug and novel tablet formulation

A stability-indicating liquid chromatographic method has been developed and validated for the determination of Diltiazem Hydrochloride(DTZ) together with its six related substances(Diltiazem sulphoxide,Imp-A,Imp-B,Imp-D,Imp-E,and Imp-F) in a laboratory mixture as well as in a novel tablet formulation developed in-house.Efficient chromatographic separation was achieved on a Hypersil BDS C18(150 mm*4.6 mm,5.0 μm) with mobile phase containing 0.2% Triethylamine(TEA) in gradient combination with acetonitrile(ACN) at a flow rate of 1.0 mL/min and the eluent was monitored at 240 nm.In the developed method,the resolution of DTZ from any pair of impurities was found to be greater than 2.0.The test solution and related substances were found to be stable in the diluent for 24 h.The developed method resolved the drug from its known impurities,stated above,and also from additional impurities generated when the formulation was subjected to forced degradation;the mass balance was found close to 99.9%.Regression analyses indicate correlation coefficient value greater than 0.997 for DTZ and its six known impurities.The LOD for DTZ and the known impurities was at a level below 0.02%.The method has shown good,consistent recoveries for DTZ(99.8-101.2%) and also for its six known impurities(97.2-101.3%).The method was found to be accurate,precise,linear,specific,sensitive,rugged,robust,and stability-indicating.

HPLC法测定注射用盐酸石蒜碱硫酯的有关物质

目的:采用高效液相色谱法测定注射用盐酸石蒜碱硫酯的有关物质。方法:色谱柱:Kromasil(C18,4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:以磷酸盐缓冲液为流动相A,以乙腈为流动相B,梯度洗脱;流速1.2 mL·min^(-1);柱温40℃;检测波长290 nm;进样量10μL。结果:盐酸石蒜碱硫酯和各杂质之间均实现有效分离,在LOQ浓度至200%限度浓度范围内具有良好的线性关系,且各杂质在低、中、高3个浓度的平均回收率为96.8%~103.6%。结论:此法具有准确度高、重现性好且简单快速等优点,可用于注射用盐酸石蒜碱硫酯的质量控制。

HPLC-MS/MS法测定盐酸曲唑酮原料药中相关杂质的研究

目的:建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定盐酸曲唑酮中相关杂质的含量。方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.8μm),以0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.2 mL·min^(-1),柱温30℃,采用电喷雾离子化源(ESI),多反应检测(MRM)模式,正离子模式扫描。结果:测定了盐酸曲唑酮原料药中的5个相关杂质,分别为三唑并吡啶酮、曲唑酮-N-氧化物、脱氯曲唑酮、4-乙基曲唑酮、曲唑酮异丁醚类似物,杂质在测定的质量浓度范围内线性关系良好,r均≥0.999 5;平均回收率为91.9%~99.4%,RSD≤3.9%;测定的3批原料药中均检出了曲唑酮N-氧化物和脱氯曲唑酮,其中2批还检测到极微量的4-乙基曲唑酮。结论:建立的方法可测定盐酸曲唑酮原料药中的5种相关杂质,能更有效的评估和控制其质量。

HPLC法测定盐酸莫西沙星有关物质

目的建立高效液相色谱法测定盐酸莫西沙星原料有关物质。方法采用Inertsil Phenyl柱苯基键合硅胶(4.0 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以四丁基硫酸氢铵缓冲液-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速1.3 mL/min,柱温50℃,检测波长293 nm。结果盐酸莫西沙星与15个已知杂质A~O均能良好分离。6个厂家盐酸莫西沙星样品测定结果显示,已知杂质及其他最大单个杂质含量均小于0.05%,杂质总含量小于0.06%。结论本方法灵敏、专属性强,准确度高,可用于盐酸莫西沙星原料药有关物质测定。

RP-HPLC梯度洗脱法测定盐酸金霉素有关物质方法研究

目的 建立准确可靠的RP-HPLC梯度洗脱法用于测定盐酸金霉素原料药有关物质。方法 采用Ultimate XB-C8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以高氯酸-水-二甲基亚砜(16∶934∶525)(pH<2.0)、乙腈、甲醇分别作为流动相A、B、C,进行梯度洗脱;柱温为45℃;检测波长为280 nm;流速为0.8 mL/min。结果 与《中国药典》2020年版相比,检出杂质多2个,盐酸金霉素与11个已知杂质分离度良好。13批样品均检出6个已知杂质,除盐酸四环素、4-差向金霉素外,还检出杂质B、E、J、L,其中杂质B、E为主要其他杂质。结论 该方法适用性好、专属性强,可真实反映盐酸金霉素有关物质状况,为其质量控制提供方法支撑。

HPLC检测盐酸黄连素原料药中的有关物质

采用HPLC对盐酸黄连素(berberine hydrochloride)原料药中的有关物质进行检测.采用Spherigel C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);以0.02 mol·L^(-1)的乙酸铵-乙腈溶液(体积比为70∶30)为流动相;检测波长为265 nm;流速:0.6 mL·min^(-1);柱温:30℃;进样量:10μL;检测器:紫外检测器(UVD).结果表明:在建立的色谱条件下,盐酸黄连素与其有关物质分离效果良好(R>1.5),盐酸黄连素及其有关物质均呈现良好的线性关系(R^(2)>0.99).本方法操作简单、灵敏度高、专属性强,可用于盐酸黄连素中有关物质的检测.

氨糖美辛肠溶片中盐酸氨基葡萄糖有关物质研究

目的 建立测定氨糖美辛肠溶片中盐酸氨基葡萄糖有关物质的高效液相色谱法,并分析其影响因素。方法 色谱柱为纳谱ChromCore AQ C18柱(250 mm×4.6 mm,3μm),流动相为水-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为280 nm,柱温为30℃,进样量为20μL。采用加速稳定性试验和辅料相容性试验,结合生产工艺分析有关物质的影响因素。结果 已知杂质果糖嗪、2,5-脱氧果糖嗪、吡嗪、5-羟甲基糠醛、糠醛、2-甲基吡嗪、吡咯-2-甲醛、5-甲基糠醛质量浓度分别在0.20~3.30μg/mL、0.20~3.00μg/mL、0.25~7.54μg/mL、0.18~7.04μg/mL、0.25~10.10μg/mL、0.25~10.18μg/mL、0.25~10.17μg/mL、0.26~10.50μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(R2≥0.999);检测限为0.3~5.0μg/mL,定量限为0.7~20.1μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%;平均加样回收率为98.24%~101.20%,RSD为0.33%~2.19%(n=9)。影响制剂有关物质产生的因素为工艺、温度和时间,影响有关物质含量增长速率的因素除工艺外,还有辅料(主要为羟甲基淀粉钠)和水分。结论 该方法简便、准确、专属性好,可用于氨糖美辛肠溶制剂中盐酸氨基葡萄糖有关物质的检测。建议优化工艺中干燥温度及时间,考察添加辅料的合理性,并控制片剂中的水分,进一步提高制剂质量的均一性和稳定性。

反相高效液相色谱测定氨溴特罗口服溶液中盐酸克仑特罗的研究

建立氨溴特罗口服溶液中盐酸克仑特罗成分含量测定的方法并开展方法学验证。采用ZORBAX SB-C18色谱柱,流动相为磷酸二氢钾溶液-甲醇,检测波长244 nm,柱温40℃,流速1.0 mL·min^(-1),进样量10μL。结果显示,盐酸克仑特罗在0.0511~0.4099μg·mL^(-1)范围内线性关系良好;平均回收率(n=9)为100.0079%,RSD为1.57%。测得盐酸克仑特罗含量为标示量的98.96%,符合药典标准。

HPLC测定注射用兰索拉唑中兰索拉唑的含量和有关物质

目的采用高效液相色谱法建立注射用兰索拉唑有关物质检查及其含量测定方法。方法Diamonsil—-C18柱（4-6mm×200mm，5μm），以甲醇-水-三乙胺-磷酸（640：360：5：1．5，pH为7．3）为流动相，检测波长为284nm结果制剂中辅料对主药测定无干扰．兰索拉唑与有关物质完全分离．在10．0-400．0mg·L^-1内峰面积与球度呈良好的线性关系。精密度（RSD=0．13％）良好。平均回收率为99．6％．结论本方法简便，迅速，准确，专属性强.

盐酸伊立替康及注射液的HPLC测定

采用 RP- HPL C法测定盐酸伊立替康及注射液的含量和有关物质。用十八烷基键合硅胶为固定相 ,0 .0 5 m ol/L磷酸盐缓冲液 (p H4.0 ) -甲醇 -乙腈 (4 5∶ 5 5∶ 5 )为流动相 ,检测波长 2 5 4nm,最低检出量为 0 .2 ng,线性范围 10～10 0 mg/ L (r=0 .9998) ,精密度 (RSD)为 0 .0 12 % ,平均回收率为 99.0 % ,RSD=0 .0 13%

RP-HPLC法测定巴洛沙星胶囊的含量及有关物质

目的:采用反相液相色谱法测定巴洛沙星胶囊含量及有关物质。方法:采用 PICO TAG ^(TM)C_(18)色谱柱(5μm,3.9mm×150mm),以乙腈-水-十二烷基硫酸钠(400∶600∶2.5,用磷酸调节pH为3.0)为流动相;流速1.0mL·min^(-1);检测波长为290nm,柱温:室温;进样量:20μL。结果:在该色谱条件下,巴洛沙星浓度在15-35μg·mL^(-1)范围内具有良好的线性关系,r=0.9999,精密度 RSD 为0.81%(n=6);巴洛沙星胶囊含量测定高、中、低3种浓度的回收率分别为98.3%,100.4%,99.9%;RSD分别为0.56%,0.62%,0.54%。结论:本法简便、快速、准确,专属性好。

硫酸阿米卡星注射液及有关物质的HPLC法分析

2,4,6 -三硝基苯磺酸做衍生试剂 ,采用反相高效液相色谱法分析、紫外检测器检测 ,分离、定量了硫酸阿米卡星注射液及有关杂质 A、B、C、D。本法的衍生化产物稳定 ,线性范围为 0 .2～ 2 0 mg/ ml(r=0 .9991) ,平均回收率为 (10 0 .4± 2 .0 ) % ,日内、日间、不同人之间的操作误差分别为 1.2 9%、0 .90 %、0 .6 0 % ,最低检出量为 0 .0 5 6 ng。用本法测定了国内 2 1个厂家 2 4批硫酸阿米卡星注射液的含量 ,并与微生物法结果比较 ,用自身配对 t检验法考察两法结果差异。结果表明 ,绝大多数厂家的产品采用两法测定结果一致 (n=2 2 ) ,但也有个别厂家的产品 ,采用微生物法测定结果明显比本法高 ,其高效液相色谱图显示该类产品中杂质A的含量较高。不同厂家的产品中的杂质种类、含量也有较大差异 ,国产硫酸阿米卡星注射液中最常见的杂质是杂质

离子对-HPLC法测定盐酸倍他司汀注射液中药物与有关物质含量

目的用离子对-HPLC法测定盐酸倍他司汀注射液中药物及有关物质含量。方法色谱柱：Diamonsil C18柱（200mm×4．6mm，5Ⅱm）；流动相：甲醇-10mmol-L11醋酸钠溶液（含5mmol-L11庚烷磺酸钠，体积分数为0．2％的三乙胺，用冰醋酸调pH至3．3）（25：75），检测波长：261nm，流速：1．0mL·min^-1，柱温：室温。结果盐酸倍他司汀质量浓度在1～250mg·L^-1内线性关系良好（r=0．9999），平均回收率为99．8％，RSD=1．0％。盐酸倍他司汀的理论塔板数大于2000，盐酸倍他司汀与其主要杂质分离度不低于1．5。结论适用于盐酸倍他司汀注射液中药物与有关物质的含量测定。

HPLC法测定盐酸莫西沙星含量及其有关物质

采用HPLC法对盐酸莫西沙星含量及其有关物质进行检测,色谱柱为Sepax BR-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-四丁基硫酸氢铵磷酸缓冲液(28∶72),检测波长为293 nm,柱温为45℃,流速为1.3 mL/min。在所建立的色谱条件下,盐酸莫西沙星与各杂质分离良好,盐酸莫西沙星浓度在38.55～57.82μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 8),最低检测限为0.006 25μg/mL,定量限为0.025μg/mL。结果表明,所建立的方法专属性好,操作简便,可用于盐酸莫西沙星含量及其有关物质的含量测定。

离子对-HPLC法测定盐酸二甲双胍含量及有关物质

目的:建立离子对-HPLC法测定盐酸二甲双胍含量及有关物质的方法。方法:采用Inertsil C_(18)色谱柱(5μm,4.6mm×150mm);以甲醇-5mmol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(含有10mmol·L^(-1)十二烷基磺酸钠,用磷酸调节pH至3.5±0.05),(64:36)为流动相;流速1.0mL·min^(-1);紫外检测波长:233nm用于含量测定,218nm用于有关物质检测;柱温:室温。结果:离子对-HPLC法测定盐酸二甲双胍的线性范围为5～500μg·mL^(-1);相关系数r=0.999 9;日内精密度RSD=0.82％,日间精密度RSD=1.9％(n=5);双氰胺的线性范围为0.08～0.80μg·mL^(-1);相关系数r=0.9999;日内精密度RSD=0.68％,日间精密度RSD=2.3％(n=5);盐酸二甲双胍含量测定高、中、低3种浓度的回收率分别为99.24％,99.53％,99.18％;RSD分别为0.15％,0.18％,0.22％。结论:本法简便、快速、准确、专属性好。

HPLC法测定左旋泮托拉唑钠肠溶微丸的含量和有关物质

目的测定左旋泮托拉唑钠肠溶微丸胶囊的含量和有关物质。方法建立HPLC法,色谱柱：DiamonsilTMC18（5μm,4.6 mm×250 mm）,流动相：乙腈-磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠1.12 g,磷酸二氢钠0.18 g,加水溶解并稀释至1 000 mL,调pH值至7.6）（体积比为30∶70）,检测波长：288 nm。结果左旋泮托拉唑在20.0～100.0 mg·L^-1内线性关系良好,r=0.999 6,平均回收率为99.3%（n=9）,RSD%=0.54。结论方法可用于制剂的含量和有关物质测定。

HPLC测定盐酸格拉司琼葡萄糖注射液中盐酸格拉司琼含量及有关物质

采用氰基硅烷键合硅胶柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.05 mol/L醋酸钠缓冲液[含0.25%(mL/mL)三乙胺,用冰醋酸调节pH值至6.0]-甲醇(50∶50)为流动相;在0.8 mL/min的流速和302 nm的检测波长下用高效液相色谱方法测定盐酸格拉司琼葡萄糖注射液中盐酸格拉司琼含量及有关物质。结果表明,盐酸格拉司琼在19.8～46.2μg/mL浓度范围内呈现出良好线性关系,线性相关系数为0.999 6,平均回收率是98.18%,RSD是1.32%,且5-羟甲基糠醛在4～14μg/mL浓度范围内呈现出良好线性关系,线性相关系数为0.999 8,检出限为1ng。同时,各杂质均可与盐酸格拉司琼主峰良好分离。该方法简便、快速、准确、专属性强及灵敏度高。

盐酸安非他酮有关物质的HPLC测定

用 HPL C测定盐酸安非他酮中有关物质和降解产物 ,与主药有较好的分离效果。色谱柱为 Hypersil C1 8,流动相 0 .0 1m ol/ L磷酸二氢钾 (三乙胺调 p H7.0 ) -甲醇 (2 5∶ 75 ) ,检测波长 2 4 4 nm。

RP-HPLC法测定甲砜霉素及其胶囊剂的含量和有关物质

目的:采用反相高效液相色谱法测定甲砜霉素及其胶囊剂的含量及有关物质。方法:采用Merck C18色谱柱(250 mm×4.0 mm,5μm);以乙腈-水(1:4)为流动相;流速1.2 mL·min-1;检测波长:225 nm;柱温:30℃;进样量:10μL。结果:含量测定的线性范围为20.29—203.9 μg·mL～1,r=0.9999(n=7);有关物质测定的线性范围为2.072—20.72μg·mL-1;r=0.9998(n=7),甲砜霉素胶囊的加样回收率为101.3%,99.2%,98.9%;RSD依次为1.9%,0.4%,0.7%(n=3)。结论:本法简便快速、准确,专属性好。

HPLC测定盐酸氨溴索口腔崩解片的含量及有关物质

目的建立测定盐酸氨溴索口腔崩解片中主药含量及其有关物质检查的方法.方法采用HPLC法,用Hypersil C18柱,甲醇-20 mmol·L-1磷酸二氢钠-三乙胺(50∶50∶0.1, 磷酸调pH 3.60±0.1)为流动相,检测波长244 nm,流速1.0 ml·min-1.结果盐酸氨溴索在2.5～60.0 μg·ml-1范围内,峰面积与浓度的线性关系良好(r=0.9999),高、中、低浓度的平均回收率为100.9%～103.2%, RSD为0.67%～1.09%.结论所用方法准确、简便、快速,适用于盐酸氨溴索口腔崩解片的质量控制.