HPLC法测定富马酸伏诺拉生注射液中有关物质的含量

目的建立HPLC测定富马酸伏诺拉生注射液中有关物质含量的方法。方法采用YMC-Pack Pro C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,3μm),流动相A为0.04 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(含0.2%三乙胺,用磷酸调节pH至6.6)-乙腈-异丙醇(92∶4∶4),流动相B为0.04 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(含0.2%三乙胺,用磷酸调节pH至6.6)-乙腈(40∶60),采用梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温40℃,检测波长220 nm,进样量20μL。结果杂质H、杂质B、杂质C、杂质F、杂质D、杂质E、杂质J和伏诺拉生的质量浓度分别在0.12~4.99、0.12~4.99、0.12~4.90、0.13~5.01、0.12~4.99、0.13~5.01、0.13~5.01、0.13~5.01μg·mL^(-1)内与峰面积呈良好线性关系(r>0.9990);7个杂质的回收率为94.72%~100.67%,其RSD值均小于2.0%;7个杂质和伏诺拉生的定量限为0.12~0.13μg·mL^(-1),检测限为0.040~0.043μg·mL^(-1)。结论经方法学验证,本法专属性强、灵敏度高、准确度高,可用于富马酸伏诺拉生注射液中有关物质的含量测定。

Protective effect and mechanism of clemastine fumarate on acute lung injury in mice with intestinal ischemia-reperfusion

Objective:To evaluate the protective effect and mechanism of clemastine fumarate(CLE)on acute lung injury(ALI)in intestinal ischemia-reperfusion(I/R)mice.Methods:Twenty-four SPF Balb/c mice were randomly divided into sham operation group(sham group),ischemia-reperfusion group(I/R group),and clemastine fumarate pretreatment group(I/R+C group).In the I/R group,an intestinal ischemia-reperfusion model was established(ischemia for 40 minutes,reperfusion for 2 hours).In the I/R+C group,CLE 5 mg/kg was intraperitoneally injected before the operation.Lung tissue morphology was observed and scored by HE staining;and the ratios of wet weight to dry weight(W/D)were recorded.the levels of MDA,SOD,GSH-px,NF-κB and TNF-αin lung tissue of each group were determined by ELISA;Western blot method was used to determine the expression of TLR4 protein in lung tissue.Results:Compared with the Sham group,the I/R group had significantly higher lung tissue injury score and wet/dry ratio(P<0.05),increased lung tissue MDA level(P<0.05),decreased SOD and GSH-px levels(P<0.05),and increased NF-κB and TNF-αlevels,the expression of TLR4 protein in lung tissue increased(P<0.05);compared with the I/R group,the lung tissue injury score and wet/dry ratio of the I/R+C group decreased(P<0.05),the level of MDA in lung tissue decreased(P<0.05),the levels of SOD and GSH-px increased(P<0.05),and the levels of NF-κB and TNF-毩decreased(P<0.05),the expression of TLR4 protein in lung tissue decreased(P<0.05).Conclusion:Clemastine fumarate can alleviate acute lung injury after intestinal ischemia-reperfusion in mice,and the mechanism may be related to the inhibition of oxidative stress and inflammatory response in lung tissue.

富马酸喹硫平片中有关物质的HPLC法测定

目的建立富马酸喹硫平片中有关物质的HPLC测定法。方法采用HPLC法测定富马酸喹硫平片中KL-Imp01、KL-Imp02、KL-Imp03、KL-Imp04、KL-Imp05杂质含量。色谱柱为Techmate C18柱(250 mm×4.6 mm×5μm),以甲醇-水-三乙胺(磷酸调pH至8.0)(670:330:4)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为40℃,检测波长为250 nm,进样体积为20μL。结果在该色谱条件下,可同时检测到5个杂质,各杂质与富马酸喹硫平的分离度均大于1.5。KL-Imp01、KL-Imp02、KL-Imp03、KL-Imp04、KL-Imp05定量限分别为0.1451μg/mL、0.0388μg/mL、0.1133μg/mL、0.0493μg/mL、0.0510μg/mL,检测限分别为0.0435μg/mL、0.0117μg/mL、0.0340μg/mL、0.0148μg/mL、0.0153μg/mL,线性范围分别为0.1451~0.9673μg/mL、0.0388~0.9710μg/mL、0.1133~0.7554μg/mL、0.0493~0.8213μg/mL、0.0510~0.8196μg/mL。各杂质在48 h内溶液稳定性良好,峰面积RSD<2.0%(n=8)。低、中、高三个浓度的加样回收率为92.10%~108.00%(n=3)。结论该方法简便、灵敏、重现性和耐用性好,能够用于富马酸喹硫平片的质量控制。

HPLC法测定富马酸比索洛尔氢氯噻嗪片中富马酸比索洛尔和氢氯噻嗪的含量

目的:采用高效液相色谱法测定富马酸比索洛尔氢氯噻嗪片中富马酸比索洛尔和氢氯噻嗪的含量。方法:以 C_(18)为色谱柱(5μm,4.6 mm×150mm),以磷酸盐缓冲溶液一乙腈(75:25)为流动相,柱温为40℃,检测波长为220 nm。结果:富马酸比索洛尔线性范围为25-300μg·mL^(-1),(r=0.9998),氢氯噻嗪线性范围为50-200μg·mL^(-1),(r=0.9965)。结论:方法简便,结果准确,适用于该产品的质量控制。

RP-HPLC法同时检测苹果汁中乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素的条件优化

建立了一种结合紫外检测器同时检测果汁中的乳酸、富马酸、5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)和展青霉素的反相高效液相色谱(reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)分离方法。考察了柱温、pH值、流速以及乙腈浓度对各组分保留时间和峰高的影响,最终采用pH为2.5的磷酸水溶液和乙腈的混合液作用于反相C18柱,以进行乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素的色谱分析。在流速为1.00ml/min,温度为30℃的整个分析过程中,流动相为含有5%乙腈的磷酸水溶液。前10min内,两种有机酸被在210nm处分离和检测。而5-HMF和展青霉素则被接下来的10min内于276nm处分离和检测。89.96%到102%的平均回收率证实了方法的准确度。该方法被成功地用于同时定量苹果浓缩汁中的乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素。

RP-HPLC同时检测苹果汁中乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素

【目的】同时定量检测苹果汁中乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素,建立一种基于多通道紫外检测器的反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离方法。【方法】采用C18色谱柱(250mm×4.6mmID,5.0μm),以pH为2.5的磷酸水溶液和乙腈按95:5混合为流动相,在流速1.00ml·min-1,温度30℃下进行乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素的色谱分析。【结果】前10min,两种有机酸在210nm下被分离和检测;后10min,5-HMF和展青霉素于276nm下被分离和检测。检测限分别为:乳酸0.1790mg·L-1、富马酸0.0032mg·L-1、5-HMF0.0057mg·L-1和展青霉素0.0089mg·L-1,保留时间、峰高和峰面积的重现性(n=3)变异系数(CV)均小于1.0%。保留时间的日内重现性(n=3)和日间精密度(n=10)变异系数(CV)分别小于0.09%和0.5%。平均回收率为95.64%～99.17%。【结论】该方法可应用于同时定量检测苹果浓缩汁中乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素。

HPLC法同时测定4种焙炒咖啡豆中6种有机酸方法初探

建立了焙炒咖啡豆中同时测定柠檬酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、没食子酸、富马酸的测定方法,以柠檬酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、没食子酸、富马酸为对照品,对4种商品焙炒咖啡豆进行含量比较。从磨粉粒度、加粉量、水温、冲泡时间确定样品的提取条件,色谱柱:流动相:Acclaim^(TM)120 C_(18)(4.6 mm×250 nm,5μm),流动相:甲醇∶0.1%磷酸=25∶75,流速1 m L/min,柱温30℃,检测波长210 nm。结果表明:用常温的纯水提取5 g咖啡粉,咖啡粉用咖啡磨3档磨出,于40℃水温中超声5 min可以很好地提取出柠檬酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、没食子酸、富马酸。酒石酸在2.5~30μg范围内具有良好的线性,R^2=0.9992;苹果酸在1.25~15.00μg范围内具有良好的线性,R^2=0.9997;柠檬酸在2~24μg范围内具有良好的线性,R^2=1.0000;琥珀酸在0.5~6.0μg范围内具有良好的线性,R2~=0.9999;没食子酸在0.025~0.300μg范围内具有良好的线性,R^2=1.0000;富马酸在0.025~0.300μg范围内具有良好的线性,R^2=1.0000,加标回收率分别为98.01%、100.29%、110.12%、96.55%、98.3%、106.32%。因此,该法具有快速、简洁、重现性好的特点,可用于检测咖啡豆中的有机酸。

RP-HPLC法测定人体中富马酸喹硫平血药浓度

目的 建立测定富马酸喹硫平血药浓度的方法。方法 应用反相高效液相色谱技术,YWG-C_(18)(150mm×4.6mm,10μm)色谱柱,以氯氮为内标,乙醚为萃取剂,甲醇-水-四甲基乙二胺(63:45:0.3)为流动相,冰乙酸调节pH至5.80,流速1mL·min^(-1),检测波长250nm,柱温40℃。结果 富马酸喹硫平及内标与血清杂质可完全分离,保留时间分别为4.6min和6.1min,在10～2400ng·mL^(-1)浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率98.2％～101.1％,日内、日间RSD在2.7％～6.9％之间,最低检测浓度为5ng·mL^(-1)。结论 该方法操作简便,结果准确,专属性强,具有一定的实用价值。

HPLC测定人血清中三种抗HIV药

建立一种用高效液相色谱法同时测定人血清中3种抗HIV药(拉米夫定、富马酸替诺福韦二吡呋酯和ACC007)的新方法。测定时采用Dionex C_(18)(5μm,4.60 mm×250 mm)色谱柱;流动相为甲醇-水,采用梯度洗脱方式,流速为0.6 mL/min;检测波长为260 nm。结果发现在优化色谱条件下,拉米夫定、富马酸替诺福韦二吡呋酯和ACC007的线性范围分别为2.07~103.5、5.15~206.0、2.06~51.45μg/mL,检出限分别为1.05、2.60、1.03μg/mL,加样回收率分别为98.54%~103.8%、98.29%~102.5%、101.7%~108.4%。本方法简单快速,可用于人血清中3种药物含量的测定。

模拟兔血浆中富马酸福莫特罗的HPLC-ECD测定

采用液液萃取方法,建立了模拟兔血浆中富马酸富莫特罗的高效液相色谱-电化学检测（HPLC-ECD）测定新方法.实验结果表明,富马酸富莫特罗质量分数的线性范围为47～2500 μg/mL（r=0.999 9）,提取回收率为77.8％～80.1％,方法回收率为96.2％～106.0％ （RSD≤1.9％）.该法有望用于动物体内药物代谢分析.

RP-HPLC法测定复方酮替芬胶囊中富马酸酮替芬的含量及含量均匀度

建立了反相高效液相色谱法测定复方酮替芬胶囊中富马酸酮替芬的含量及含量均匀度。其平均回收率为１０２．０％（ＲＳＤ为１．５％）。本法简便、准确，可作为常规检验的方法。国内未见报道。

HPLC法测定富马酸喹硫平缓释片的含量

目的:建立HPLC法测定富马酸喹硫平缓释片的含量。方法:采用C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水-三乙胺(600:400:4)(磷酸调节pH值为6.8)为流动相,检测波长为289nm,流速为1.0mL/min。结果:喹硫平在80.33μg/mL～281.17μg/mL范围内线性关系良好,回归方程:y=393528x-523868,相关系数γ=0.9999,平均回收率是100.2%(RSD=0.28%)。方法的精密度、重复性、回收率、稳定性均较为理想。结论:本方法简单灵敏,重复性好,可作为富马酸喹硫平缓释片的含量测定方法。

RP-HPLC测定富马酸比索洛尔片的含量及有关物质

目的建立富马酸比索洛尔片的含量及有关物质的测定方法.方法采用C18色谱柱,流动相为甲醇-pH5.0醋酸钠溶液(60∶40为含量测定的流动相,50∶50为有关物质检测的流动相);检测波长271 nm;流速 1.0 ml·ml-1.结果辅料对主药测定无干扰,在选定的色谱条件下,富马酸比索洛尔与有关物质分离很好,在浓度0.2～1.0 mg·ml-1范围内线性关系良好,有关物质含量为0.81%,回收率为99.93%,RSD=0.36%.结论所用方法简单、准确、经济、专属性强,可用于富马酸比索洛尔片中有关物质及含量的测定.

HPLC法测定富马酸喹硫平缓释片中喹硫平氮氧化物及其它有关物质

目的:建立HPLC法测定富马酸喹硫平缓释片中有关物质的测定方法。方法:采用Thermo C8(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;以乙腈-甲醇-0.02mol·L-1磷酸氢二铵溶液(6:49:45)为流动相,检测波长为230nm,流速为1.0mL·min-1。结果:该法可以检测到6个杂质,各杂质峰与喹硫平峰的分离度良好。在0.0446～2.676μg·mL-1范围内,喹硫平氮氧化物峰面积和浓度呈良好的线性关系,回归方程:y=83826x-1135.9,相关系数γ=0.9999,喹硫平氮氧化物的平均回收率是101.0%(RSD=0.04%)。结论:本方法简便,准确,重现性好,能够用于富马酸喹硫平缓释片的质量控制。

HPLC法测定富马酸喹硫平片含量的不确定度分析

HPLC法测定富马酸喹硫平片的富马酸喹硫平含量,分析和评定不确定度来源,控制实验误差。按照2020年版《中国药典》中富马酸喹硫平片含量测定方法,通过建立数学模型,分析、量化各实测数值不确定度分量,最终合成标准不确定度,得出不确定度报告。HPLC法测定富马酸喹硫平片的富马酸喹硫平含量扩展不确定度为1.3308%(K=2),测量不确定度报告为(101.6±1.3308)%,K=2。本次试验数据的不确定度科学、可靠、完整,可为HPLC测定其它药物的含量方法提供参考。

HPLC法测定肿节风中延胡索酸的含量

用阴离子交换树脂对肿节风样品进行预处理，ＨＰＬＣ法测定了６批肿节风中延胡索酸的含量。本法可用于肿节风药材及其制剂的质量控制。

富马酸酮替芬片含量均匀度HPLC法不确定度分析

通过对高效液相色谱法(HPLC)测定富马酸酮替芬片含量均匀度的方法进行不确定度分析,建立数学模型,量化不确定度分量,计算出扩展不确定度[U HPLC=0.64%(k=2)]。分析结果表明,电子天平的使用和稀释步骤是产生不确定的主要来源。从该模型中能找到更好控制实验误差的方法。根据扩展不确定度的大小也可以为富马酸酮替芬片含量均匀度测定方法的选择提供参考依据。

HPLC法测定富马酸二甲酯有关物质

目的建立高效液相色谱法测定富马酸二甲酯原料药中有关物质的方法。方法采用Thermo C18色谱柱,以乙腈-体积分数为0.05%的磷酸溶液（体积比为10∶90）为流动相,流速：1 m L·min^-1,检测波长：211 nm,进样量：20μL,柱温：35℃。结果杂质A、B、C、D和富马酸二甲酯的定量限分别为0.009、0.036、0.014、0.073和0.020 mg·L^-1,杂质A、B、C、D和富马酸二甲酯的线性分别为0.160-1.602、0.160-1.599、0.160-1.602、0.160-1.600和0.160-1.601 mg·L^-1,杂质A、B、C、D的平均回收率分别为98.5%、98.5%、100.0%和98.6%。结论本法可作为富马酸二甲酯有关物质的测定方法。

HPLC法测定复方草珊瑚含片中反丁烯二酸与异秦皮啶的含量

目的:测定复方草珊瑚含片中反丁烯二酸和异秦皮啶的含量。方法:HPLC 法,采用 Kromasil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);以流动相乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)进行梯度洗脱[0～8 min,100%B,流速0.5 mL·min^(-1);8～13 min,100%B→95%B,流速0.5 mL·min^(-1);13～43 min,95%B→80%B,流速0.7 mL·min^(-1);43～51 min,80%B→30%B,流速0.7 mL·min^(-1);51～52 min,30%B→100%B,流速0.5 mL·min^(-1);52～57 min,100%B,流速0.5 mL·min^(-1)];柱温38℃;检测波长:210 nm。结果:反丁烯二酸和异秦皮啶的线性良好,相关系数分别为0.9996和0.9999;平均回收率(n=9)分别为99.3%(RSD=0.35%)和101.2%(RSD=0.56%)。结论:该方法可行,准确度、重复性良好,可用于控制该产品的质量。

改进HPLC法测定门冬氨酸鸟氨酸原料药中的有关物质

目的:改进测定门冬氨酸鸟氨酸原料药中有关物质的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex Luna NH2(两根串联),流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(p H 5.6)-乙腈(40∶60,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为205 nm,柱温为35℃,进样量为20μL。结果:马来酸、3-氨基-2-哌啶酮、琥珀酸、苹果酸、富马酸、β-门冬氨酰门冬氨酸检测质量浓度线性范围分别为5.398~26.992μg/m L(r=0.999 1)、5.204~26.021μg/m L(r=0.999 3)、5.149~25.749μg/m L(r=0.999 6)、5.174~25.874μg/m L(r=0.999 3)、5.164~25.823μg/m L(r=0.999 3)、5.194~25.973μg/m L(r=0.999 5);定量限分别为0.22、0.53、51.50、103.50、0.26、8.31 ng,检出限分别为0.13、0.26、10.30、20.70、0.13、2.08 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均不超过2%;加样回收率分别为99.30%~102.31%(RSD=1.02%,n=9)、99.88%~100.89%(RSD=0.37%,n=9)、99.36%~101.53%(RSD=0.70%,n=9)、99.13%~102.65%(RSD=1.15%,n=9)、100.18%~101.45%(RSD=0.38%,n=9)、99.39%~100.81%(RSD=0.58%,n=9)。6批样品均未检出马来酸、琥珀酸和β-门冬氨酰门冬氨酸;3-氨基-2-哌啶酮含量为0.006%~0.056%,苹果酸含量为0.014%~0.071%,富马酸含量为0.000 5%~0.003 4%,最大未知杂质含量为0.013%~0.110%,未知杂质总含量为0.013%~0.120%。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性均较好,可用于门冬氨酸鸟氨酸原料药中有关物质的测定。