基于酰胺基柱的HPLC-RID同时测定异麦芽酮糖中5种糖的含量及其影响因素

研究高效液相色谱-示差折光检测法(HPLC-RID)同时测定异麦芽酮糖产品中果糖、葡萄糖、蔗糖、异麦芽酮糖和海藻酮糖的含量及影响因素。方法采用酰胺基柱,通过精密度试验、t检验确证方法准确性,通过单因素试验和谱图比较确定色谱条件和前处理条件对分离的影响。结果表明,流动相中乙腈的增加能加强糖在酰胺基柱上的保留,三乙胺能显著消除果糖、葡萄糖和海藻酮糖在分离时产生的分裂峰或分叉峰并影响谱图中负峰的位置;样液介质中乙腈、三乙胺分别主要影响溶剂峰和负峰(峰的极性和大小)。在流动相中乙腈、三乙胺体积分数分别为75%、0.05%、柱温45℃、流速1.0 mL/min、进样体积10μL条件下,5种糖在10 min内基本基线分离,且色谱柱pH耐受安全,实际样品测定结果与COA无显著差异(p=0.05),精密度均小于1.3%,均满足相关检测标准的要求。

建立HPLC-RID测定枸杞子中枸杞多糖含量研究

目的通过高效液相色谱-示差折光检测法(HPLC-RlD)摸索枸杞子中枸杞多糖(枸杞多糖以葡萄糖计)的提取方式和含量测定方法,达到检测方法准确可靠操作简便的目的。方法本法采取加水回流提取方式,利用高效液相色谱仪和示差折光检测器进行检测,色谱柱为LC026(Prevail Carbohyrate ES为填充剂250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(70∶30),检测器温度40℃,流速1.0 ml/min,柱温40℃。结果枸杞子在0.5~4.0 mg/ml线性范围内呈良好线性关系,R^(2)=0.9999,平均回收率为104.81%,RSD=1.10%。结论该方法操作简便,灵敏度高,重复性好,准确可靠,可用于测定药材枸杞子中枸杞多糖的含量,并有效控制枸杞子质量。

HPLC-RID法测定海藻碘液中甘露醇的含量

建立了高效液相色谱—示差折光检测器(HPLC-RID)测定海藻碘液中甘露醇含量的分析方法。通过对色谱柱、流动相等色谱条件优化,选用Agilent Polaris NH_(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,乙腈和水(体积比为70∶30)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温30℃,示差折光检测器(RID)检测。结果表明,甘露醇在0.1~5.0 mg/mL的浓度范围内,线性关系良好,相关系数为0.9998;加标回收率为97.2%~98.8%,相对标准偏差(RSD)小于3.0%。该方法操作简单,准确度好,精密度高,适用于海藻碘液中甘露醇的快速测定。

大蒜中低聚糖的TLC鉴别和HPLC-RID含量测定

目的建立大蒜中低聚糖的薄层色谱(TLC)法和高效液相-示差折光检测器(HPLC-RID)法,用于大蒜中低聚糖的鉴别和含量测定。方法采用TLC法大蒜中果糖、蔗糖、蔗果三糖和蔗果四糖进行鉴别,以冰乙酸-氯仿-水(21/18/4)为展开系统,苯胺-二苯胺溶液为显色剂;采用HPLC-RID法测定大蒜中果糖、蔗糖、蔗果三糖和蔗果四糖的含量,色谱柱为碳水化合物分析柱(4.6×250 mm,4μm);流动相:乙腈-水(75/25),柱温:35℃,流速:1.0 mL/min,进样量:15μL。结果薄层色谱中可以检测到果糖、蔗糖、蔗果三糖和蔗果四糖4种低聚糖。果糖、蔗糖、蔗果三糖和蔗果四糖分别在0.03~0.81、0.5~16.04、0.02~0.65、0.02~0.64 mg/mL范围线性关系良好。4种糖类低、中、高浓度平均回收率(n=3)分别为98.0%、99.7%、100.3%和98.2%;测定新疆5种不同海拔(1733、1680、1250、2800、2300 m)大蒜中果糖、蔗糖、蔗果三糖、蔗果四糖的含量分别为0.34~0.54、6.54~8.74、0.45~0.61、0.04~0.15 mg/g。结论本研究建立的大蒜中低聚糖的定性、定量分析方法准确可靠、重现性好,可用于大蒜中低聚糖的鉴别和含量测定。

HPLC-RID法测定苹果中果糖 山梨醇 葡萄糖和蔗糖

采用高效液相色谱-示差检测器优化并建立苹果中果糖、山梨醇、葡萄糖和蔗糖的测定方法,该方法具有线性好(R2>0.99)、检测限(0.03~0.10 mg/mL)和定量限(0.09~0.30 mg/mL)低、精确性(RSD<2.16%)和回收率(93.59%~99.76%)高的特点。通过对苹果样品的分析,发现阿克苏冰糖心苹果中果糖含量最高(74.43±2.00 mg/g),其次是蔗糖(30.51±1.89 mg/g)、葡萄糖(18.75±1.52 mg/g),山梨醇含量最低(16.53±0.03 mg/g);其中,糖心果肉中山梨醇含量高,而果糖、葡萄糖和蔗糖低,说明阿克苏苹果“冰糖心”的形成与山梨醇的含量密切相关,山梨醇可能是阿克苏“冰糖心”苹果的重要特征指标。

HPLC-RID法测定蒜酶提取物中PEG含量

目的建立高效液相-示差折光检测器(HPLC-RID)法测定蒜酶提取物中聚乙二醇(PEG)含量的方法,并进行方法学考察。方法高效液相色谱法色谱柱为TSK gel G3000PWXL(7.8 mm×300 mm,7μm),流动相为纯水,柱温25℃,流速0.7 mg/mL,检测器为示差检测器,进样量15μL进行PEG含量检测。结果 PEG在浓度为0.05~15 mg/mL时,呈良好线性,相关系数r=1;精密度实验峰面积RSD分别为0.32%(日内精密度)和1.35%(日间精密度);重复性实验峰面积RSD为0.35%;稳定性实验峰面积RSD为1.27%;低、中、高浓度回收率分别为101.077%、100.045%、99.213%,RSD值分别为1.05%、1.08%、1.58%。6批蒜酶提取物中PEG平均含量为456.4mg/g。结论建立的HPLC-RID法各项检测指标均符合要求,可用于测定蒜酶提取物中PEG含量。

HPLC-RID测定盐酸金刚烷胺片中盐酸金刚烷胺的含量

目的建立高效液相色谱-示差折光检测器法(HPLC-RID)测定盐酸金刚烷胺片中盐酸金刚烷胺的含量。方法采用Waters Sun Fire C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水(10:90),柱温30℃,进样量20μL,流速1.0 mL/min,检测器为RID,检测池温度30℃。结果盐酸金刚烷胺的线性范围为0.2513~2.5130mg/mL(r=0.9994),平均回收率为100.1%,RSD为0.9%(n=9)。结论该方法简便、快速、准确、重现性好,可用于盐酸金刚烷胺片的含量测定。

HPLC-RID测定咽炎清片中左旋龙脑含量

以左旋龙脑标准品为对照,应用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography HPLC)(条件:Neptune C-18色谱柱,甲醇-0.4%磷酸(65∶35)为流动相,流速0.8 m L/min,柱温25℃)对咽炎清片中左旋龙脑的含量进行测定,结果发现左旋龙脑在10~100μg/m L范围内呈现良好的线性关系,其回归方程为Y=136.87X-211.73(r=0.9997,n=6),加样回收率为103.3%,RSD为0.42%,同时该方法操作简便,分析快速,方法学考察结果符合有关新药研究的技术要求及《中国药典》2015年版第四部通则中对于高效液相色谱法的各项规定,适宜用于咽炎清片中左旋龙脑含量测定。

HPLC-RID法同时测定复方牛磺酸滴眼液中牛磺酸和氨基己酸的含量

目的:建立同时测定复方牛磺酸滴眼液中牛磺酸和氨基己酸含量的高效液相色谱-示差折光检测器法。方法:采用Waters氨基键合硅胶柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为水-乙腈(40∶60),流速为0.8 ml·min^(-1),柱温为35.0℃,检测器参比池和检测池温度均为35.0℃,进样量为20μl。结果:牛磺酸和氨基己酸质量浓度在0.05~2.00 mg·ml^(-1)(r均为0.999 9)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.57%(RSD=1.07%,n=9)和100.69%(RSD=0.75%,n=9)。结论:该方法准确、简便、快速,适用于复方牛磺酸滴眼液的质量控制。

HPLC-RID法测定氨基葡萄糖盐酸盐的含量

目的建立高效液相色谱-示差折光检测法测定氨基葡萄糖盐酸盐的含量。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Bondapak C18柱(3.9×300mm,10μm),流动相为0.005 mol.L-1庚烷磺酸钠溶液(pH 4.0)-乙腈(97∶3),流速:2.0mL.min-1,柱温25°С,示差折光检测器池温度40°С。结果本法精密度高,稳定性好,氨基葡萄糖盐酸盐在0.998～7.497mg.mL-1的浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为99.4%。RSD=1.2%(n=9)。结论本方法简便,准确,重现性好,可作为该药品的含量测定方法。

HPLC-RI法测定银杏叶提取物中4种内酯的含量

目的:建立高效液相色谱法测定银杏叶提取物中4种内酯(银杏内酯 A、银杏内酯 B、银杏内酯 C、白果内酯)的含量。方法:采用 Symmetryshield 型 C_(18)色谱柱(3.9 mm×150 mm,5 μm),以甲醇-水(30:70)为流动相,流速为1.0 mL·min~^(-1),用外标法测定,示差折光检测器检测。结果:4种内酯浓度在0.02～0.24 mg·mL^(-1)范围内,与色谱峰面积呈良好线性关系,相关系数在0.9984～0.9998之间,检测限在0.025～0.035 μg之间,回收率在99.0%～100.2%之间。结论:本方法简单、准确、可靠、灵敏,适用于实验室和企业常规质量控制。

高效液相色谱-示差折光检测器法测定复配消毒液中3种双链季铵盐的含量

提出了高效液相色谱-示差折光检测器法测定复配消毒液中二癸基二甲基氯化铵、辛基癸基二甲基氯化铵、二辛基二甲基氯化铵等3种双链季铵盐含量的方法。复配消毒液样品经流动相稀释,以Welchrom C_(18)色谱柱为固定相,以体积比70:30的乙腈-0.01 mol·L^(-1)丁烷磺酸钠溶液的混合溶液(pH 3.5)为流动相进行洗脱,采用示差折光检测器测定3种双链季铵盐的含量。结果表明:3种双链季铵盐的质量浓度在50~1000 mg·L^(-1)内与对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为3.3~5.1 mg·L^(-1);对实际样品进行3个浓度水平的加标回收试验,回收率为91.0%~105%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.3%~2.2%。采用独立样本t检验法比对本方法与高效液相色谱-蒸发光散射检测器法是否具有显著性差异,结果显示两组检测结果t值为1.85,P值为0.089,表明无显著性差异。

麦糟水解液中单糖及脂肪酸的HPLC分析

建立高效液相色谱（HPLC）测定麦糟水解液中的单糖及脂肪酸的分析方法，检测条件：色谱柱为Aminex HPX-87H柱，柱温为50℃，流动相为5mmol·L^-1的硫酸，流速为0．4mL·min^-1，检测器为示差折光检测器．在此条件下，水解液中的单糖及脂肪酸的峰面积与浓度线性关系良好，相关系数R。在0．99991～0．99998之间，回收率为97．3％～101．5％．通过对样品的分析表明，麦糟水解液中不含有葡萄糖、甲酸及乙酰丙酸，木糖和阿拉伯糖的质量浓度比较高，乙酸的质量浓度比较低，单糖及脂肪酸的混合液得到很好的分离，分离过程在23min内完成．

HPLC示差折光法测定藻油中DHA的含量

首次采用HPLC示差折光法测定藻油中DHA的含量。色谱柱为Eclipse XDB-C18(Analytical 4.6×250mm,5μm),流动相为乙腈∶四氢呋喃∶水(含0.4%HAC)=77∶3∶20,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min。该条件下DHA在0.259～6.225 mg/mL内呈良好的线性关系,相关系数R2=0.9995,平均回收率为101.15%,RSD为1.98%(n=6)。该方法可靠、简便、重现性好,可作为藻油中DHA的定量方法。

HPLC-示差折光检测器法测定单硬脂酸甘油酯的含量

目的建立测定单硬脂酸甘油酯含量的高效液相-示差检测器方法。方法采用Waters Sunfire C18色谱柱,柱温为30℃,以四氢呋喃为流动相,流速为1.0mL.min-1,采用示差检测器,检测器温度为30℃,进样量为20μL。结果单硬脂酸甘油酯在1～40mg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为100.1%(RSD=1.8%,n=6)。结论本方法灵敏度高,简便快捷,适用于单硬脂酸甘油酯的含量测定和质量控制。

示差折光检测器高效液相色谱法测定中间馏分芳烃含量的不确定度分析

采用示差折光检测器高效液相色谱法测定中间馏分芳烃含量,使用不确定度评估方法来建立数学模型,对不确定性来源进行分析,计算各个不确定度分量的结果,然后评估合成标准不确定度和扩展不确定度。评定结果表明,标准溶液配制过程产生的不确定度分量最大,其中以质量称量过程中的不确定度最大,其次是定容和标准物质纯度引入的不确定度;标准曲线拟合引入的不确定度次之。此外,值得关注的还有数值修约和测量重复性引入的不确定度。取置信区间为95%,包含因子k=2,总多环芳烃质量分数测定结果为10.4%±1.1%,总芳烃质量分数测定结果为23.9%±2.7%。

HPLC-示差折光检测法测定白酒中三氯蔗糖的方法研究

该研究采用高效液相色谱-示差折光检测法测定白酒中的三氯蔗糖含量,从流动相比例、流速、进样量、柱温、示差检测池温度五个方面进行考察,确定最佳色谱条件。结果表明,在流动相为乙腈∶水(20∶80,V/V)、流速1.0 mL/min、进样量20μL、柱温35℃、示差折光检测器温度35℃条件下,三氯蔗糖在质量浓度0.01~0.40 mg/mL范围内,线性关系好,相关系数R2=0.99994,检出限为3.538μg/mL,定量限为11.79μg/mL,平均加标回收率为96.3%~103.4%,精密度试验结果相对标准偏差在0.6%~6.6%之间,均能满足检测要求。该方法操作简单、方便快捷、定量准确,适用于白酒中三氯蔗糖含量的大规模、大批量快速检测分析。

HPLC示差折光分析法测定乳糖含量

目的建立HPLC示差折光分析法测定乳糖的含量。方法采用Alltima-NH2柱,流动相为乙腈-水(67∶33),流速为1.0mL.min-1,柱温为45℃。结果乳糖在0.22～1.76mg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9991),平均回收率为99.0%,RSD为1.5%(n=9)。结论该法简便、快速,测定结果准确。

HPLC-示差折光检测器测定米格列醇片的含量及有关物质

目的建立高效液相色谱-示差折光检测法测定米格列醇片的含量和有关物质。方法用磺酸基阳离子交换键合硅胶(250×4.6mm,5μm)为填充剂;以乙腈-三氟乙酸溶液(4.5→1000mL)(20∶80)为流动相;示差折光检测器检测;检测器温度为40℃。理论板数以米格列醇峰计算,应不低于2000。结果空白辅料不干扰测定,米格列醇主峰和杂质峰分离良好,定量限浓度约为10μg·mL^-1。米格列醇浓度在26.28~210.2μg·mL^-1范围内,与峰面积线性关系良好,线性方程A=2611.5C-2802,r=0.9988;平均回收率100.9%(RSD=1.0%;n=9);溶液在8h内稳定。结论本法专属性强、灵敏度高、准确度和稳定性好,可作为米格列醇片有关物质和含量测定的检测方法。

HPLC-RID法替代滴定法测定百令胶囊中甘露醇含量的研究

目的：建立HPLC-RID法测定百令胶囊中甘露醇的含量。方法：样品以乙醇为溶剂，加热回流提取甘露醇。采用氨基柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-水（86：14）为流动相，流速1.0 mL·min^-1，采用示差折光检测器进行检测。结果：甘露醇浓度在0.28～7.00 μg范围内，与色谱峰面积积分值呈良好线性关系，定量限8.55 μg，回收率在98.81%（n=6）。测定了3批样品，甘露醇含量范围为5.9～7.3 mg·粒^-1。结论：本方法简单、准确，专属、灵敏，适用于百令胶囊中甘露醇的含量测定；可以替代百令胶囊及其他发酵虫草制剂标准采用的，以测定含羟基化合物总量为甘露醇含量的氧化还原滴定法。