Determination of atmospheric hydroxyl radical by HPLC coupled with electrochemical detection

氢氧根激进分子(· O H ) 在许多大气的混合物的氧化和移动起一个中央作用。因为它的高反应和低大气的丰富，大气的· O H 的测量是很困难的。在这篇文章，一个简单、高度敏感的方法，高效液体层析结合了 coulometric 察觉(HPLCCD ) ，被开发由决定它的反应间接地决定· O H 有水杨酸(柳安) 的产品， 2,3-dihydroxybenzoic 酸(2,3-DHBA ) ，和 2,5-dihydroxybenzoic 酸(2,5-DHBA ) 。在为它的决心的最适条件下面， 2,3-DHBA 和 2,5-DHBA 能很好被分开，为 2,3-DHBA 的察觉限制是 3 × 10 ? 10 mol/L 并且因为 2,5-DHBA 是 1.5 × 10 ? 10 mol/L，它比大多数以前的报告低。这个方法也被使用测量大气的氢氧根激进分子层次并且在干净、弄脏的空中表明了可行性。

基于HPLC-ECD研究牡荆叶抗氧化的谱-效关系

为研究牡荆叶指纹图谱与抗氧化活性的谱-效关系,该研究首先建立了18批牡荆叶的高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)指纹图谱,对不同来源牡荆叶药材进行聚类分析,鉴定主要酚类化合物且测定其含量,分析牡荆叶的总酚和总黄酮含量,并采用DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、氧自由基吸收能力法及铁离子还原能力法考察其体外抗氧化活性,通过皮尔逊相关分析、灰度关联分析及偏最小二乘回归分析法研究牡荆叶的谱-效关系。结果表明:(1)牡荆叶的指纹图谱标定21个共有峰,共指认出10个峰,其含量顺序为绿原酸>异荭草苷>木犀草苷>异牡荆素>异绿原酸A>异绿原酸C>原儿茶酸>荭草苷>异绿原酸B>新绿原酸;不同产地样品间相似性较高,相似度结果为0.816~0.983。(2)系统聚类分析显示,样品含量对分类有一定影响,不同来源样品被分为3类,其中南北方样品存在一定差异。(3)牡荆叶中总酚和总黄酮的含量分别为15.82~61.83 mg·g^(-1)和27.85~157.65 mg·g^(-1),样品均具不同程度的抗氧化活性。(4)谱-效关系表明,牡荆叶的抗氧化活性是多种化合物协同作用的结果,峰9(异荭草苷)、峰4和峰5(绿原酸)等化合物对牡荆叶药材抗氧化活性的贡献最大。综上表明,牡荆叶具有较好的抗氧化活性,其中主要的活性指标是异荭草苷和绿原酸。该研究结果可为牡荆叶抗氧化活性成分的筛选及其质量控制提供参考依据。

柱前衍生-电化学检测HPLC法测定大鼠脑内的谷氨酸和γ-氨基丁酸

目的 :建立大鼠脑组织内谷氨酸和γ 氨基丁酸的HPLC测定方法。方法 :大鼠脑组织匀浆液低温离心 ,上清液经甲醇沉淀蛋白并稀释至合适浓度后与邻苯二醛在亚硫酸钠存在下发生衍生化反应 ,衍生物经HPLC分离 ,电化学检测。结果 :谷氨酸在 0 .1～ 2 .0 μg·ml- 1 ,γ 氨基丁酸在 0 .0 5～ 1.0 μg·ml- 1 浓度范围内 ,线性关系良好。谷氨酸测定的日内和日间变异系数(RSD )分别小于 3.4%和 4.5 % ,γ 氨基丁酸测定的日内和日间变异系数 (RSD )分别小于 4.2 %和 8.6 %。两者回收率分别为95 .9%～ 10 2 .3%和 10 7.2 %～ 110 .0 %。谷氨酸和γ 氨基丁酸的最小检出浓度均为 5ng·ml- 1 。SD大鼠小脑、皮层、丘脑、海马内谷氨酸的含量分别为 96 0 .2、10 6 8.0、46 0 .2和 846 .6 μg·g- 1 ;γ 氨基丁酸的含量分别为 186 .0、16 5 .4、149.3和 188.6 μg·g- 1 。结论 :本法简便、灵敏、准确 ,可用于大鼠脑组织内谷氨酸和γ

HPLC-ECD法分析中枢单胺类递质及其在免疫应答过程中的动态变化

建立快速、简便反相离子对高效液相色谱—电化学检测分析法,一次同时测定生物样品中单胺类递质(NE.E.DA、5—HT)及其前体氨基酸(Tyr、Trp)和主要代谢产物(HVA、5-HIAA共8种化合物。应用该法检测了SRBC免疫小鼠大脑皮质、间脑、脑干8种单胺类化合物的变化规律。免疫后第3天,皮质DA/HVA、间脑NE含量显著降低(P<0.05);第5天,间脑5-HT和脑干5-HIAA含量明显升高(P<0.05)。支持免疫应答可以影响中枢单胺类递质代谢的推论。

HPLC-荧光检测法测定大鼠血浆及脑组织中5种单胺类神经递质

目的：建立HPLC-荧光检测法同时测定大鼠血浆及脑组织中5种单胺类神经递质的方法。方法：采用Kromasil C18反相柱,流动相为甲醇∶水（92∶8）,其中水相中每升含NaAc 0.1mol、EDTA-2Na 0.1mol,HAc1.44mL,流速1mL.min-1,发射波长330nm,激发波长290nm。结果：线性范围：5-羟色胺（5-HT）0.30-15.20ng,多巴胺（DA）1.09-54.45ng,去甲肾上腺素（NE）1.77-88.50ng,5-羟色胺酸（5-HTP）0.26-12.83ng,5-羟色胺-3-吲哚乙酸（5-HIAA）0.25-12.70ng,线性关系与精密度良好,血浆及脑组织中5种单胺类神经递质的回收率在88.7%-105.7%之间。结论：该法操作简单、快速、准确,可用于检测大鼠血浆及脑组织中5种单胺类递质的含量。

HPLC-荧光检测法测定大鼠脑组织中的单胺类神经递质及相关物质

目的采用HPLC-荧光检测方法测定大鼠脑组织中的单胺类递质及相关物质。方法脑组织匀浆用提取液(含0.1mol.L-1HClO4和0.2 mmol.L-1EDTA)提取后进样。色谱柱用Waters Nova-Pak C18(150 mm×3.9 mm,4μm);流动相为甲醇-缓冲液(14:86);流速1.0 ml.min-1;荧光检测波长λEX=280 nm,λEM=330 nm。结果7种单胺类神经递质及相关物质的标准曲线在一定浓度内线性关系良好,方法的加样回收完全,精密度好。结论所建方法简便、快速、准确,可用于脑组织中单胺类神经递质及相关物质的测定。

HPLC－电化学检测法检测血浆中的盐酸纳洛酮和盐酸纳曲酮

本文建立了简便、灵敏的定量分析血浆中盐酸纳洛酮和盐酸纳曲酮的高效液相色谱－电化学检测法。血浆样品用苯－乙醇（９∶１）混合溶剂提取，在Ｃ１８柱上以０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾－甲醇（８４∶１６）为流动相进行分离，用电化学检测器在７６０ｍＶ的工作电压下进行检测，色谱峰分离完全，血浆本底无干扰。将盐酸纳曲酮和盐酸纳洛酮互为内标，测得两药在２．５～１６０ｎｇ／ｍｌ的范围内具有良好的线性关系，血浆中盐酸纳洛酮和盐酸纳曲酮的回收率分别为７６．８％～８９．６％和７８．６％～８４．６％，日内ＲＳＤ＜４．８％，日间ＲＳＤ＜９．１％，最低检出浓度为１ｎｇ／ｍｌ血浆。应用本法对犬ｉｖ盐酸纳洛酮和盐酸纳曲酮的药代动力学进行了研究，报告了相应的动力学参数。

微透析-HPLC-ECD联用在线测定烟碱暴露大鼠脑内单胺神经递质的动态变化

为探讨烟碱依赖的形成机理,实时评价烟碱引起的单胺神经递质变化效应,采用在线微透析和高效液相色谱-电化学检测器(HPLC-ECD)联用方法测定了大鼠脑纹状体中多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量。以2.0μL/min灌流,每15 min收集1次透析液并自动注入五氟苯基柱,在梯度洗脱条件下分离检测。结果表明:方法的线性范围为0.2~500.0 ng/m L,日内和日间精密度均≤9.7%,加标回收率为86.2%~105.9%,体外透析探针回收率为25.3%~28.3%。以2.0 mg/kg烟碱进行腹腔注射后,大鼠纹状体中DA和5-HT的释放增加但未见持续增强,而HVA和5-HIAA的量明显升高。该方法简便快速,灵敏度高,选择性好,适合于烟碱作用下活体动物脑内单胺类神经递质变化的动态分析。

废水中优先控制污染酚的HPLC分离-电化学检测

研究了 HPL C分离 -安培法检测四种优先控制污染酚的色谱条件。在 Shim- pack CL C- ODS柱上 ,以 0 .1mol/L Na H2 PO4 +0 .0 5 mm ol/L EDTA· 2 Na+1% CH3 COOH(p H3.0 ) +5 0 % CH3 OH作流动相 ,氧化电位 +1.0 V检测。工作曲线的线性范围在 0～ 30μg/ml,检测限达 ng/m

啤酒中游离酚酸的HPLC-ECD测定

本文采用高效液相色谱-电化学检测方法,测定了5种啤酒中的没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、丁香酸、p-香豆酸和阿魏酸等6种游离酚酸的含量。在色谱柱为Hypersil ODS柱(250mm×4.0mm,5.0μm),流动相为甲醇-2%醋酸,梯度洗脱,流速为0.8ml/min,检测电压为700mV,柱温为30℃的条件下,啤酒中的6种酚酸可以得到很好的分离。该方法是一种快速简便、灵敏准确的分析方法,可以为啤酒的质量控制提供科学依据。

HPLC-ECD检测猕猴血清中单胺类递质

目的：通过应用HPLC—ECD分离测定猕猴血清中单胺类递质，验证其与经前期综合征（PMS）肝气逆证的内在关系，筛选科学有效的检测方法。方法：采用ZORBA×SB-C18色谱柱（4．6imm×250mm，5μm），流动相：乙酸钠100mmol·L^-1，柠檬酸85mmol·L^-1，正二丁胺0．4mmol·L^-1，辛烷基磺酸钠1．5mmol·L^-1，乙二胺四乙酸（EDTA）0．2mmol·L^-1,甲醇18％，抽滤。流速0．9mL·min^-1，量程1μA。结果：猕猴血清中去甲肾上腺素（NE），肾上腺素（E），多巴胺（DA）和5-羟色胺（5-HT）回收率依次为97．0％，97．8％，99．5％，100．3％，RSD0．22％-0．93％，重复性较好。结论：该方法操作简便、快速、准确，是检测猕猴血清中单胺类递质检测的一种理想方法。

美沙拉秦中有关物质的HPLC-电化学检测法测定

建立了高效液相色谱-电化学检测法测定美沙拉秦中有关物质3-氨基水杨酸、2-氨基苯酚和4-氨基苯酚。以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以磷酸二氢钾-辛烷磺酸钠缓冲溶液(pH2.2)-甲醇-乙腈(890∶80∶30)为流动相A,甲醇为流动相B进行梯度洗脱,以玻碳圆盘电极为工作电极,银-氯化银电极为参比电极,于+0.7V电压处测定。美沙拉秦及其3个有关物质的线性范围分别为0.2～1.8、0.2～1.8、0.02～0.18、0.02～0.2μg/ml,检测限均为0.02ng。

HPLC/ECD 同时测定生物样品中的组织胺和去甲肾上腺素

目的：建立了高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）配合电化学检测器（ＥＣＤ）同时分析组织和体液中的组织胺（Ｈｉｓ）和去甲肾上腺素（ＮＡ）的方法。方法：用邻苯二甲醛（ＯＰＡ）和２巯基乙醇（２－ＭＥ）进行柱前衍生，衍生产物在离子对试剂辛基磺酸钠的作用下，采用ＰａｔｉｓｉｌＯＤＳ柱，乙酸等试剂组成缓冲溶液与乙腈按７∶３配成流动相，３甲基组织胺（３ＭＨｉｓ）为内标，检测器电位０．７Ｖ，结果：用该方法对小鼠心脏组织和血液中的Ｈｉｓ和ＮＡ进行同时测定，得到了满意的分离和检测结果，最低检测量约为１５ｐｇ（Ｓ／Ｎ＝３）。结论：这个研究提示，用一些特殊试剂与样品产生衍生物，是得到满意的分离结果而不影响灵敏度的途径。

HPLC法测定CRF血浆抗坏血酸及脱氢抗坏血酸水平的研究

目的应用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)和电化学检测技术建立快速测定慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)患者血浆抗坏血酸(ascorbic acid,AA)及脱氢抗坏血酸(dehydroascorbic acid,DHAA)含量的方法。方法应用15%的偏磷酸溶液作为血液样本的蛋白沉淀剂及抗坏血酸的保护剂,处理后血浆样品-70℃保存,可极大提高血样中抗坏血酸的稳定性;分析柱为Inertsil ODS-3(DIKMA)150mm×4.6 mm,4.5μm;进样量为10μl,流速为0.8 ml/min,电压为0.8 V,柱温25℃;流动相由50 mmol/L磷酸钾和1 mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)溶液组成,pH为3.0。结果线性范围2μmol/L至200μmol/L;其峰高与浓度的相关系数大于0.999;抗坏血酸的平均回收率为101.89%,AA的日内(n=5)和日间(n=5)的平均相对标准偏差(RSD)分别为1.710%和5.915%。结论用高效液相色谱和电化学检测法检测CRF患者血浆中AA及DHAA含量,特异性强,灵敏度高。

替尼泊苷注射液含量及有关物质的HPLC-ECD分离检测

建立以高效液相色谱电化学检测对替尼泊苷及其有关物质进行分离分析的方法.研究了电化学安培检测中电位与检测量的关系,比较了电化学安培检测(ECD)和紫外检测两种不同的检测方法.以乙腈-水(38:62)为流动相.流速为1.0mL/min,以PhenomenexR LUNA Phenyl -Hexyl柱,玻碳圆盘电极为工作电极,银-氯化银电极为参比电极.在+0.7V电位处,实现了替尼泊苷及其有关物质与注射液中的赋形剂的分离分析.电化学安培检测与紫外检测相比,具有较高的灵敏度和选择性,能有效地应用于替尼泊苷注射液中有关物质的检测和含量的测定.

恩他卡朋及有关物质的HPLC-电化学检测器法测定

建立了高效液相色谱-电化学检测法测定恩他卡朋及其有关物质[(Z)-异构体和3,4-二羟基-5-硝基苯甲醛]。采用苯基柱,以0.04mol/L磷酸盐缓冲液(pH2.1)-甲醇(54∶46)为流动相,玻碳圆盘电极为工作电极,银-氯化银电极为参比电极,工作电位为+0.65V。恩他卡朋及其两个有关物质分别在0.06～40、0.06～40和0.06～27μg/ml浓度范围内线性关系良好,检测限分别为0.05、0.06和0.03ng。恩他卡朋的回收率为99.9%,RSD为1.5%。

HPLC-电化学法测定人血浆中盐酸克仑特罗浓度

目的 应用HPLC -电化学法检测人血浆中盐酸克仑特罗含量。方法 采用内标法定量,使用NucleodurC18色谱柱,以磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(7∶3,V/V ,pH 5 .0 )为流动相,检测器电位0 .80V(Ag/AgCl)。结果 该方法的线性范围1.5～12 0μg·L-1,回归方程Y =0 .75 3X +0 .0 11,r=0 .9993;最低检测浓度0 .0 15 μg·L-1;RSD 2 .6 %～4 .2 % ;平均回收率93.4 %。

HPLC-EC法测定人血浆中红霉素胺的浓度

目的 建立高效液相色谱 电化学检测法 (HPLC EC)测定人血浆中地红霉素的活性代谢物红霉素胺浓度。方法 以吲达帕胺为内标 ,血浆经碱化采用二氯甲烷提取 ,色谱柱为KromasilC18,流动相甲醇 :乙腈 :pH 7.8磷酸盐缓冲液为 13∶4 0∶4 7,流速为 0 .7mL/min ,电化学检测器工作电压为 +0 .9V。结果 红霉素胺血浆浓度在13.8～ 4 6 0ng/mL内具有良好线性关系 ,方法回收率 99.2 %～ 10 5 .4 % ,日内、日间相对标准差 (RSD)均 <10 %。结论 本方法简便、准确、灵敏、重现性好 ,可用于地红霉素的血药浓度监测及药代动力学研究。

HPLC-ECD法测定大观霉素的含量

建立了HPLC-ECD法测定大观霉素含量的分析方法。采用高效液相色谱-电化学检测器,Waters XBridge C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以pH 3.2的草酸盐缓冲溶液-乙腈(1000∶105,V∶V)为流动相,流速1.0 mL/min;柱后衍生溶液为21 g/L的NaOH溶液,流速0.5mL/min;ECD系统参数:极性为阳性,检波+0.12 V,氧化电位+0.70 V,还原电位-0.60 V,范围5μA。结果表明,大观霉素及4R-二氢大观霉素在40～320μg/mL范围内呈良好的线性关系(大观霉素r=0.9999,4R-二氢大观霉素r=0.9992),平均回收率为100.0%(n=9),RSD为0.2%。该方法解决了微生物效价测定大观霉素含量偏高的难题,且操作简便、结果准确,可用于大观霉素及相关制剂产品的质量控制。

HPLC-ECD测定重酒石酸去甲肾上腺素的有关物质

目的:建立重酒石酸去甲肾上腺素有关物质的高效液相色谱-电化学检测方法(HPLC-ECD)。方法:采用TSK C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);以0.05%庚烷磺酸钠溶液(用磷酸调节pH至2.2)-乙腈(925∶75)为流动相,玻碳圆盘电极为工作电极,银-氯化银电极为参比电极,工作电位为+0.6 V。结果:去甲肾上腺素、肾上腺素、去甲肾上腺酮、多巴胺和2-氯-1-(3,4-二羟基苯基)乙酮均在0.05～5μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9998,0.9999,1.0000,0.9999,0.9994(n=7);检测限分别为0.07,0.07,0.08,0.1和0.2 ng(S/N≥3)。4种有关物质的平均加样回收率为97.2%,100.4%,98.2%,103.1%;RSD为1.6%,1.5%,1.3%,2.8%(n=6)。结论:采用高效液相色谱-电化学检测法测定重酒石酸去甲肾上腺素有关物质,方法灵敏度高,选择性强,重现性好,能够用于重酒石酸去甲肾上腺素的质量控制。