HPLC双波长法同时测定19种药用腹菌麦角甾酮和麦角甾醇的含量

目的建立HPLC双波长法同时测定不同腹菌中麦角甾酮和麦角甾醇含量的方法。方法采用的色谱柱为岛津Inertsil ODS-SP C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-水(96:4)梯度洗脱;流速为1ml·min^(-1);检测波长为349nm、282nm;柱温25℃;进样量为10μl。结果麦角甾酮和麦角甾醇分别在0.0200～0.2000μg(r=1)、0.1020～1.0240μg(r=1)范围内呈线性良好关系,平均回收率分别为99.94%、100.19%,RSD分别为0.64%、0.19%。结论该方法操作简便、重现性好、灵敏度高、结果准确,为同时检测腹菌中麦角甾酮和麦角甾醇的含量提供了可靠的方法。

HPLC双波长法测定小柄马勃子实体、液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮含量

建立HPLC双波长法同时测定小柄马勃(Lycoperdon pedicellatus)子实体与液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的含量,并比较2种不同药用部位中麦角甾醇和麦角甾酮的含量差异。采用岛津InertsilODS-SP C18柱(4.6 mm×250 mm, 5μm)色谱柱,流动相为甲醇,流速为0.8 mL·min^(-1),检测波长分别为282 nm、 349 nm,柱温为30℃。结果表明,子实体中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.02μg^0.20μg (r=1)、 6.54 ng^65.40 ng(r=1)范围内线性关系良好。液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.305μg^3.05μg (r=1)、6.54 ng^65.40 ng (r=1)范围内线性关系良好。因此所建立的双波长测定法准确可靠、重复性良好,可用于小柄马勃及其液体发酵菌丝中麦角甾醇、麦角甾酮化学成分的含量测定,为控制其质量提供参考依据。

HPLC-双波长切换法同时测定双参通冠胶囊中脱氢紫堇碱、丹酚酸B的含量

目的:建立同时测定双参通冠胶囊中脱氢紫堇碱和丹酚酸B含量的方法。方法:采用HPLC-双波长切换法。色谱柱为Waters symmetry C18,以乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为286 nm(丹酚酸B)、336 nm(脱氢紫堇碱),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL。结果:在建立的检测条件下,脱氢紫堇碱和丹酚酸B均能达到基线分离,二者进样量线性范围分别为0.157～1.259μg、0.391～3.131μg(r均为0.999 9);精密度、重复性和稳定性试验(24 h内)的RSD均小于2.00%(n=6～10);平均加样回收率分别为101.61%、102.85%(RSD分别为3.59%、2.85%,n=6)。结论:建立的HPLC-双波长切换法可同时测定双参通冠胶囊中脱氢紫堇碱和丹酚酸B含量,且方法操作简便、快速,可用于双参通冠胶囊的质量控制。

双波长HPLC-PDA法同时测定鼠尾草中迷迭香酸和芦丁的含量

建立HPLC-PDA法同时测定鼠尾草中迷迭香酸和芦丁的含量。采用Hypersil ODS2(250 mm×4.6 mm,5μm)为固定相,乙腈-0.1%磷酸水溶液(20∶80)为流动相,检测波长256 nm和330 nm,柱温25℃,流速1.0 mL/min,进样量20μL。测得迷迭香酸和芦丁分别在2.02~101.04 g/mL(r=0.9998)、0.91~45.34μg/mL(r=0.9999)浓度范围内有良好的线性关系。迷迭香酸和芦丁的平均回收率分别为100.20%,100.49%;RSD分别为1.44%和1.62%。该方法同时测定鼠尾草中迷迭香酸和芦丁的含量,为鼠尾草药材资源建立统一的质量评价体系提供科学依据。

HPLC-PDA双波长法同时测定复方富马酸酮替芬滴鼻液中富马酸酮替芬等5个成分的含量

目的:建立测定复方富马酸酮替芬滴鼻液中富马酸酮替芬、盐酸麻黄碱、呋喃西林、亚麻酸、亚油酸含量的高效液相色谱方法。方法:采用Phenomenex Luna-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A为0.1%磷酸水溶液-乙腈(95∶5),流动相B为乙腈,梯度洗脱。检测波长为205 nm(富马酸酮替芬、盐酸麻黄碱、亚麻酸、亚油酸)、370 nm(呋喃西林);柱温40℃;流速1.0 mL·min^(-1)。结果:富马酸酮替芬、盐酸麻黄碱、呋喃西林、亚麻酸、亚油酸与相邻峰的分离度符合要求(r>1.5);这5种成分的线性范围分别为0.247~0.743、1.265~3.795、0.052~0.156、0.156~0.468、0.074~0.221 mg·mL^(-1)(n=6);平均回收率分别为99.64%、99.49%、100.6%、98.95%、98.78%(n=9)。结论:该方法简便准确、专属性强、重复性好,可用于复方富马酸酮替芬滴鼻液的质量控制。

HPLC双波长切换法同时测定仙桃草中木犀草素、芹菜素、金圣草素的含量

目的:测定仙桃草中木犀草素、芹菜素、金圣草素等3种黄酮类成分的含量。方法:以甲醇提取制备分析样品,采用纳谱ChromeCore C 18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(23:77)为流动相,流速1 mL/min,检测波长为350 nm(木犀草素、金圣草素)和337 nm(芹菜素),柱温35℃。结果:木犀草素、芹菜素、金圣草素在各自范围内线性关系良好(r≥0.9996),平均加样回收率分别为97.79%、98.77%、97.28%,RSD分别为0.94%、0.91%、0.77%。13批样品的木犀草素含量在0.0391~0.7979 mg/g之间,平均值为0.5503 mg/g;芹菜素含量在0.0556~0.2655 mg/g,平均值为0.1938 mg/g;金圣草素含量在0.0575~0.2484 mg/g,平均值为0.1711 mg/g。结论:该方法准确、可靠、重现性好,可用于仙桃草质量控制。

双波长HPLC法测定脉君安片中6种成分含量

目的建立双波长HPLC法同时测定脉君安片中氢氯噻嗪、葛根素、钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的含量。方法色谱柱为菲罗门Titank C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为水(含0.05%的三乙胺溶液,冰醋酸调节pH值至7.6)-甲醇,梯度洗脱,体积流量1.0 ml/min;检测波长270 nm(氢氯噻嗪)、245 nm(葛根素、钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱);柱温30℃;进样量10μl。结果6种成分的分离度均良好,阴性样品无干扰。氢氯噻嗪、葛根素、钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱分别在5.742~574.2μg/ml(r=0.9997)、30.517~3051.7μg/ml(r=0.9995)、0.644~64.35μg/ml(r=0.9996)、0.566~56.60μg/ml(r=0.9997)、0.478~47.75μg/ml(r=0.9992)、0.536~53.55μg/ml(r=0.9995)的范围内线性关系良好;各成分平均加样回收率为96.8%~99.2%,RSD为0.98%~2.21%。结论该方法操作简单、准确可靠、专属性强,可用于同时测定脉君安片中氢氯噻嗪、葛根素、钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的含量。

双波长高效液相法同时测定双香排石颗粒中的马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B

目的建立高效液相双波长切换法同时测定双香排石颗粒中马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B的含量。方法采用Alltima C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;以乙腈-甲醇（1∶3）（A）-0.1%磷酸溶液（B）为流动相进行梯度洗脱;柱温为35℃;流速为1.0 ml/min;进样量为20μl;马钱子苷、断氧化马钱子苷和当药苷检测波长为240 nm,迷迭香酸和木通苯乙醇苷B检测波长为330 nm。结果马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B在给定浓度范围内线性范围分别为5.91~118.20μg/ml（r=0.9995）、4.10~82.00μg/ml（r=0.9991）、8.13~162.60μg/ml（r=0.9993）、12.57~251.40μg/ml（r=0.9998）和4.95~99.00μg/ml（r=0.9997）,线性关系良好;平均加样回收率（n=6）和RSD值分别为96.88%（1.31%）、99.09%（1.47%）、98.29%（1.59%）、98.82%（1.42%）和97.51%（0.86%）。结论本文建立的双波长HPLC方法同时测定双香排石颗粒中马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B含量。方法灵敏度高、简便、准确、重现性好,为评价双香排石颗粒质量控制提供可靠方法。

养血生发胶囊双波长融合HPLC特征图谱

目的:建立养血生发胶囊240 nm和310 nm的双波长融合HPLC特征图谱。方法:样品色谱测定使用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,以0.1%冰醋酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱,同时采集2个特征吸收波长下的信号,记录10批样品的HPLC特征图谱;采用"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统"对图谱进行融合分析。结果:以大黄素为参照物,10批样品所得融合特征图谱共标定18个共有峰,相似度均在0.93以上。方法的精密度、稳定性和重复性良好。结论:本试验建立的方法克服了单波长检测时信息量有限的缺点,能较全面、真实地揭示中药材的内在质量特征,可为养血生发胶囊的质量控制和评价提供依据。

HPLC双波长切换法同时测定加味益母草膏中5个成分的含量

目的:建立HPLC双波长切换法同时测定加味益母草膏中益母草碱、芍药苷、芦丁、阿魏酸和毛蕊花糖苷5个成分含量。方法:采用Phenomenex Luna C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱(0~8 min,12%A→23%A;8~25 min,23%A→38%A;25~50 min,38%A→50%A),流速为1.0 mL·min^(-1);检测波长为230 nm(益母草碱、芍药苷、芦丁)和322 nm(阿魏酸、毛蕊花糖苷),进样量为20μL,柱温为30℃。结果:益母草碱、芍药苷、芦丁、阿魏酸和毛蕊花糖苷的平均含量分别为1.586、0.348、0.186、0.036、0.034 mg·g^(-1),5个成分线性关系良好(r>0.9995),平均加样回收率为98.8%~101.3%,RSD为1.1%~2.0%。结论:此方法高效、简便,易操作,可同时测定加味益母草膏中5个成分的含量,检测结果准确度高,精密度好,可用于加味益母草膏的质量控制,也可为加味益母草膏的进一步研究及临床应用提供科学依据。

HPLC-DAD双波长法同时测定柴胡中5种皂苷的含量

环氧醚型和异环双烯型皂苷为中药柴胡中的两类主要皂苷成分,但由于其紫外光谱存在差异,目前缺少针对2类皂苷成分同时进行定量的测定方法。为此,该文建立一种同时测定中药柴胡中环氧醚型（柴胡皂苷a,c,d）和异环双烯型（柴胡皂苷b_1,b_2）5种皂苷成分含量的双波长高效液相色谱分析方法。采用Welch Topsil~-C_（18）色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）柱温30℃,流动相为乙腈-水（0.1%磷酸）梯度洗脱,流速为1.0 m L·min-1,检测波长分别为：208 nm（柴胡皂苷a,c,d）、254 nm（柴胡皂苷b_1,b_2）。结果表明5种柴胡皂苷分离度良好,线性范围分别为：9.70~1 935.00（r=0.999 4）,8.20~1 380.00（r=0.999 3）,6.90~1 640.00（r=0.999 0）,5.25~630.00（r=0.999 4）,5.15~618.00 mg·L^-1（r=0.999 5）,线性关系良好,平均加样回收率在97.7%~100.2%,RSD均小于3%（n=6）。所建立的方法简便、快捷、重复性好,可用于中药柴胡中5种柴胡皂苷类成分的含量测定。

HPLC测定羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液的含量及有关物质

采用HPLC法测定羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液的含量及有关物质,色谱柱:Agilent Poroshell EC-C18(4.6 mm×150 mm,2.7μm);检测波长:292,320 nm;流动相:甲醇-0.1%甲酸-10 mmol甲酸铵溶液,梯度洗脱;柱温:35℃;流速:0.80 mL/min;进样量:3μL。结果显示,在该色谱条件下,羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中的主成分峰及其杂质均能完全分离。羟氯扎胺(oxyclozanide,OXY)、阿苯达唑(albendazole,ABZ)在100~1000 mg/L呈良好线性关系;已知杂质2-氨基-4,6-二氯苯酚盐酸盐、ABZ杂质A~F在质量浓度0.06~0.15 mg/L与峰面积呈良好的线性,r≥0.999;3,5,6-三氯水杨酸线性范围为5~18 mg/L,r=0.9992,平均加样回收率(RSD)在97.0%~107.0%(RSD≤3%,n=9)。经方法学验证,该方法简便、准确、专属性好,适合于羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液的有关物质测定。

双石通淋胶囊质量标准提升研究

目的:提升双石通淋胶囊质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法对制剂中粉萆薢进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)双波长法测定制剂中的盐酸小檗碱、丹参酮IIA、京尼平苷酸、苍术素的含量,色谱柱为Welch Xtimate C184.6 mm×150 mm,3μm,以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液(含0.02 mol/L磷酸二氢钠)为流动相B,进行梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,检测波长为254 nm和345 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果:粉萆薢的TLC图斑点清晰,分离度高,阴性样品无干扰。盐酸小檗碱、丹参酮IIA、京尼平苷酸、苍术素的浓度分别在6.196~198.257μg/mL、1.598~51.131μg/mL、6.364~203.656μg/mL、0.156~4.985μg/mL范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验RSD均小于2.0%;平均加样回收率分别为99.25%、99.95%、98.13%、98.20%,RSD分别为2.50%、2.80%、1.38%、2.71%(n=6)。结论:该方法操作简便、结果准确、重复性好,可用于提升双石通淋胶囊的质量标准。

HPLC-DAD双波长法同时测定苯丙林搽剂中4种成分的含量

目的建立双波长-高效液相色谱HPLC-DAD法同时测定苯丙林搽剂中4种成分的含量。方法采用Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,以甲醇-0.5%三乙胺溶液(用磷酸调pH至6.10)(68:32)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长214、240 nm。结果各组分在一定范围内(丙酸氯倍他索6.08~76.0 mg·L^(-1)、盐酸林可霉素0.4~2.0 g·L^(-1)、盐酸苯海拉明0.4~5.0 g·L^(-1)、苯佐卡因0.8~4.0 g·L^(-1))均呈良好线性关系;相关系数分别为1、0.9999、0.9997、0.9997。丙酸氯倍他索低、中、高浓度的回收率分别为100.38%、99.26%和99.26%,盐酸林可霉素低、中、高浓度的回收率分别为100.35%、99.93%和101.05%,盐酸苯海拉明低、中、高浓度的回收率分别为97.69%、97.78%和98.06%,苯佐卡因低、中、高浓度的回收率分别为100.66%、101.54%和102.89%。样品溶液在24 h内稳定。结论该方法操作简便、专属性强、回收率高,可为苯丙林搽剂多指标质量评价及控制提供科学依据。