Isolation, Partial Purification and Characterization of Texas Live Oak (<i>Quercus fusiformis</i>) Lectin

Lectins are carbohydrate-binding proteins with agglutination properties. There is a continuous interest in lectins due to their biological properties that can be exploited for medicinal and therapeutic purposes. The objective of this study was to isolate and characterize lectin activity in Texas Live Oak (Quercus fusiformis). More specifically, the study aimed to determine the lectin’s blood group specificity and pH stability, determine effects of seasonal variation, soil moisture and soil pH on lectin activity. The study also aimed to determine the presence of antifungal activity in Q. fusiformis extracts. Lectin activity was detected and compared via agglutination and protein assays. Protein partial purification was accomplished using diethylaminoethyl ion-exchange chromatography matrix. High Performance Liquid Chromatography (HPLC) was used to assess purity of the lectin. Results showed that Q. fusiformis extracts’ lectin activities are stable at a pH range of 5.2 - 9.2 but with a significant decrease in activity above pH 9.2. The lectin activity was significantly higher when assayed against sheep red blood cells as compared to other blood groups tested. Quercus fusiformis extract is devoid of antifungal activity against Aspergillus niger and Rhizopus stolonifer. The effects of seasonal variation, soil moisture and soil pH do not significantly correlate with lectin activity. Results from HPLC showed presence of three peaks indicating a partial purification of the Q. fusiformis lectin.

红肉火龙果果皮色素的分离、纯化和HPLC-MS分析

采用红外吸收光谱分析技术以及液相色谱-质谱联用技术,对提取、纯化得到的火龙果果皮红色素进行官能团、组分及结构分析.结果表明:火龙果果皮红色素均为甜菜苷;共得到6种组分的甜菜苷,以5-O-β-葡萄糖-甜菜苷为主要成分.

菊芋菊糖的超声波提取、纯化及HPLC法纯度检测

重点研究了菊芋菊糖的超声波提取、纯化工艺和利用高效液相色谱技术进行纯度检测。其中,超声波提取菊芋菊糖最佳工艺条件为:超声功率112W,提取温度70℃,提取时间20min,料液比1:20,菊糖得率为57.3%。菊糖提取液经石灰乳法和醇沉法除杂,再经S-8大孔吸附树脂脱色处理后色泽澄清,真空冷冻干燥得白色粉末,经高效液相色谱法检测,其纯度为96.2%。

连翘内生真菌的分离鉴定及其发酵液抑菌活性和HPLC测定

为获得能产生抑菌活性物质的连翘内生菌,从连翘新鲜组织中分离纯化内生真菌并进行形态学分析,牛津杯法测定发酵液的抑菌活性,对具有抑菌活性的菌株进行18S rRNA基因序列分析,并以连翘主要活性成分连翘苷和连翘酯苷A、B标准品为对照,HPLC测定发酵上清液中的连翘苷和连翘酯苷A、B含量。结果表明从连翘新鲜组织中获得了5株内生真菌,其中4株菌的发酵上清液对金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌有很好的抑菌活性,对这4株菌的分子生物学检测表明3株菌为枝胞菌,另1株菌为曲霉菌,HPLC结果显示这4株菌的发酵上清液中均含有一定浓度的连翘苷和连翘酯苷A、B,发酵液中发挥抑菌活性的成分是否与这三种物质有关需要进一步研究,但连翘内生真菌可以产生抑菌活性物质这一结果为后续利用微生物发酵生产抑菌物质提供了新的途径和新的菌种来源。

菜籽多肽稳定性及RP-HPLC分离制备高抗氧化活性(ORAC)组分研究

菜籽多肽是菜籽蛋白的降解物，性质与蛋白质类似，其稳定性受到很多环境因素的影响，进而影响多肽的生物活性。研究多肽的稳定的环境条件可为其利用与加工提供参数。本试验研究菜籽多肽的稳定性，试验得出：在加热温度60℃、pH6．0～8．0的条件下菜籽多肽较稳定，肠液中菜籽多肽稳定性优于人工胃液中。丙三醇、蔗糖和D-果糖对菜籽多肽的稳定性具有保护作用。进一步纯化菜籽多肽主要可收集6个组分，其中组分5显示较强的抗氧化性，其ORAC值为1744．29μmol／L TE／（g样品）。

屎肠球菌细菌素Enterocin E9 SPE/HPLC分离纯化方法的建立

为了获得单一的细菌素Enterocin E9成分,使其发挥最大抑菌活性,建立在线SPE/HPLC分离Enterocin E9的方法。通过细菌培养,上清液收集、浓缩,获得细菌素粗提样品,采用Sepbox 2D-250全自动二维液相分离系统,确认流动相组成,流速和洗脱时间等因素。提取的单一成分其抑菌效果是浓缩样品的2.4倍。该方法省时、省力、精密度高,为细菌素结构与功能的研究提供一条有效途径和方法。

芥子碱的提取纯化及HPLC法含量测定

目的:从白芥子中提取纯化芥子碱硫氰酸盐,并测定其含量,为中药外用制剂提供高纯度的天然透皮吸收促进剂。方法:白芥子脱脂,用不同浓度乙醇提取、浓缩物加20%硫氰酸钾溶液析晶,用蒸馏水反复重结晶。采用高效液相色谱法测定含量。色谱柱:Agilent TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:2%醋酸-乙腈(15∶85),检测波长:326 nm,流速:1.0 m L/min,柱温:30℃。结果:用80%乙醇提取,蒸馏水和20%硫氰酸钾溶液比例为4∶1时,所得芥子碱呈浅黄色针状结晶,得率0.51%,含量95.70%。结论:采用本法提取纯化芥子碱,方法简单,纯度高,可为中药外用制剂选择天然透皮促进剂提供参考。

RP-HPLC纯化碱性疏水肽的条件优化

本研究对象碱性疏水12肽粗品因组分复杂,经反相高效液相色谱纯化后其纯度仅有70%,因此,本研究从纯化过程中的进样量以及梯度方式两个方面进行条件优化,最终可得纯度为96.4%的碱性疏水12肽。

亚麻籽环肽HPLC分析和氧化还原产物研究

对从天然亚麻籽中提取的粗环肽的组分和氧化还原性质进行探讨。采用HPLC测定亚麻籽粗环肽中环肽C（CLC）、环肽E（CLE）、环肽D（CLD）、环肽A（CLA）的含量，并通过还原的方法减少粗环肽中的环肽种类，以制备环肽单体。结果表明，环肽样品峰分离度良好，线性范围10～150μg／mL（环肽A的为10～100μg／mL），相关系数0．9990～0．9997。所测4种环肽的含量分别为CLC8．10％，CLE7．66％，CLD0．58％，CLA35．18％。粗环肽经过氧化或还原反应之后，其种类均发生改变。经HPLC定性分析，氧化后剩余6种环肽，还原后的环肽仅剩下4种，通过与已知峰对比，得知4种环肽分别为环肽B、环肽L、环肽A和环肽M，在C18分析柱上分离良好，以此为理论依据，采用Microsorb100-5C18制备柱（240mm×21．4mm），柱温30℃，流速5mL/min，70％乙腈溶液等度洗脱，在50min内可有效分离制备环肽单体。

RP-HPLC法测定红花中红花红色素的含量

经从红花 (CarthamustinctoriusL)中分离纯化、HPLC检测、质谱鉴定得红花红色素纯品 ,并用其作为标准品 ,采用反相高效液相色谱法 ,测定了不同产地红花和商业红花产品中红花红色素的含量。该方法准确性高、重现性好 ,平均回收率为98.1%。

大孔树脂SPE-RP-HPLC检测大枣中的cAMP

目的:建立测定大枣中环磷酸腺苷成分的反相高效液相色谱方法。方法:市售大枣切碎用20%乙醇水提取,pH与有机溶剂协同作用下经过大孔树脂梯度分离纯化环磷酸腺苷。采用WatersXterraRP18色谱柱(150mm×3.9mm,5μm);流动相为甲醇-(0.050mol/L磷酸二氢钠溶液)(10:90)系统;柱温为(30±1)℃;流速为1.0ml/min;检测波长为254nm。结果:环磷酸腺苷与其它组分的色谱峰得到基线分离。环磷酸腺苷的线性范围在0.08～0.8μg之间,相关系数r=0.9999。加样平均回收率为100.04%,环磷酸腺苷的相对标准偏差为1.21%(n=6)。最低检测限为0.5ng。结论:本方法分离效果好,快捷准确,灵敏度高,重复性好,可作为评价大枣及其制品的参考依据。

RP-HPLC分离纯化化学合成的催产素类似物

目的对化学合成的催产素类似物九肽进行分离纯化。方法采用RP-HPLC法。Develosil ODS C18柱,柱温为室温;流动相为15%乙腈+水+0.1%三氟乙酸;流速1 m l.m in-1;检测波长280 nm。结果进样量100 mg时分离效果最好,纯度可达96.5%。结论在最优化条件下,通过多次样品收集和冷冻干燥,可得到高纯度的催产素类似物。

茶叶籽中黄酮的分离及HPLC-MS联用分析

用大孔吸附树脂HPD826分离纯化茶叶籽总黄酮的粗提物,对影响HPD826树脂动态吸附、解吸的各因素进行系统研究。最终确定最佳条件为:上样液质量浓度1.8 mg/m L、上样速率2 m L/min、体积分数50%乙醇作为洗脱剂、洗脱剂流速1 m L/min。纯化后的茶叶籽黄酮纯度为40.81%,比纯化前提高了7.63倍。通过高效液相色谱-质谱联用分析大孔吸附树脂纯化后样品,初步确定茶叶籽中4种黄酮的结构,均为柚皮素的多糖苷。

植物激素分离纯化及HPLC分析研究进展

对植物激素提取分离纯化研究进展及HPLC(高效液相色谱技术)测定植物激素含量的研究进行综述,以期对植物激素的研究提供参考。

HPLC测定湿疹康喷剂中苦参碱与氧化苦参碱的含量

目的:采用不同纯化方式和优化色谱条件建立湿疹康喷剂中苦参碱与氧化苦参碱的测定方法。方法:分别采用浓氨水碱化后三氯甲烷萃取方法、AB-8大孔树脂方法、中性氧化铝吸附方法纯化样品,通过HPLC进行含量测定,确定最佳纯化工艺;采用氨基硅烷键合硅胶柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相分别为乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液(80∶10∶10)、乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液(80∶12∶8);检测波长为220 nm。结果:苦参碱的线性范围为Y=646567X+8332.1(r=0.999 9);氧化苦参碱的线性范围为Y=501 596X-414 182(r=0.9994)。结论:三种不同纯化方式中,浓氨水碱化后三氯甲烷萃取方法中苦参碱与氧化苦参碱测定含量最好,流动相为乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液(80∶10∶10)时苦参碱与氧化苦参碱峰形最佳,保留时间合适。

小麦中杂色曲霉毒素的硅镁吸附柱层析分离纯化及HPLC的定量分析

目的:建立小麦中杂色曲霉毒素含量的高效液相色谱检测方法。方法:样品中的杂色曲霉毒素经正己烷提取后,采用国产硅镁型吸附剂制备层析柱净化后,运用高效液相色谱法测定,色谱柱为Nova-Pak C18柱,以甲醇-水(70∶30,V/V)为流动相,流速0.7mL/min,检测波长为246nm进行检测。结果:该方法平均加标回收率为79.26%,相对标准偏差为3.84%,最低检出量为0.017μg/kg。结论:本方法简便、准确、成本低,可用于小麦中杂色曲霉毒素含量的测定。

莓叶委陵菜黄酮与三萜类成分提纯与HPLC条件的初步研究

在适宜的工艺条件下,即采70%乙醇,料液比为1:25,5次回流,水浴回流时间为2h,对莓叶委陵菜(Potentilla fra-garioides)中黄酮类、三萜类化合物进行了粗提取,经大孔树脂纯化,得到精制黄酮类、三萜类化合物溶液。然后探究其高效液相色谱分析的条件并在此条件下进行定性定量分析。结果表明:在流动相为乙腈和0.2%冰醋酸(体积比60:40),流量为1.0mL/min,检测波长为280nm的色谱条件下,样品溶液与标准溶液的峰均较好,且峰形对称,芦丁和熊果酸有不同的Rf值,说明两者在此条件下可以很好的分离。该方法测定简便,分离效果好,重复性好,灵敏度高。

超声萃取-HPLC-MS/MS分析鱼肉中磺胺抗生素

建立了超声萃取-高效液相色谱-质谱（LC-MS/MS）同时测定鱼肉中7种磺胺类抗生素（磺胺、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺吡啶）和1种磺胺增效剂（甲氧苄啶）的方法。采用乙酸钠缓冲液∶乙腈（1∶1,V/V）混合液进行超声萃取,以SAX/PSA双层柱与HLB柱组成复合柱进行净化和富集,以HPLC-MS/MS进行分析。提取方法有效降低鱼肉中的基质效应,回收率为80%-117%,检出限〈1μg/kg。方法应用于市售鱼肉中磺胺的检测。

HPLC-ELSD法同时测定黄芪中两种皂苷成分及大孔树脂纯化工艺研究

目前针对黄芪的皂苷的提取分离方法繁杂且效率较低,分析检测和质量控制基本是以某个化合物为基础,而鲜有将黄芪的不同组分同时测定的方法。建立同时检测黄芪皂苷Ⅱ及黄芪甲苷的HPLC-ELSD法,利用该分析方法对三种不同大孔树脂及不同洗脱条件的提取物皂苷成分含量进行评价,筛选出最佳吸附树脂及大孔树脂富集纯化条件,为黄芪的进一步开发利用提供可靠的提取纯化工艺方案以及分析检测手段,为黄芪的质量控制提供新的途径。

SPE-HPLC法快速检测发酵液中紫杉醇的含量

针对红豆杉内生真菌发酵液中紫杉醇的含量测定进行探讨,以建立快速高效低耗的检测方法。采用C18固相萃取柱对紫杉醇进行吸附,用不同浓度的甲醇-乙酸铵和甲醇分别作为洗脱剂对其进行洗脱,比较两者的洗脱效果,洗脱液用HPLC进行检测;色谱条件为:流动相甲醇(v)∶水(v)∶乙腈(v)=20∶45∶35,流速:0.70ml/min,检测波长:227nm。结果表明,浓度为80%的甲醇溶液洗脱效果较好,紫杉醇的回收率为87.6%。